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  • 發布時間:2019-10-15 16:48 原文鏈接: ELISA

    ELISA是一種經典的測定液體樣本中蛋白含量的方法。


    該方法優點在于可以準確定量蛋白含量,且測定樣本的種類可以多種多樣。本期小編帶你一起了解ELISA不同樣品的制備方法。


    細胞培養上清液


    移取細胞培養基至離心管中,4℃ 下以 1500 rpm 的速度離心 10 分鐘。

    立即分裝上清液,并將樣品儲存在 -80℃ 下。盡量減少凍融循環。


    細胞提取物


    將組織培養板置于冰上。

    吸取培養基,并小心地用冰冷的 PBS 清洗細胞一次。

    吸取 PBS,每 100 mm 孔板加入 0.5 mL 完全提取緩沖液。

    刮取細胞收集在傾斜的孔板中,并移至預冷的試管內。

    短暫渦旋,冰上孵育 15-30 分鐘。

    4℃ 下以 13 000 rpm 的速度離心 10 分鐘,沉淀不溶性內容物。

    將上清液(即可溶性細胞提取物)等分,置于冰上清潔冷凍管,并將樣品儲存在 -80℃ 下。盡量減少凍融循環。


    條件培養液


    將細胞置于完全(含血清)生長培養基中,使細胞增殖至所需的融合水平。

    去除生長培養基,并非常小心地用幾毫升溫 PBS 清洗。重復清洗步驟。

    去除最后一次 PBS 洗液,小心地加入無血清生長培養基。

    孵育 1-2 天。

    移取培養基至離心管中,4℃ 下以 1500 rpm 的速度離心 10 分鐘。

    立即分裝上清液,并將樣品儲存在 -80℃ 下。盡量減少凍融循環。


    牛奶


    采集樣品,4℃ 下以 10 000 x g 離心 2 分鐘。

    分裝上清液并將樣品儲存在 -80℃ 下。盡量減少凍融循環。


    血漿


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