液相色譜儀反相色譜柱的平衡
液相色譜儀反相色譜柱是保存在乙腈中,新柱應先用10~20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱,一定確保分析樣品所使用的流動相與乙腈-水互溶。每天用足夠的時間以流動相平衡色譜柱,會在處理問題方面獲得zui大的“補償”,而且色譜柱的壽命會變得更長。平衡操作步驟:1、平衡開始時,將流速緩慢提高,用流動相平衡色譜柱直到獲得穩定的基線。緩沖鹽或離子對試劑流速如果較低,需要較長時間來平衡。2、如果使用的流動相中含有緩沖鹽,應注意用純水“過渡”。即每天分析開始前,必須先用純水沖洗30min以上,再用緩沖鹽流動相平衡。分析結束后,必須先用純水沖洗30min以上,除去緩沖鹽之后,再用甲醇沖洗30min保護色譜柱。......閱讀全文
反相液相色譜柱樣品前處理
反相液相色譜柱樣品前處理由于被分析樣品種類繁多,加之樣品基質復雜,色譜柱極易被污染,是導致柱壓升高、分離能力下降的原因之一,通常有下面兩種情況。1、直徑大于篩板孔徑的顆粒物,堵在柱頭篩板上,極易導致柱壓高;上樣前用針式濾器過濾將很好的解決這個問題,一般有0.22和0.45um規格,根據您的需要選擇合
反相液相色譜柱樣品前處理
反相液相色譜柱樣品前處理由于被分析樣品種類繁多,加之樣品基質復雜,色譜柱極易被污染,是導致柱壓升高、分離能力下降的原因之一,通常有下面兩種情況。1、直徑大于篩板孔徑的顆粒物,堵在柱頭篩板上,極易導致柱壓高;上樣前用針式濾器過濾將很好的解決這個問題,一般有0.22和0.45um規格,根據您的需要選擇合
反相液相色譜柱樣品前處理
反相液相色譜柱樣品前處理由于被分析樣品種類繁多,加之樣品基質復雜,色譜柱極易被污染,是導致柱壓升高、分離能力下降的原因之一,通常有下面兩種情況。1、直徑大于篩板孔徑的顆粒物,堵在柱頭篩板上,極易導致柱壓高;上樣前用針式濾器過濾將很好的解決這個問題,一般有0.22和0.45um規格,根據您的需要選擇合
反相液相色譜柱樣品前處理
反相液相色譜柱樣品前處理由于被分析樣品種類繁多,加之樣品基質復雜,色譜柱極易被污染,是導致柱壓升高、分離能力下降的原因之一,通常有下面兩種情況。1、直徑大于篩板孔徑的顆粒物,堵在柱頭篩板上,極易導致柱壓高;上樣前用針式濾器過濾將很好的解決這個問題,一般有0.22和0.45um規格,根據您的需要選擇合
正相和反相色譜柱的區別
在正相色譜中,一般采用極性鍵合固定相,硅膠表面鍵合的是極性的有機基團,鍵合相的名稱由鍵合上去的基團而定。最常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)鍵合相。流動相一般用比鍵合相極性小的非極性或弱極性有機溶劑,如烴類溶劑,或其中加入一定量的極性溶劑(如氯仿、醇、乙腈等),以調節流
簡述反相HPLC色譜柱的再生步驟
1.取下色譜柱,然后重新連接到色譜儀上,讓液體/氣體反方向流過色譜柱。 2.用HPLC級水沖洗掉鹽/緩沖液。以1毫升/分鐘的速度把25毫升水泵入色譜柱。 3.用25毫升異丙醇沖洗色譜柱。 4.用25毫升二氯甲烷沖洗色譜柱。 5.用25毫升正己烷沖洗色譜柱。
反相色譜柱的優點和影響因素
液相色譜柱通常分為正相柱和反相柱。正相色譜柱大多以硅膠為柱,或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團的鍵合相硅膠柱;反相色譜柱填料主要以硅膠為基質,在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(ODS)稱為C18柱,其它常用的反相柱還有C8,C4,C2和苯基柱等。另外還有離子交換柱,GPC柱,聚合物填料柱等
反相色譜儀色譜柱的維護與清洗
色譜柱是反相色譜儀最主要的部件,被測樣品能否被很好的分離和測定,色譜柱的性能起著決定性作用。因此,應注意色譜柱的維護與清洗,以延長色譜柱的使用壽命。一、色譜柱清洗體積確定:色譜柱清洗體積一般是柱體積的10~20倍。根據柱內徑和柱長計算出柱體積,清洗時間可計算出。二、色譜柱清洗:為了使被測樣品和雜質不
C18柱是正相還是反相色譜柱
C18柱是反相色譜柱,CN柱是正相色譜柱。正相色譜是采用極性固定相(如帶有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅膠、三氧化二鋁等)、非極性流動相(如正己烷等)的分離方法。這是一種根據分子的極性大小將其分開的液相色譜技術。反相色譜(RPC)是指利用非極性的反相介質為固定相,極性有機溶劑的水溶液為流動相,根據
C18柱是正相還是反相色譜柱
C18柱是反相色譜柱,CN柱是正相色譜柱。正相色譜是采用極性固定相(如帶有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅膠、三氧化二鋁等)、非極性流動相(如正己烷等)的分離方法。這是一種根據分子的極性大小將其分開的液相色譜技術。反相色譜(RPC)是指利用非極性的反相介質為固定相,極性有機溶劑的水溶液為流動相,根據
C18柱是正相還是反相色譜柱
C18柱是反相色譜柱,CN柱是正相色譜柱。正相色譜是采用極性固定相(如帶有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅膠、三氧化二鋁等)、非極性流動相(如正己烷等)的分離方法。這是一種根據分子的極性大小將其分開的液相色譜技術。反相色譜(RPC)是指利用非極性的反相介質為固定相,極性有機溶劑的水溶液為流動相,根據
C18柱是正相還是反相色譜柱
C18柱是反相色譜柱,CN柱是正相色譜柱。正相色譜是采用極性固定相(如帶有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅膠、三氧化二鋁等)、非極性流動相(如正己烷等)的分離方法。這是一種根據分子的極性大小將其分開的液相色譜技術。反相色譜(RPC)是指利用非極性的反相介質為固定相,極性有機溶劑的水溶液為流動相,根據
C18柱是正相還是反相色譜柱
C18柱是反相色譜柱,CN柱是正相色譜柱。正相色譜是采用極性固定相(如帶有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅膠、三氧化二鋁等)、非極性流動相(如正己烷等)的分離方法。這是一種根據分子的極性大小將其分開的液相色譜技術。反相色譜(RPC)是指利用非極性的反相介質為固定相,極性有機溶劑的水溶液為流動相,根據
C18柱是正相還是反相色譜柱?
C18柱是反相色譜柱,CN柱是正相色譜柱。正相色譜是采用極性固定相(如帶有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅膠、三氧化二鋁等)、非極性流動相(如正己烷等)的分離方法。這是一種根據分子的極性大小將其分開的液相色譜技術。反相色譜(RPC)是指利用非極性的反相介質為固定相,極性有機溶劑的水溶液為流動相,根據
反相鍵合相液相色譜儀概述
反相鍵合相液相色譜儀又稱非極性鍵合相液相色譜儀,在液相色譜儀中占有重要地位。一、分離機理:有疏溶劑理論和雙保留機理。1、疏溶劑理論:疏溶劑理論認為非極性烷基鍵合相是在硅膠表面蒙覆了一層以Si-C鍵化學鍵合的十八烷基(或其它烴基)的分子毛。溶質分子(分析物)有非極性部分和極性官能團部分組成。當溶質分
淺析液相色譜儀中正反相色譜置換現象
在液相色譜分析中關于正反相色譜的置換內容我們做以下總結: 1.首先用正己烷(硅膠柱)將色譜系統包括正相柱平衡好(保證20分鐘內基線平直,無峰出現); 2.卸掉硅膠柱,封好保存; 3.將進樣閥與檢測器短路,用異丙醇沖洗色譜系統10分鐘(流速1ml/min).在這期間空撥進樣閥三次;
液相色譜儀色譜柱保護柱如何使用?
色譜柱是液相色譜中重要的一個組成部分。眾所周知,色譜是一種分離、分析手段,分離是其核心,而色譜柱擔負的就是其分離作用,可以說,色譜柱就是液相色譜儀的心臟。保護柱則是為了降低分析柱受污染程度,延長分析柱使用壽命的重要組成部分。? 如何使用保護柱? 1、專柱專用,避免保護柱成為不同項目間的交叉污
探討正相色譜柱與反相色譜柱的安裝保存和檢測
色譜柱的安裝:1、首先應確認柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積,進樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內徑盡可能使用內徑較小的管線,同時控制進樣器、色譜柱和檢測器之間連接管線的長度。安裝色譜柱之前,確認流路系統中的溶劑是否正常。對分析較復雜的樣品建議安裝保護柱。2、為了使色譜柱與儀器系統達zu
探討正相色譜柱與反相色譜柱的安裝保存和檢測
色譜柱的安裝:1、首先應確認柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積,進樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內徑盡可能使用內徑較小的管線,同時控制進樣器、色譜柱和檢測器之間連接管線的長度。安裝色譜柱之前,確認流路系統中的溶劑是否正常。對分析較復雜的樣品建議安裝保護柱。2、為了使色譜柱與儀器系統達zu
反相高效液相色譜柱的維護如何?
反相高效液相色譜柱是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式,任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分,這部分越大,一般保留值越高。???? 在高效液相色譜中這是應用面較廣的一種分離模式,在生物大分子的反相液相色譜條件下,流動相多采用酸性的、低離子強度的水溶液,并加一
反相高效液相色譜柱的維護如何?
反相高效液相色譜柱是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式,任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分,這部分越大,一般保留值越高。???? 在高效液相色譜中這是應用面較廣的一種分離模式,在生物大分子的反相液相色譜條件下,流動相多采用酸性的、低離子強度的水溶液,并加一
高性能聚合物基質反相色譜柱
圖1.? ODP2 HP-4D與早期產品聚合物基質反相色譜柱(ODP-50 4D)相比,理論塔板數(N)提高了約2倍。 創新點: 與早期產品(ODP-50)比較理論塔板數提高了約2倍。 對高極性物質保留力強。 可以很好地分離蛋白質和藥物。 ? 圖2. 各種色
反相液相色譜柱原理及運用維護
反相液相色譜柱是根據溶質、極性活動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜形式,任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分,這部分越大,一般保留值越高,在液相色譜中這是運用面較廣的一種別離形式,在生物大分子的反相液相色譜條件下,活動相多選用酸性的、低離子強度的水溶液,并加一定比例的能與水互溶
常規反相色譜柱安裝及使用維護指南
何謂常規反相色譜柱?在硅膠或雜化基質顆粒上鍵合了如C18、C8、C4或苯基等鍵合相的色譜填料所裝填的色譜柱,按反相色譜條件進行操作和分離。反相是液相色譜中zui常使用的分離模式,而C18柱是zui常使用的反相色譜柱之一。新色譜柱開啟和安裝的推薦步驟:使用新鮮潔凈的水與乙腈。沖洗系統,確保系統干凈,不
極性改性反相色譜柱有哪些新特性
Spursil?HPLC?極性改性反相色譜柱是以高純硅膠為基質,采用獨特的極性改性技術生產的色譜柱。這個系列的色譜柱不但保留了傳統硅膠基質反相色譜柱的性能,而且又增加了一些新的特性:?*?填料表面具有極性基團,適合于高水相流動相條件下的分離;*?增強了對親水性、極性化合物的保留能力;*?獨特的選擇性
如何對反相色譜柱進行保養和保存
色譜柱保存,要避免的是兩點:細菌滋長導致的發霉以及因保存溶劑揮發導致的填料變干。有機相成分有殺菌作用,在保存試劑中含量不能太低;但100%有機相或接近100%有機相,因為揮發性太強也不好。所以80%上下甲醇含量的甲醇水作為保存溶劑是適宜的。當然,無論選什么作為保存試劑,色譜柱兩端的Peek堵頭是一定
液相色譜儀保護柱
?液相色譜儀保護柱是內徑為1.0mm、2.1mm、3.2mm、4.6mm或10mm、20mm、40mm,長7.5mm、10mm或20~60mm的短填充柱,通常填充和分析柱相同的填料,可看作是分析柱的縮短形式,安裝在分析柱前。其作用是收集、阻斷來自進樣器的機械和化學雜質,以保護和延長分析柱的使用壽命。
液相色譜儀色譜柱的柱材料及規格
?液相色譜儀色譜柱的柱材料及規格:? 1 柱材料? 常用內壁拋光的不銹鋼管作色譜柱的柱管以獲得高柱效。使用前柱管先用氯仿、甲醇、水依次清洗,再用50%的HNO3對柱內壁做鈍化處理。鈍化時使用HNO3在柱管內至少滯留10min,以在內壁形成鈍化的氧化物涂層。 ?? 2 柱規格? 一般采用直形柱管,標準
液相色譜儀色譜柱凈化樣品
用溶劑溶解的樣品,多數組分在一定的時間內能完全從柱中流出來,不會造成危害。有些樣品可能含有微粒物質,樣品中的某種組分在柱頭上沉積下來,組分子在固定相上保留很強,溶劑帶走柱填料等,都會造成液相色譜儀色譜柱柱效下降或降低壽命,有必要采取措施防止色譜柱性能下降。如在光線照射下觀察樣品是渾濁的火帶有乳白色,
液相色譜儀色譜柱填料選擇
??? 色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。液相色譜通常均采用填充柱。而對于液相色譜而言,色譜填料的選擇有時候恰恰決定了樣品分析效果的好快。今天小編就圍繞常見的色譜填料種類,講解一下,應該如何針對儀器使用環境對色譜填料進行合適的選擇。? 硅膠填料?