應用原代細胞進行高通量復雜炎癥分析
炎癥反應的一個重要步驟是細胞表面抗原與血管中免疫細胞的特異性結合。因此,對這些分子變化的及時監控,如VCAM, E-selectin,以及內皮細胞上的HLADR等等,我們用多通道熒光讀取人原代細胞表面的炎癥標記,并在此基礎上評估不同介質對炎癥反應的調節作用。
HTRF cAMP HiRange檢測
HTRF?是Cisbio Bioassays公司開發的一項檢測生物分子相互作用的多用途技術。這項技術結合了熒光共振能量轉移(FRET)技術和時間分辨(TR)熒光測定,可消除短壽命的背景熒光。這里,我們展示了如何用SpectraMax微孔板讀板機進行可靠的、高通量的HTRF檢測,并具有完美的Z’因子和EC50值的高度重復性。
利用SoftMax Pro軟件自帶的HTRF預設實驗模板大大簡化了數據采集和分析。
HTRF cAMP Dynamic 2 和IP-One檢測
具有HTRF認證的SpectraMax M5e多功能微孔板讀板機提升了雙單色器系統和多模式檢測功能靈活性,擴展了研究者們的檢測方法范圍。當在SpectraMax M5e讀板機上使用來自Cisbio公司的IP-One和cAMP HTRF進行檢測,結果顯示出非常寬的動態范圍和完美的Z’因子,其范圍可從0.78到0.91。利用SoftMax Pro軟件自帶的HTRF預設實驗模板大大簡化了數據采集和分析。
Quant-iT PicoGreen dsDNA 實驗
雙鏈DNA通常使用微孔板讀板機通過測量DNA溶液的260nm吸收光進行定量。然而,這種方法通常在微孔板讀板機上只能檢測到最低250 ng/mL的濃度。對于生物學應用涉及到小體積樣品,如新一代測序和擴增產物定量時,更靈敏的方法才能滿足需求。Life Technologies公司的Quant-iTPicoGreen dsDNA實驗對于DNA的特異性更好且比傳統的吸收光方法靈敏1000倍。產品信息中標稱在微孔板上進行此實驗,使用單一染料濃度時動態區間可達250 pg/mL到1000 ng/mL。此篇應用文章展示使用MolecularDevices公司SpectraMax? 熒光微孔板讀板機和Quant-iT PicoGreen實驗,用戶能穩定的檢測低至100 pg/mL的雙鏈DNA。