為了驗證rHDL/D在腦內和細胞內藥物傳遞性效果,熒光素c6替代donepezil,熒光成像及流式分析顯示,經熒光標記的rHDL/c6轉運通過BBB的速率是Lipos/c6的兩倍,即細胞bv-2對Lipos/c6的內化率約為rhdl/c6的40%,表明apoA-I的修飾有助于納米藥物具有高效率的BBB滲透通過HCMEC/D3單層結構,
有助于提高AD的治療效果,并且rHDL/Do的存在可顯著提高Aβ1–42單體/低聚物與溶酶體的結合,從而促進Aβ1–42
的降解,對AD治療起作用。
進一步在有害的Aβ1–42低聚物損傷的SH-SY5Y細胞模型中,加入rHDL/Do 納米藥物可以顯著恢復細胞活力,而加入Lipos/Do,細胞活性無明顯變化,證明rHDL/Do納米藥物可以保護Aβ誘導的細胞損傷。

★ 總結 ★
本研究利用OpenSPR 創新LPSR 技術的操作簡單,高效及結果精確的特性,快速檢測了構建的脂質體與donepezil重組體rHDL/Do 納米藥物及apoA-I與AD疾病發生相關的靶標Aβ1-42 之間相互作用,發現rHDL/Do與Aβ1–42親和力明顯提高,為開啟rHDL/Do納米藥物治療AD提供了第一手的關鍵性數據,使得后期細胞學和動物體藥物治療效果測定實驗得以開展,并通過熒光成像等方法在細胞和小鼠內證實rHDL/Do 納米藥物可保護Aβ1–42誘導的神經細胞損傷,從而開發了一種非常有前景的可在AD治療中的控制和改善疾病得rHDL/Do納米藥物,在阿爾茨海默病治療藥物開發中取得又一項重大突破。

OpenSPR 分子互作儀在AD藥物研發中的獨特性
? 創新LSPR技術---基于波長變化檢測分子間相互作用;
? 多參數檢測---Ka、Kd、KD、EC50、蛋白濃度測定;
? 操作簡單---模塊化提示,1小時即可掌控;
? 高精準---檢測不受溫度、緩沖液折射率影響;
? 無需專用校正通道---可忽略的bulk效應;
? 高效率---上樣、出結果,一鍵式分析,10min出結果,1-2h出完整動力學檢測結果。