試劑準備
1、 TROzlo試劑、氯仿、75%乙醇（0.1% DEPC配制）。
2、 塑料器皿需用0.1% DEPC水浸泡。
3、 0.1%DEPC水：100ml dd水中加入DEPC0.1ml，充分振蕩，37℃孵育12h以上，121℃高壓滅菌20min，于4℃保存。
操作步驟
1、 樣品處理
（1） 組織：50-100mg組織中加入1ml TROzlo試劑。
（2） 單層細胞：加入TROzlo試劑1ml/cm2平板。
（3） 懸浮細胞：處理前洗滌細胞，以防止RNA降解。每5-10×105動物、植物或酵母細胞，或1×107細菌加入1 ml TROzlo試劑。
2、 將上述樣品于15-30℃靜置5min，使核蛋白充分解離。
3、 加入0.2ml（1 ml TROzlo試劑）氯仿，蓋緊蓋子，充分劇烈振蕩15s并于15-30℃靜置2-3min。
4、 于2-8℃ 12000g離心15min。離心后樣品分層，上層水相中含RNA，下層有機相中含蛋白和DNA。
5、 取上清，加入0.5ml異丙醇，輕輕混勻，于15-30℃靜置10min后，在管底會出現膠狀沉淀，即為RNA。
6、 于2-8℃ 12000g離心10min后棄去上清。
7、 向沉淀中加入1ml 75%乙醇，輕輕混勻。
8、 于2-8℃ 7500g離心5min后棄上清
9、 將RNA樣品涼干（不要徹底干燥），加入適量DEPC水溶解（可于55-60℃促溶10min）。
注意問題
1、 在加入氯仿之前（第1步），樣品能于-60- -70℃保存至少一個月。
2、 RNA沉淀（第6步）在75%乙醇中于2-8℃能保存至少一周，于-5- -20℃能保存至少一年。
四、 RNA定量
RNA（mg/mL）=40×OD260×稀釋倍數（n）/1000
RNA純品OD260/OD280=2.0
RNA電泳
（1）用1×TAE電泳緩沖液制作瓊脂糖凝膠，加1×TAE電泳緩沖液至液面覆蓋凝膠。
（2）在超凈工作臺上，用移液器吸取總RNA樣品4μl于封口膜上。在實驗臺上再加入5μl 1×TAE電泳緩沖液及1μl 的10×載樣緩沖液，混勻后，小心加入點樣孔。
（3）打開電源開關，調節電壓至100V，使RNA由負極向正極電泳，約30min后將凝膠放入EB染液中染色5min,用清水稍微漂洗。在紫外透射檢測儀上觀察RNA電泳結果。