實驗方法原理 骨髓內的鐵蛋白及含鐵血黃素（細胞外鐵）和幼稚紅細胞的鐵粒（細胞內鐵）在鹽酸環境下與亞鐵氰化鉀作用生成亞鐵氰化鐵，即普魯士藍反應．
試劑、試劑盒 鹽酸溶液亞鐵氰化鉀溶液堿性復紅貯存液復染應用液甲醛
實驗步驟
一、 實驗試劑：
1. 4％鹽酸溶液，小心取濃鹽酸（38％）40ml慢慢滴加至冷蒸餾水340ml中，邊加邊攪拌，此液在室溫下保存數月．2. 40g/L亞鐵氰化鉀溶液，（在室溫可保存數月）3. 堿性復紅（Basic Fucbsin）貯存液：溶解堿性復紅1g于無水乙酸10ml及5％的碳酸溶液90ml以上混勻．4. 復染應用液：加上述堿性復紅貯存液3ml于蒸餾水100ml中，在室溫保存數天．5. 37％甲醛．
二、 實驗操作：
l. 將血片和骨髓片在空氣中干燥，將涂片置甲醛蒸氣中固定2-3min。
2. 將等量40g/L亞鐵氰化鉀和4％鹽酸溶液混合，新鮮配制加熱至約56℃將待檢已固定的血涂片或骨髓片放入其中30分鐘后取出用流水沖洗。
3. 置復染應用液中復染5min，依次用蒸餾水沖洗，無水乙醇沖洗，蒸餾水沖洗，最后在空氣中干燥后用顯微鏡檢查．四. 實驗結果判斷：鐵可染色成藍色顆粒，小珠及小塊。
細胞外鐵：先低倍鏡觀察未完全展開的骨髓小粒，再用油鏡觀察。
“－” 無藍色鐵粒可見
“＋” 有少量鐵粒或僅占少鐵小珠
“2＋” 有多鐵粒和鐵珠和少數小塊
“3＋” 有許多鐵粒或有鐵珠和少數小塊．
“4＋” 有極多鐵粒、鐵珠．并有許多小塊
細胞內鐵：計數100個有核紅細胞，記錄陽性細胞（胞漿中有藍色顆粒者）的百分率同時注意細胞內鐵顆粒數目，大小、染色深淺等，有無環形鐵粒的紅細胞．參考值：正常人骨髓涂片中細胞外鐵呈少量至較多的鐵粒，鐵珠、多數人呈“＋”，少數人為“2＋”
幼紅細胞有鐵粒的陽性率為12％一14％．多數以中、晚幼細胞為主，大多數陽性的幼紅細胞內含1-2個細小而無規律的鐵粒，僅少數含3-5個鐵粒，一般不見含5個以上鐵粒的幼紅細胞及環形鐵粒幼紅細胞．
注意事項
l. 所用器材必須清潔，事先經除鐵處理，尤其是載玻片．
2. 亞鐵氰化鉀－鹽酸反應應用液必須臨時配制．
3. 作細胞外鐵檢查時，需用含有骨髓小粒的涂片．
4. 細胞內鐵計數應以中. 晚幼紅細胞為誰．