原理：這一方法基于考馬斯亮藍G-250有紅藍兩種不同的形式。在一定濃度的乙醇及酸性條件下，可配成淡紅色的溶液，當與蛋白質結合后，產生藍色化合物，反應迅速而穩定。反應化合物在465－595nm處有最大的光吸收值，化合物顏色的深淺與蛋白濃度的高低成正比關系，因此可檢測595nm的光吸收值的大小計算蛋白的含量。
溶液：
①Bradford儲存液
100ml95％乙醇
200ml88％磷酸
350mgServaG藍
室溫下長期保持穩定。
②Bradford工作液
425ml雙蒸水
15ml95％乙醇
30ml88％磷酸
30ml Bradford儲存液
用濾紙過濾，保存于室溫棕色瓶中，可保存數周，但在使用前需要過濾。
③配制1mg/ml牛血清蛋白（BSA）
做標準曲線：
表4.2 蛋白質濃度測定標準曲線制作表
樣品號
蛋白量
（ug） 標準溶液
1mg/mlBSA（ul） 實驗緩沖液
（ul） Bradford
試劑（ml） A595
1 0 0 100 3 0
2 2.5 2.5 97.5 3 0.120
3 2.5 2.5 97.5 3 0.130
4 5 5 95 3 0.250
5 5 5 95 3 0.215
6 7.5 7.5 92.5 3 0.331
7 7.5 7.5 92.5 3 0.364
8 10 10 90 3 0.460
9 10 10 90 3 0.442
10 12.5 12.5 87.5 3 0.531
11 12.5 12.5 87.5 3 0.562
12 15 15 85 3 0.633
13 15 15 85 3 0.617
14 17.5 17.5 82.5 3 0.684
15 17.5 17.5 82.5 3 0.650
16 20 20 80 3 0.721
17 20 20 80 3 0.727