人臍帶間充質干細胞具有高度分化潛能,基因穩定、不易突變,不會引起腫瘤;無需配型、無排異,廣泛應用于疾病治療及抗衰老研究。目前,在美容行業及針對亞健康群體的應用,也越來越引人注目。臍帶間充質干細胞臍帶是由包膜、華通氏膠、臍靜脈、臍動脈臍構成。臍帶間充質干細胞存在于華通氏膠中。由于存在數量少,用膠原酶消化后獲取的細胞量很少。另外,一般的膠原酶消化法獲取細胞時,膠原酶對細胞的傷害較大,培養出來的細胞狀態差。貼塊方法培養人臍帶間充質細胞是普遍采用的方法,但是,細胞從組織中爬出來的時間長(10-20天,甚至更長)。我們經過不斷的摸索,找出一個用膠原酶消化獲取臍帶間充質干細胞的方法。具體操作方法如下:① 在剪斷連接嬰兒端和母親的臍帶后,立刻用臍帶夾夾住,防止內部污染。裝入無菌袋(容器)中,送進實驗室。② 在生物安全柜或超凈工作臺內,取出臍帶,連同臍帶夾用75%的酒精泡2min(50ml離心管或250px皿)。如果臍帶較長......閱讀全文
人臍帶間充質干細胞具有高度分化潛能,基因穩定、不易突變,不會引起腫瘤;無需配型、無排異,廣泛應用于疾病治療及抗衰老研究。目前,在美容行業及針對亞健康群體的應用,也越來越引人注目。臍帶間充質干細胞臍帶是由包膜、華通氏膠、臍靜脈、臍動脈臍構成。臍帶間充質干細胞存在于華通氏膠中。由于存在數量少,用膠原酶消
實驗概要本實驗方法介紹了臍帶間充質干細胞原代分離的操作步驟。主要試劑所用試劑盒:豬臍帶間充質干細胞分離和培養試劑盒 貨號:PUMS-
就是用膠原酶處理消化組織達到分離細胞的目的,所用膠原酶有不同類型:1、膠原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和腎上腺組織細胞的分離。用于消化組織中連接部分使其成為單個細胞,用于哺乳動細胞的分離。2、膠原酶Ⅳ包含至少7種蛋白酶成分,分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。3、膠原酶Ⅴ包含至少7種蛋白酶成分
實驗概要人臍帶間充質干細胞的原代取材主要試劑含2% SP的DPBS、間充質干細胞培養液、10 mg/mL膠原酶Ⅰ、0.2% 膠原酶Ⅰ、10 mg/mL透明質酸酶主要設備眼科剪、眼科鑷、搖床、400目細胞篩、15 mL和50 mL離心管、3.5 cm培養皿實驗材料新生兒臍帶(獲得新生兒父母的知情同意)
海南省眼科醫院劉紅山教授5月初在美國舉行的世界眼科大會上發表演講稱,通過臍帶間充質干細胞移植治療干眼病在小鼠實驗中獲得成功。 干眼病是一種多因子的淚液和眼表面疾病,患者眼睛敏感、怕光、有異物感、眼癢、充血,甚至會發生疼痛及視力下降。近年來,隨著電腦、手機的普及,干眼病的患病率逐漸增加。
實驗材料臍帶試劑、試劑盒Wharton膠PBSA膠原酶儀器、耗材培養瓶實驗步驟(a)臍帶取材后,可在PBSA中保存1?24h。(b)除去血管,將Wharton膠剪成大約0.5cm的小組織塊。(c)將剪碎的組織塊轉移到50mL離心管,用無血清DMEM洗,室溫250g離心5min。(d)倒掉上清液,將離
人軟骨損傷后,可用軟骨組織工程進行軟骨缺損修復。軟骨可由間充質干細胞分化而來。因而,間充質干細胞的培養和分化具有重要作用。間充質干細胞(MSC)可以2×10的5次方/cm2的密度接種于特定的培養液(低糖DMEM,含15%FBS,100u/L氨卡青霉素,100 mg/L鏈霉素,250 mg/L兩性霉素
實驗方法原理膠原酶是一種由細菌中提取出的酶,對膠原有很強的消化作用,適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織等。上皮細胞本身對膠原酶有一定耐性,但膠原酶對細胞間質有好的消化作用,可使上皮細胞與膠原成分脫離而不受傷害,效果甚好。此酶在鈣和鎂離子存在情況下仍有活性,故可用BSS和含有血清的培養液配制。實驗
實驗概要小鼠脂肪間充質干細胞的原代取材主要試劑含2% SP的DPBS、1 mg/mL膠原酶Ⅰ、間充質干細胞培養液主要設備眼科剪、眼科鑷、搖床、400目細胞篩、15 mL離心管、3.5 cm培養皿實驗步驟冰上預冷含2% SP的DPBS。斷頸法處死小鼠,取出其腹部脂肪組織,用預冷的含2%SP(Pen S
間充質干細胞的傳代培養試劑和材料:1. 完全培養基:α-MEM:α-低限量基礎培養基,含谷氨酰胺,無核苷酸或脫氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、經FBS雜交瘤純化,非熱滅活、青霉素100U/ml、鏈霉素100μg/ml。過濾除菌。儲存于4℃,不超過2周;2.