原理
GST 純化系統是利用GST （glutathione-S-transferase
）融合蛋白與固定的谷胱甘肽（GSH）通過硫鍵共價親和，通過GSH交換洗脫的原理來進行純化 。1ml樹脂大約可結合5-8
mg融合蛋白，并可反復使用數次。試劑u IPTG（異丙基硫代-β-D-半乳糖苷） 2g IPTG 溶解入10ml
水，過濾除菌，分裝，-20℃保存。u Lysis buffer （50ml）1)2.5ml 1 M Tris，pH8.0 2)0.1ml
0.5ml EDTA 3)0.292g NaCl4)0.5ml Triton X-100 5)0.25ml 1M DTT u Elution
buffer 1)0.615g glutathione 2)10 ml 1M Tris，pH8.0 3)90ml distilled water
.
操作步驟
1)挑一個克隆至2ml LB液中（Amp+ ）
2)37℃振搖至OD600值約為0.6
3)將2ml菌液加入100 ml LB中
4)37℃振搖至OD600值約為0.6
5)加入IPTG至終濃度為1mM
6)繼續搖3～4h
7)離心（5000 rpm，5min，4℃）
8)用10×柱體積的lysis buffer懸浮細菌
9)超聲破碎細胞
10)離心（12,000rpm,15min,4℃），取上清
11)用濾紙過濾
12)加0.5 ml 50%谷胱甘肽瓊脂糖beads于層析柱
13)5×柱體積的lysis buffer洗層析柱
14)樣品過柱
15)5×柱體積的lysis buffer洗層析柱
16)3×柱體積的elution buffer洗脫蛋白
17)收集蛋白：0.5ml/管 18)取20ml樣品SDS-PAGE鑒定可以在buffer里增加點蛋白酶抑制劑，防止蛋白的降解。