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    人腫瘤抗原的識別與鑒定實驗——免疫沉淀法

    人腫瘤抗原可以:(1)用于腫瘤診斷;(2)免疫治療。實驗方法原理 本實驗用Dynabeads protein A 進行免疫復合物的純化。Dynabeads A 蛋白 (Dynabeads Protein A) 在免疫沉淀中有以下作用:(1)將方案時間減少到 30 分鐘。(2)顯著降低非特異性結合造成的背景(3)保持蛋白質復合物的完整。對珍貴的蛋白質沒有物理壓力。實驗材料腫瘤細胞試劑、試劑盒PBS生理鹽水裂解液蛋白酶抑制劑儀器、耗材培養瓶細胞刮棒離心管低溫離心機-80℃冰箱探針型超聲波恒溫水浴鍋實驗步驟一、 裂解細胞1. 方向刮取細胞。將細胞懸液轉移到離心管,離心取沉淀,-80℃ 保存。(收集細胞要迅速,低溫下進行,以減弱蛋白酶的作用)2. 裂解細胞。采用RIPA 裂解體系,使用前40℃ 預冷,按107 個細胞加入1.0 ml 裂解液,吹打混勻,加入適量的蛋白酶抑制劑(如cocktail......閱讀全文

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    人腫瘤抗原的識別與鑒定實驗

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    表達蛋白檢測實驗_免疫沉淀法

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    免疫沉淀法濃縮蛋白質實驗

    實驗方法原理通過免疫沉淀,用蛋白質特異性抗體能夠定量分離目的蛋白。免疫沉淀法由三個步驟組成。首先將特異性抗體加入細胞提取物,第二步加入經化學固定的金黃色葡萄球菌,以確保形成大量沉淀。這些細菌通過蛋白質 A 和抗體形成復合物,蛋白質 A 與免疫球蛋白的 Fe 部分有高度的親和性。或者說,純化的蛋白質

    免疫沉淀法濃縮蛋白質實驗

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    免疫沉淀實驗——免疫沉淀放射性標記抗原

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    免疫沉淀實驗——抗Ig血清免疫沉淀放射性標記抗原

    實驗材料蛋白質試劑、試劑盒SDS儀器、耗材離心機搖床實驗步驟1.  按基本方案進行,但以下說明的操作步驟已經修改: (2a)按每毫升加入2 μl 正常血清的量對放射性標記抗原進行預澄清處理,加入適量的抗血清,于4℃放置12~18 h, 111 000 g 離心10 min,保留上

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