2013年9月16日,賽默飛世爾科技Orbitrap技術發明人Alexander A. Makarov來到中國科學院上海藥物所,為到場的專家、學生等帶來一場精彩的報告《Orbitrap前沿》。
報告現場
報告現場
Alexander A. Makarov
orbitrap技術的原理基礎是1923年由Kingdon教授提出的,Makarov于1996年加盟HD Technologies公司后便開始研究Orbitrap,2000年賽默飛(熱電)收購了HD Technologies后便組建了研究團隊致力于Orbitrap的開發,并于2005年推出了第一代Orbitrap質譜儀LTQ-Orbitrap。
Orbitrap分析器的結構分為一件紡錘形內棒電極和兩件內紡錘形外套電極,離子的鏡像電流信號就是從兩件外套電極之間獲得的差分信號,其中的離子必須以一定的動能繞著內棒電極做近似圓周運動。Orbitrap是靜電電場力作用下r方向的圓周運動復合z方向的簡諧震蕩,僅有簡諧震蕩的頻率被檢測。
Orbitrap分析器
從2005年到目前為止,賽默飛Orbitrap系列陸續經歷LTQ Orbitrap Classic、LTQ Orbitrap Discovery、LTQ Orbitrap Velos、LTQ Orbitrap XL、MALDI LTQ Orbitrap、Exactive、Exactive Plus、Orbitrap Velos Pro、Orbitrap Elite、Q Exactive、Orbitrap Fusion等11款產品。
Orbitrap Elite
2011年推出的Orbitrap Elite,體現了多種先進的技術,包括它的質量分析器幾何學、獨特的信號處理技術、改善離子束到 Orbitrap 質量分析器傳輸效率的全新離子轉移光學系統,以及新的鏡像電流前置放大器。這些功能與新的 Velos Pro? 離子阱技術(線性檢測電子學、快速掃描和中性阻斷前端離子光學)相結合能提高整個系統的定量性能,加快分析速度并增加運行時間。 這些獨特的創新相結合能提供:最大化的分辨能力,在m/z為400時高于240,000 FWHM; 掃描速度增加了四倍,提高了定量結果的精度度和可信度,而且增強了與UHPLC的兼容能力; 高品質的更高能量碰撞誘導解離(HCD)質譜圖和FTMSn譜圖裂解樹能得到可靠的結構鑒定結果;超高的靈敏度能檢測極低豐度的蛋白質、肽和代謝物。
Q-Exactive
同年推出的臺式高分辨質譜Q-Exactive,相對于Exactive來說它在軌道阱前面又串聯了一個四極桿,離子從離子源進入例子傳輸通道之后,可使用四極桿質量分析器進行離子篩選,篩選后的母離子進入Oribitrap中進行高分辨分析。這款系統的核心價值之一是:非常適合于未知物的掃描和定量;最大的優勢在于:不需要搜集很多的標準品、就可進行方法優化。
Makarov還介紹到目前以及未來光譜復用技術的使用包括:采用Multiplexing技術在一次Orbitrap高分辨掃描中檢測多個SIMs/MRMs離子對;數據非依賴性的質譜采集(DIA,Data Independent Acquistion);同一前體離子多價態的選擇、最佳條件下每個碎片都會增加序列覆蓋度;結合不同裂解技術對相同前體離子進行分析(例如CID、HCD、ETD技術);等等。
Orbitrap Fusion Tribrid
Makarov在報告最后介紹了今年賽默飛推出的新品—Orbitrap Fusion Tribrid “三合一”質譜系統,集成四極桿、Orbitrap和線性離子阱三種質量分析器于一身。離子在離子傳輸多極桿聚焦之后進入到Orbitrap進行全掃描,得到一張一級高分辨全掃描譜圖;在Orbitrap進行離子掃描的同時,四極桿則開始選擇第一個母離子,該母離子進入到離子阱中裂解進行二級質譜掃描;在離子阱進行第一個母離子裂解和掃描的同時,四極桿便又開始選擇第二個母離子,這樣依次循環進行選擇,最后同時得到一張全掃描高分辨一級譜圖,以及數張低分辨離子阱MSMS譜圖。
Orbitrap Fusion系統實現了三個不同質量分析器的共同協作,將分析性能提升至全新的高度:
(1)四極桿用于進行母離子選擇,分辨率最低可達0.4 amu,具有出色的靈敏度和選擇性;
(2)超高場Orbitrap提供超過450,000的分辨率和高達15 Hz的掃描速率,具有無法逾越的分析選擇性和速度;
(3)多級桿離子回旋通道及雙壓線性離子阱提供 MSn HCD、CID 和 ETD 裂解,可在最高達20 Hz的掃描速度下進行快速、靈敏的質量數分析。同步的母離子選擇增強了儀器的信噪比。
Makarov先生最后總結說到,Orbitrap自發明出來后已經歷了一個比較漫長的過程,未來仍會繼續不斷改進發展;賽默飛最新的產品在適用性和性能上都創造了真正的突破;基于C-trap和Orbitrap性能以及其他質量分析儀的聯合高效使用也將得到更進一步的發展。
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