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  • 發布時間:2019-07-09 20:31 原文鏈接: VITEK32全自動微生物鑒定及藥物敏感試驗分析系統1

    1. 工作原理
    1.1 用途:VITEK-32全自動微生物分析系統,用于對臨床標本分離細菌進行菌種鑒定及藥物敏感試驗分析檢測。
    1.2 檢測原理:VITEK-32全自動微生物分析儀由真空充液泵/讀數器/恒溫器、電腦主機及打印機組成。真空充液泵三分鐘內把樣本注入試驗卡中;讀數器/恒溫箱可同時容納32個反應卡,自動恒定培養溫度(35.5℃),每小時讀取每張卡內反應變化數值;電腦主機負責分析資料的儲存、系統的操作及分析程式的運作。分析儀自動進行細菌生化鑒定,VITEK試卡的反應池內含各種風干生化反應底物或抗菌藥物,試卡由標準濃度菌液填充,然后放入測試架槽內,采用比色法/比濁法,應用動態學方法原理,讀數器每小時光掃描測試卡,以獲取卡片內樣本在培養介質內生長變化值,自動檢測每張卡片的反應情況,與數據庫中的數據進行比較分析,達到系統預設的閾值時,自動報告檢測結果。


    1.2.1細菌鑒定:從臨床標本分離并純化的細菌,嚴格按無菌操作技術配制菌懸液、充液接種于鑒定卡內,放入VITEK-32全自動微生物分析系統讀數器/恒溫箱。測試卡內含有20~30多項生化反應試驗,讀數器每一小時通過光掃描并獲取透光率變化值,隨著細菌生長,讀數器光掃描光線通過量也隨之下降,計算機儲存所獲取的讀數并進行分析,鑒定卡內每一孔的生化反應與其相應的域值相比較,等于或高于域值為陽性反應(+);反之,低于域值為陰性反應(-)。鑒定卡內的細菌經過一定時間培養后,卡中每一生化反應結果將與計算機數據庫中的相應文件連接,計算機分析處理并將生化反應結果轉換為概率值,陽性試驗概率可直接從反應文件中取得,陰性試驗概率則需:100 – 陽性百分概率。然后根據每一試驗的概率值計算與反應文件中每一細菌分類單位的相似值,選擇兩個最大相似值按大小作為首先和次選鑒定結果,計算機按照每三項試驗為一組,每三項試驗陽性反應值依次分別為4、2、1,陰性反應值為0,以每組陽性反應值總和為一位數,得到一個10~11位數生物編碼,經過計算機與數據庫中的反應文件相比較分析處理,最終得到細菌鑒定結果。
    1.2.2 藥物敏感試驗:待測試細菌經無菌操作技術配制成一定濃度的菌懸液,按一定比例倍比稀釋并充液接種入藥敏試卡,放入VITEK-32全自動微生物分析系統讀數器/恒溫箱。測試卡內含有15種左右不同濃度的抗菌藥物,讀數器每一小時通過光掃描并獲取透光率變化值,隨著細菌生長,讀數器光掃描光線通過量也隨之下降,計算機儲存所獲取的讀數并進行分析,讀數器以在零時的讀數作為初始讀數,初始讀數和每一小時的讀數變化以百分率表示。藥敏卡內設有陽性對照孔,當陽性對照孔達到閾值,同時細菌鑒定結果一旦獲得,全部孔的斜率開始計算,每一小時透光下降百分率以㏒2對數值繪制成生長曲線,計算機分析計算其生長曲線斜率,一旦某孔的斜率已確定,該藥孔的斜率與陽性對照孔進行校正,得到校正斜率,校正斜率從0開始,“0”表示細菌未生長,“1”表示細菌生長等同于陽性對照孔。最后每一種藥物以它的含藥孔校正斜率之和作為它的復合斜率,每一孔藥的復合斜率等于其在藥敏卡中所占藥孔的數目,計算機利用復合斜率即可計算出細菌對某種藥物的最低抑菌濃度(MIC),獲得的MIC與計算機數據庫中判斷文件比較,自動判別細菌對某種藥物的敏感度。 
    2. 檢測儀器與試劑
    錯誤!未找到引用源。.1 儀器:VITEK-32全自動微生物分析系統,微生物數據管理軟件系統中文電腦,     VITEK 比濁儀(產品號:No.52 - 1210)。
    2.2 試劑:
    錯誤!未找到引用源。 鑒定卡:
    卡名 中文名 鑒定范圍
    GPI 革蘭陽性菌鑒定卡 葡萄球菌屬、微球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬、氣球菌、棒狀桿菌屬及李斯特菌和丹毒絲菌等
    GNI+ 革蘭陰性菌鑒定卡 腸桿菌科、弧菌科和非發酵菌
    NFC 非發酵菌鑒定卡 假單胞菌屬、不動桿菌屬、產堿桿菌屬、伯克霍爾德菌、叢毛單胞菌、鞘氨醇桿菌、弧菌屬、氣單胞菌屬等
    NHI 奈瑟菌嗜血桿菌鑒定卡 奈瑟菌屬、嗜血桿菌屬、莫拉菌屬、布蘭漢菌、金氏菌、加德納菌等
    BAC 芽胞桿菌鑒定卡 革蘭陽性需氧芽胞桿菌
    ANI 厭氧菌鑒定卡 放線菌、擬桿菌、真桿菌、乳桿菌、梭菌、消化球菌、消化鏈球菌等厭氧菌
    YBC 酵母樣真菌鑒定卡 假絲酵母菌、隱球菌、地霉菌、絲孢酵母菌、紅酵母等深部真菌
    錯誤!未找到引用源。篩選卡:
    卡名 篩選范圍
    UID-3 尿道病原菌
    EPS 腸道病原菌
    錯誤!未找到引用源。 藥敏卡: 
    卡名 中文名 種類
    GPS 革蘭陽性球菌藥敏卡 GPS-101、102、SA、TA、TB等
    GNS 革蘭陰性桿菌藥敏卡 GNS-506、NT、OP、F1、F2、F3等
    注:藥敏卡內含10~15種不同濃度梯度抗菌藥物,藥敏卡種類不同,其所含抗菌藥物不同。
    2.3 試劑貯存:室溫(15 ~ 30℃),避光狀態下貯存。每一個鑒定卡和藥敏卡有有效日期,超過有效期不可使用。
    2..4 儀器及試劑生產廠家:法國生物梅里埃公司。


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