GPC原理

分配色譜

1．原理

分配色譜利用固定相與流動相之間對待分離組分溶解度的差異來實現分離。分配色譜的固定相一般為液相的溶劑，依靠圖布、鍵合、吸附等手段分布于色譜柱或者擔體表面。分配色譜過程本質上是組分分子在固定想和流動相之間不斷達到溶解平衡的過程。

色譜法

液液分配色譜用載體主要有硅膠、硅藻土、及纖維素等。通常，分離水溶性成分或極性較大的成分入生物堿、苷類、糖類、有機酸等化合物時，固定相多采用強極性溶劑，如水、緩沖溶液等，流動相則采用氯仿、乙酸乙酯、丁醇等弱極性有機溶劑，稱之為正相色譜；但當分離脂溶性化合物時，如高級脂肪酸、油脂、游離甾體等時、則兩相可以顛倒，固定相可以用石蠟油，而流動相則用水或甲醇等強極性溶劑，故稱之為反相分配色譜。

2．支持劑

常用的有硅膠、硅藻土、纖維素粉、和濾紙等。

常用反相硅膠薄層色譜及柱色譜的填料系將普通硅膠經下列方式進行化學修飾，鍵合上長度不同的烴基形成親脂性表面。

乙基、辛基、或十八烷基親脂性順序如下：RP-18＞ RP-8 ＞ RP-2

3．操作方式

分配薄層層析法是指根據各種成分在固定相（液）和移動相（液）兩相間的分配系數不同而達到相互分離的一種色譜法。