試劑盒組成
|
組分 |
50次 |
100次 |
|
吸附柱和收集管 |
各50個 |
各100個 |
|
裂解液 |
12 mL |
24 mL |
|
析出液 |
4.5 mL |
9 mL |
|
洗滌液 |
9 mL |
18 mL |
|
洗脫液 |
3mL |
6 mL |
|
消化液 |
1.2 mL |
2.4 mL |
|
說明書 |
1份 |
1份 |
產品介紹
BIOG RNA Swab Kit是常州百代生物科技有限公司研制的專門用于提取各種口腔拭子、泌尿生殖道拭子及痰液樣本中的RNA的試劑盒。BIOG RNA Swab Kit采用了最新的優質進口離子膜，裂解液和洗脫液經過多次優化，能高效地分離RNA。提取得到的RNA較其它品牌的同類試劑盒產量更大，純度更高，最大限度地去除了蛋白、色素、脂類等雜質污染，可以直接應用于Northern 雜交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文庫構建、體外翻譯等各種常規分子生物學實驗。
操作步驟
請自行準備：無水乙醇、生理鹽水、1M NaOH、無RNA酶1.5mL離心管。
取出析出液和洗滌液，按以下操作：
a) 析出液：4.5mL加入25.5mL無水乙醇；9mL加入51mL無水乙醇。
b) 洗滌液：9mL加入21mL無水乙醇；18mL加入42mL無水乙醇。
c) 配制好的析出液如出現沉淀，可在37℃溶解，搖勻后使用。
樣本處理：a) 拭子：向無RNA酶的1.5mL離心管中加入800μL生理鹽水，將拭子收集的樣本置于生理鹽水中，涮洗20秒，使細胞完全脫落，貼離心管壁擠干拭子上的液體，12,000 rpm 離心5 min。
b) 痰液：向收集的痰液中加入4倍體積1M NaOH，室溫放置30分鐘，每10分鐘振蕩混勻一次，12,000 rpm離心5 min，棄上清，加入0.5mL生理鹽水，混勻，12,000 rpm離心5 min。
棄700或400 μL上清，剩余100μL上清，充分振蕩混勻15秒，加入200μL 裂解液和20μL 消化液，振蕩混勻，56℃水浴10 分鐘。
加入500μL析出液，輕輕顛倒混勻，如有半透明懸浮物，不影響RNA的提取與后續實驗。
將吸附柱放入收集管內，將上述溶液吸入吸附柱內，靜置2 min，12,000 rpm 4℃離心1 min，棄收集管內廢液。
將吸附柱放回收集管內，加500μL 洗滌液至吸附柱內，12,000 rpm 4℃離心1 min，棄收集管內廢液。
將吸附柱放回收集管內，12,000 rpm 4℃離心2 min，離去殘留的洗滌液。
取出吸附柱，放入新的1.5 mL 離心管內，加入30-50 μL 洗脫液，靜置3 min，12,000 rpm 4℃ 離心2 min，收集RNA溶液。
-70℃保存，或直接用于下一步實驗。
注意事項：
1. 為防RNA酶污染，實驗過程中最好戴一次性干凈手套、口罩，使用處理過的無RNA酶的容器和無RNA酶的超純水 。
2. 析出液、洗滌液均含有刺激性化學物質，請做好防護措施，避免直接接觸皮膚，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛，請立即用清
水或生理鹽水沖洗，必要時請就醫。
3. 裂解液如有白色絮狀物析出屬正常現象，置于37℃水浴中溶解即可。
儲存、運輸和有效期
本試劑盒可常溫運輸，室溫（15-25℃）保存，有效期為12個月，消化液請于-20℃存放，避免反復凍融。
質量控制
本產品經嚴格的質量檢驗證明，無生物污染
注意 ：本產品僅用于科研