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  • 發布時間:2022-03-08 20:50 原文鏈接: DNA測序非同位素銀染色法的試劑準備

      1. SILVER SEQUENCETM DNA測序試劑盒。

      2. 丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺儲備液(38%丙烯酰胺 W/V,2%甲叉雙丙烯酰胺 W/V):95 g丙烯酰胺,5 g甲叉雙丙烯酰胺溶于140 ml 雙蒸水中,定容至250 ml,0.45 mm過濾器過濾后,貯于棕色瓶中,置于4℃冰箱可保存2周。

      3. 10%過硫酸銨,0.5 g過硫酸銨溶于4 ml水中,定容至5 ml,應新配新用。

      4. 10×TBE緩沖液(1 mol/L Tris, 0.83mol/L 硼酸,10 mmol/L EDTA): 121.1 g Tris,51.35 g硼酸,3.72 g Na2EDTA ·2H2O,溶于雙蒸水中定容至1升,置于4℃下可貯存2周,其pH約為8.3。

      5. TBE電極緩沖液:10×TBE 緩沖液稀釋至1×TBE備用。

      6. TEMED

      7. 固定/停止溶液:10%冰醋酸(V/V)配制2升備用。

      8. 染色溶液:硝酸銀2 g,甲醛3 ml,溶于2升超純水中備用。

      9. 顯影溶液:60 g碳酸鈉(Na2CO3)溶于2升超純水中,使用前加3 ml 37%甲醛和40 ml硫代硫酸鈉溶液(10 mg/ml)。

      10. 95%乙醇。

      11. 0.5%冰乙酸。

      12. Sigmacote (Sigma CAT. #SL-2)

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