[實驗目的]
觀察紅細胞凝集現象。
學習ABO血型鑒定方法,掌握血型鑒定原理。
[實驗原理]
ABO血型是根據紅細胞表面存在的凝集原決定的。存在A凝集原的稱為A血型,存在B凝集原的稱為B血型。而血清中還存在凝集素。當A凝集原與抗A凝集素相遇或B凝集原與抗B凝集素相遇時,會發生紅細胞凝集反應。一般A型標準血清中含有抗B凝集素,B型標準血清中含有抗A凝集素,因此可以用標準血清中的凝集素與被測者紅細胞反應,以確定其血型。
同種動物不同個體的紅細胞凝集稱為同族血細胞凝集作用。不同動物的互相混合有時也可產生紅細胞凝集,稱為異族血細胞凝集作用。對于動物的天然血型抗體了解不多,而且效價也很低,所以同種動物第一次,一般不會引起嚴重后果。但第二次輸血就必須進行交配試驗,才能決定是否能相互輸血。
[實驗對象]
正常人。
[實驗藥品]
A型B型標準血清。
[器械]
雙凹玻片,采血針,竹簽,75%酒精棉球,干棉球,玻璃蠟筆(記號筆),尖頭滴管,。
[實驗方法與步驟]
1.ABO血型的鑒定:
(1)取雙凹玻片一塊,在兩端分別標上A和B,中央標記受試者的號碼。
(2)在A端和B端的凹面中分別滴上相應標準血清少許。
圖6.9-1 ABO血型鑒定示意圖
(3)75%酒精棉球消毒無名指端,用采血針刺破指端,用消毒后的尖頭滴管吸取少量血(也可用紅細胞懸浮液,見下述),分別與A端和B端凹面中的標準血清混合,放置1~2 min后,能肉眼觀察有無凝血現象,肉眼不易分辨的用顯微鏡觀察。
(4)根據凝集現象的有無判斷血型(圖6.9-1)。
2.實驗
(1)分別對供血動物和受血動物消毒、靜脈取血,制備成血清和紅細胞懸浮液。紅細胞懸浮液是將受檢者的血液一滴,加入裝有生理鹽水約1 ml的小試管中,即為2%的紅細胞懸浮液。加蓋備用。
(2)取雙凹玻片一塊,在兩端分別標上供血動物和受血動物的名稱或代號,分別滴上它們的血清少許。
(3)將供血者的紅細胞懸浮液吸取少量,滴到受血者的血清中(稱為主側配血,圖6.9-2);將受血者的紅細胞懸浮液吸取少量,滴入供血者的血清中(稱為次側配血),混合。放置10~30 min后,肉眼觀察有無凝集現象,肉眼不易分辨的用顯微鏡觀察。如果兩次交叉配血均無凝集反應,說明配血相合,能夠輸血。如果主側發生凝集反應,說明配血不合,不論次側配血如何都不能輸血。如果僅次側配血發生凝集反應,只有在緊急情況下才有可能考慮是否輸血。
[注意事項]
1.指端、采血針和尖頭滴管務必做好消毒準備。做到一人一針,不能混用。使用過的物品(包括竹簽)均應放入污物桶,不得再到采血部位采血。
2.精消毒部位自然風干后再采血,血液容易聚集成滴,便于取血。取血不宜過少,以免影響觀察。
3.采血后要迅速與標準血清混勻,以防血液凝固。
4.在進行交叉配血實驗時,一定要防止將主側配血和次側配血搞混了。
[實驗結果]
報告你的血型。