細胞自噬過程的觀察和檢測方法
細胞自噬過程的觀察和檢測可應用于:(1)研究細胞防御和應激調控機制;(2)自噬體膜的來源問題研究。(3)細胞器自噬研究。實驗方法原理正常培養的細胞自噬活性很低,不適于觀察,因此,必須對自噬進行人工干預和調節,包括自噬誘導劑、自噬抑制劑等工具藥,以及反義RNA干擾技術(Knockdown)、突變株篩選、外源基因導入等。并通過熒光顯微鏡或者Western Blot等技術來檢測。實驗材料細胞試劑、試劑盒自噬誘導劑自噬抑制劑單丹磺酰尸胺(MDC)0.1%SDS儀器、耗材熒光顯微鏡細胞爬片實驗步驟一、正常培養的細胞自噬活性很低,不適于觀察,因此,必須對自噬進行人工干預和調節二、細胞經誘導或抑制后,需對自噬過程進行觀察和檢測,常用的策略和技術有:1、觀察自噬體的形成;2、在熒光顯微鏡下采用GFP-LC3融合蛋白來示蹤自噬形成;3、利用Western Blot檢測LC3-II/I比值的變化以評價自噬形成;4、檢測長壽蛋白的批量降解;5、MDC......閱讀全文
細胞自噬過程的觀察和檢測方法
細胞自噬過程的觀察和檢測可應用于:(1)研究細胞防御和應激調控機制;(2)自噬體膜的來源問題研究。(3)細胞器自噬研究。實驗方法原理正常培養的細胞自噬活性很低,不適于觀察,因此,必須對自噬進行人工干預和調節,包括自噬誘導劑、自噬抑制劑等工具藥,以及反義RNA干擾技術(Knockdown)、突變株篩選
細胞自噬過程的觀察和檢測方法
工具藥、融合蛋白等示蹤自噬形成 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 正常培養的細胞自噬活性很低,不適于觀察,因此,必須對自噬進行人工干預和調節,包括自噬誘導劑、自噬抑制劑等工具藥,
細胞自噬過程的觀察和檢測方法
工具藥、融合蛋白等示蹤自噬形成 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 正常培養的細胞自噬活性很低,不適于觀察,因此,必須對自噬進行人工干預和調節,包括自噬誘導劑、自噬抑制劑等工具藥,
關于細胞自噬的觀察檢測的介紹
細胞經誘導或抑制后,需對自噬過程進行觀察和檢測,常用的策略和技術有: 1、觀察自噬體的形成 由于自噬體屬于亞細胞結構,普通光鏡下看不到,因此,直接觀察自噬體需在透射電鏡下。Phagophore的特征為:新月狀或杯狀,雙層或多層膜,有包繞胞漿成分的趨勢。自噬體(AV1)的特征為:雙層或多層膜的
細胞自噬過程
細胞自噬(autophagy)是真核生物中進化保守的對細胞內物質進行周轉的重要過程。該過程中一些損壞的蛋白或細胞器被雙層膜結構的自噬小泡包裹后,送入溶酶體(動物)或液泡(酵母和植物 )中進行降解并得以循環利用。
細胞自噬過程
a、吞噬泡噬過程存在于膜的形態變化,體現了膜的流動性特點,a正確;b、線粒體是有氧呼吸的場所,氧氣在線粒體中被消耗,線粒體功能退化,氧氣的消耗量減少,b正確;c、細胞及時清除受損的線粒體,維持了細胞內部環境的相對穩定,c正確;d、當細胞養分不足時,細胞“自噬作用”一般都會增強,為細胞提供更多的養分,
自噬的自噬發生過程
在此過程中,自噬體的形成是關鍵,其直徑一般為 300 ~ 900 nm,平均 500 nm,囊泡內常見的包含物有胞質成分和某些細胞器如線粒體、內吞體、過氧化物酶體等。與其他細胞器相比,自噬體的半衰期很短,只有 8 min 左右,說明自噬是細胞對于環境變化的有效反應。由于自體吞噬較少受到關注,而且很難
細胞自噬效應及過程
自噬效應的發生取決于自噬流過程是否完成,而自噬流的意思是自噬的完整動態過程,包括自噬體形成、自噬體與溶酶體融合及后續內含物的降解和回收。巨自噬與微自噬作用過程的對比命名為“自噬”(英語:Autophagy)是由比利時化學家克里斯汀·德·迪夫在1963年發現的。當代的自噬研究是1990年代酵母的研究人
細胞自噬的研究方法
正常培養的細胞自噬活性很低,不適于觀察,因此,必須對自噬進行人工干預和調節,經報道的工具藥有:一、自噬誘導劑(1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin :模擬內質網應激(2) Carbamazepine/ L-690,330/ Lithium Chlor
細胞自噬的研究方法
正常培養的細胞自噬活性很低,不適于觀察,因此,必須對自噬進行人工干預和調節,經報道的工具藥有:?一、自噬誘導劑 ?(1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin :模擬內質網應激(2) Carbamazepine/ L-690,330/ Lithium Ch