多聚酶鏈式反應PCR
多聚酶鏈式反應PCR ：(1)PCR原理：在模板DNA、引物和4種脫氧單核苷酸存在的條件下依賴于耐高溫的DNA聚合酶的酶促合成反應。以欲擴增的DNA做為模板，以和模板正鏈和負鏈末端互補的兩種寡聚核苷酸做為引物，經過模板DNA變性、模板引物復性結合、并在DNA聚合酶作用下發生引物鏈延伸反應來合成新的模板DNA。模板DNA變性、引物結合(退火)、引物延伸合成DNA這三步構成一個PCR循環。每一循環的DNA產物經變性又成為下一個循環的模板DNA。這樣，目的的DNA的數量將以2n的形式累積，在2小時內可擴增30(n)個循環，DNA量達原來的上百萬倍；(2)PCR過程：1. 模板DNA的變性：模板DNA經加熱至95℃左右一定時間后，DNA雙鏈被解離為單鏈并游離于溶液中的過程；2. 模板DNA與引物的退火(復性)：人工合成的一對引物在適合的溫度下(通常50-65℃)分別與模板DNA需要擴增區域的兩翼進行準確配對結合的過程；3. ......閱讀全文
PCR新手指南：快速PCR技術與快速PCR儀的區別
在PCR儀上完成一個PCR反應所需要的時間決定于以下幾個因素：1、模塊升溫和降溫時間2、模塊與PCR管內溫度平衡時間3、延伸時間4、循環次數下面就以上幾點做一點分析，以便大家了解快速PCR技術與快速PCR儀的區別。1、模塊升溫和降溫度時間PCR儀一般會標明升溫速度和降溫速度，但標的大多是zui大變溫
PCR新手指南：快速PCR技術與快速PCR儀的區別
在PCR儀上完成一個PCR反應所需要的時間決定于以下幾個因素：1、模塊升溫和降溫時間2、模塊與PCR管內溫度平衡時間3、延伸時間4、循環次數下面就以上幾點做一點分析，以便大家了解快速PCR技術與快速PCR儀的區別。1、模塊升溫和降溫度時間PCR儀一般會標明升溫速度和降溫速度，但標的大多是最大變溫速度
PCR疑難解答終點PCR及相關PCR反應的分類
? ? ? ?1.PCR的概念?? ? ? ?PCR，即聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction，PCR），主要由高溫變性、低溫退火和適溫延伸三個步驟反復的熱循環構成：即模板DNA先經高溫變性為單鏈，在DNA聚合酶和適宜的溫度下，兩條引物分別與兩條模板DNA鏈上的一段互
普通PCR、實時熒光定量PCR和數字PCR對比分析（二）
模板 DNA 量越多，熒光達到域值的循環數越少，即 Ct 值越小。Log 起始模板濃度與 Ct 呈線性關系，通過已知起始拷貝數的標準品可作出標準曲線，根據樣品 Ct 值，就可以計算出樣品中所含的模板量。目前常用熒光標記方法 方法 優點
知曉PCR，定量PCR與數字PCR的實驗方法與選擇
從1985年至今的30多年時間里，PCR分析經歷了三代技術的發展。一代傳統PCR技術，采用瓊脂糖凝膠電泳的方法對PCR產物進行定性分析。第二代熒光定量PCR技術，通過在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號的積累實時監控PCR進程，最后用Cq值對基因進行定量分析。第三代數字PCR技術，通過將PC
普通－PCR、實時熒光定量－PCR－和數字－PCR－對比分析（一）
提起 PCR，在生物及其相關行業內可謂如雷貫耳，無人不知無人不曉，其影響之深，應用之廣可見一斑。1985 年，美國 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人發明了聚合酶鏈反應（PCR），實現了在試管中模擬細胞內的 DNA 復制。然而，采用 E-coli DNA 聚合酶進行 PCR，由于該酶不
閑聊PCR
雖然長了些, 但耐心看完,應該對你的問題有所幫助 各位戰友 我們來聊聊PCR?：） PCR可以說是目前分子生物學實驗中應用最為廣泛的一種技術。從最初的在幾個水浴鍋里把試管放來放去，到現在各種先進的PCR儀， 到REAL TIME PCR。 設備是越來越先進，方法是越來越多，但基本的原理還是那套
Inverse－PCR
Genomic DNA Prep from 5 ml culture, resuspend in 50 μl TE Digestions Use either AciI, AluI, HaeIII, HpaII, RsaI or TaqI for Leu trans
實時－PCR
一旦 RNA 收集純化完成，可以采用對不同的細胞質或核糖體 RNA 專一的商業化的實時 PCR 試劑盒，以組成型的 rRNA 為標準對所有資料進行標定。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。試劑、試劑盒cDNA 樣品rRNA 引物和探針目的基因的引物和探針Tag Man Un
PCR佐劑
?Various authors recommend DMSO and glycerol to improve amplification efficiency (higher amount of product) and specificity (no unspecific products) o
PCR佐劑
Various authors recommend DMSO and glycerol to improve amplification efficiency (higher amount of product) and specificity (no unspecific products) of
Basic－PCR
實驗概要The ?following basic protocol serves as a general guideline and a starting ?point for any PCR amplification. Optimal reaction conditions (incubati
Degenerate－PCR
Degenerate PCR is in most respects identical to ordinary PCR, but with one major difference. Instead of using specific PCR primers with a given sequen
Quantitative－PCR
實驗概要Quantitative PCR involves co-amplification of two templates: a constant amount of a preparation containing the desired target sequence and var
PCR技術
實驗方法原理 PCR是在模板DNA、引物和dNTPs的存在下依賴于DNA聚合酶的酶促反應。PCR技術的特異性取決于引物和模板結合的特異性。反應分為變性、退火、延伸三步，經過一定的循環，介于兩個引物之間的特異DNA片段得到大量擴增。實驗材料 轉基因水稻葉片DNA引物試劑、試劑盒 礦物油MgCl2Pri
實時－PCR
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 cDNA 樣品 rRNA 引物和探針 目的基因的引物和探針 Tag Man Universal PCR Master Mix ? 超純水
Inverse－PCR
Genomic DNA Prepfrom 5 ml culture, resuspend in 50 μl TEDigestionsUse either AciI, AluI, HaeIII, HpaII, RsaI or TaqI for Leu transposon libraries37 de
PCR技術
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 PCR是在模板DNA、引物和dNTPs的存在下依賴于DNA聚合酶的酶促反應。PCR技術的特異性取決于引物和模板結合的特異性。反應分為變性、退火、延伸三步，經過一定的循環，介于兩個引物之間的特異DNA片段得到大量擴增。?
實時－PCR
試劑、試劑盒 cDNA 樣品rRNA 引物和探針目的基因的引物和探針Tag Man Universal PCR Master Mix 超純水儀器、耗材 序列監測儀實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑來自方案 5 的 cDNA 樣品20X18SrRNA 引物和探針（AppliedBiosyste
PCR引物
PCR Primer Design and Reaction Optimization?(Molecular Biology Techniques Manual)??PCR Primer Design?(Newman Lab)??PCR Primer Design?(Eppendorf)Detail
pcr原理
PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子拷貝。在實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈
反向PCR
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 標準 PCR 技術應用于定位在兩個引物之間（指向內部）的一段 DNA 片段的擴增。與此相反，反向 PCR (inverse PCR) 應用于擴增和克隆與已知 DNA 序列某一個末端相鄰的側翼的未知 DNA 序列，這種未知
反向PCR
標準 PCR 技術應用于定位在兩個引物之間（指向內部）的一段 DNA 片段的擴增。與此相反，反向 PCR (inverse PCR) 應用于擴增和克隆與已知 DNA 序列某一個末端相鄰的側翼的未知 DNA 序列，這種未知序列沒有引物可以利用。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原
PCR技術
?PCR常見問題總匯?PCR產物的電泳檢測時間 一般為48h以內，有些最好于當日電泳檢測，大于48h后帶型不規則甚致消失。?假陰性，不出現擴增條帶 PCR反應的關鍵環節有①模板核酸的制備，②引物的質量與特異性，③酶的質量及，?④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。 模板：①模
PCR－protocol
PCR reactionProtocol for 50μl reaction - adjust amounts if necessary, for a 20μl reaction use the same volumes of primer and dNTP-mix, but adjust the
Long－PCR
Two long PCR steps:First round of the nested PCR step of the end point dilution procedure to quantitate the cDNA.First round of the nested PCR step of
標準PCR
·?????????What's PCR??(Michael Blaber's Lab)Illustrated introduction to usr/localious aspects of PCR technique. It's very valuable not onl
Long－PCR
Two long?PCR?steps:First round of the nested PCR step of the end point dilution procedure to quantitate the cDNA.First round of the nested PCR step of
原位PCR
About in situ PCR?(Applied Biosystems)Basic information about in situ PCR and its applications.The?In Situ?PCR: Amplification and Detection in a Cellu
pcr原理
PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子拷貝。在實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈