（一）原理
白細胞介素-2（IL-2）是由活化的輔助性T細胞分泌的一種細胞增殖因子，具有促T細胞增殖和維持T細胞體外長期生長的作用。CTLL-2為IL-2依賴細胞株可用作IL-2生物學活性定量檢測。本實驗采用MTT分析法，通過測定CTLL-2細胞的增殖量，確定IL-2生物學活性單位。檢測IL-2的生物學活性，可以間接了解輔助性T細胞的功能。
（二）材料
（1）1）10%FCS-RPMI-1640培養液，含2mmol/L谷氨酰胺、25mmol/LHEPES、10U/ml青霉素、100ug/ml鏈霉素。
（2）MTT（4，5-dimethythiazoyl-zyl2,5-diphenylterrajolium bromiole）用PBSA緩沖液配制成1mg/ml濃度工作液，4℃避光保存。
（3）IL-2標準品。
（4）PHA（200ug/ml）。
（三） 方法
（1）人外周血T細胞分泌IL-2的誘生：
①人PBMC分離：采用常規淋巴細胞分層液濃度梯度離心法分離PBMC，用10%FCS-RPMI-1640培養液調整細胞濃度為1×105/ml
加樣：接種細胞懸液于24孔培養板，每孔0.5lml，每孔再加PHA0.5ml，37度，5% CO2孵育48小時。
③回收上清：吸出細胞培養上清，12000r/min離心15分鐘，收集上清，-20度凍存。
（2）IL-2生物活性測定
①CTLL-2細胞制備：取傳代培養24～48小時對數生長期的CTLL-2細胞，用培養液離心洗滌2次，每次1000r/min離心5分鐘，再用10%FCS-RPMI-1640培養液調制細胞濃度為1×105/ml。
②加樣：將細胞接種于96孔培養板，每孔0.1ml。同時將待測樣品和標準品做倍比稀釋，每孔加入0.1ml，每個稀釋濃度均設3復孔。另設培養液對照孔（100ul細胞+100ul培養液）。37℃，5% CO2孵育40小時。
③MTT摻入：輕輕吸取上清液100ul，加MTT（1mg/ml）100ul，37度，5% CO2孵育2小時。
④測定：離心培養板，2000r/min，5分鐘，吸棄上清液，每孔加100ulDMSO，作用30分鐘，用酶標測定儀于波長570nm測吸光值（A）。
⑤計算：用標準品濃度和對應的凈A570nm值（實驗孔-陰性對照孔的A570nm值）繪制標準曲線。根據標準曲線求出待測樣品IL-2水平。
（四）關鍵點
（1）CTLL-2細胞存活率應大于95%。
（2）因標本中含IL-4等，可影響IL-2的測定，最好采用抗IL-4mAb吸附劑除去IL-4。