DNA聚合酶，又稱DNA依賴的DNA聚合酶（DNA—dependent DNA polymerase，DNA pol），它是以親代DNA為模板，催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一類酶。此酶最早是美國科學家Arthur Komberg于1957年在大腸桿菌中發現的，被稱為DNA聚合酶Ⅰ（DNA polymerase Ⅰ，簡稱polⅠ）以后陸續在其他原核生物及真核生物中找到了多種DNA聚合酶。這些DNA聚合酶的共同特征為：
①具有5’→3’聚合酶活性，這就決定了DNA只能沿著5’→3’方向合成；
②需要引物，DNA聚合酶不能催化DNA新鏈從頭合成，只能催化dNTP加入核苷酸鏈的3'-OH末端。因而復制之初需要一段DNA引物的3’一OH端為起點，合成5’→3’方向的新鏈。