T4噬菌體是屬于大腸桿菌T系噬菌體,為烈性噬菌體。頭部為二十面體對稱,尾部為螺旋對稱,稱為蝌蚪形噬菌體。頭部大小為80nm×110nm,內部含有雙鏈、線狀DNA分子,相對分子質量為1.12 x 108;尾部由尾鞘、尾管、尾板、尾釘和尾絲五個部分組成,長短為110nm×20nm,尾絲可伸展,幅度可達140nm。
頭部外殼含8種蛋白質,呈橢圓形二十面體,尾部含2種蛋白質,呈棒狀。T4噬菌體DNA連接酶,最初來自受T4噬菌體侵染的大腸桿菌細胞,T4 DNA連接酶既能連接黏性末端,又能連接平齊末端。