BEX電轉化儀高效轉染mRNA入卵助力CRISPR／Cas9基因編輯
BEX電轉化儀高效轉染mRNA入卵助力CRISPR/Cas9基因編輯摘要近期，CRISPR/Cas9系統被廣泛地應用于突變體小鼠的構建，但是借助于微注射方法很大程度上限制了基因編輯于高通量上的應用。這篇文章中，我們闡述了一個簡單，高效，大規模的基因編輯方法：即借助于電轉染將RNAs轉入卵，而不是通過顯微注射。我們用這種方法將單鏈寡脫氧核苷酸（ssODN）轉入小鼠卵，構建敲除突變體。研究結果證明此方法使得大規模基因分析成為現實。材料和方法小鼠、卵和胚胎使用ICR和B6D2F1(C57BL/6XDBA2F1)孕鼠。ICR主要用于電轉條件摸索，而B6D2F1用于基因編輯。從E0.5的輸精管中收集受精卵。ICR和B6D2F1和同種雄鼠自然雜交。基因編輯試驗中，從B6D2F 1和R26-H2b-mCherry雄性雜交得到的卵，培養在mWM培養基中等待電轉染。電轉染應用BEX定制電極（長：10mm，寬：3mm，高：0.5mm，間距：1mm）......閱讀全文
電轉儀助力CRISPR編輯iPSC新進展:首次報告協同基因編輯...
電轉儀助力CRISPR編輯iPSC新進展:首次報告協同基因編輯效應?2006年，日本科學家山中伸彌（Shinya Yamanaka）教授利用逆轉錄病毒將4個轉錄因子轉入成體細胞，將其轉變為誘導多能干細胞(induced pluripotent stem cells, iPSC)。從此后，
武漢大學：建立體外高效CRISPR/Cas9靶向DNA編輯系統
在我們的DNA深處潛伏著許多“寄生蟲”，那就是被稱為跳躍基因的轉座子。這些尾巴很長的家伙如果插入健康的基因，就可能會引發疾病。不過迄今為止，人們還不清楚這種尾巴對于轉座子的跳躍有何作用。 密西根大學醫學院的研究團隊在十一月十二日的Molecular Cell雜志上發表文章指出，沒有尾巴的轉座子
新型高效精確的基因靶向整合策略研究獲進展
近日，中國科學院腦科學與智能技術卓越創新中心/神經科學研究所研究員楊輝研究組與山東大學附屬生殖醫院、上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院教授陳子江課題組合作，設計了一種新型基因靶向整合策略Tild-CRISPR，它可以在小鼠和人的細胞中實現高效精確的基因敲入，不僅適用于高效地構建小鼠動物模型，同時也為
黃行許教授連發CRISPR研究成果
南京大學模式動物研究所的黃行許（Xingxu Huang）教授，是近年來基因組編輯領域的風云人物之一。其實驗室不僅首次在世界上利用CRISPR/Cas9進行了大鼠的條件性基因敲除，還通過原核注射實現了世界上首次猴基因敲除，這些成果在國際上受到廣泛的矚目。近期，黃行許教授課題組接連在CRISPR/
廣州生物院在熱帶爪蛙中建立了高效基因敲除技術
中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院陳永龍博士的研究團隊成功利用CRISPR/Cas9系統在熱帶爪蛙中獲得了高效的靶向基因破壞，該研究成果Efficient RNA/Cas9-mediated genome editing in Xenopus tropicalis 于1月8日在線發表在D
轉甲狀腺素蛋白淀粉樣變性CRISPR療法有望進入臨床
開發CRISPR/Cas9基因編輯療法的生物醫藥公司Intellia Therapeutics宣布，一項臨床前研究結果于近日發表在《Cell Reports》期刊上。?在這項臨床前試驗中取得的出色結果，也有望助力CRISPR/Cas9技術進入人體臨床試驗。研究顯示，脂質納米粒子遞送Cas9 mR
如何關閉CRISPR基因組編輯系統中的Cas9
CRISPR/Cas9技術正在如火如荼地發展。形形色色的Cas9變體被開發出，用于基因組編輯，激活和抑制基因表達，以及其他。不過，似乎還少了些什么，Cas9的活性一旦開啟就無法關閉。人們擔心，Cas9在細胞內停留的時間越長，脫靶編輯的可能性也越大。因此，Cas9不僅需要“開”，也需要“關”。
Cell－Res：CRISPR/Cas9瞬時表達基因組編輯體系
基因組編輯技術是最新發展起來的植物基因功能研究及定向育種的重要手段。在植物中實現基因組編輯的常規方法是將序列特異性核酸酶（如CRISPR/Cas9）的編碼DNA轉化植物細胞，穩定表達進而實現對目的基因的定點編輯。這種情況下，CRISPR載體整合在植物染色體中，需通過后代分離獲得不含CRISPR/
CRISPR/Cas9設計工具，讓基因編輯不再高冷！
CRISPR/Cas9已經成為最常用的基因編輯系統。CRISPR/Cas9包括2部分：Cas9核酸內切酶和sgRNA(single guide RNA)，sgRNA由天然的tracrRNA (transactivating crRNA)和crRNA (CRISPR RNA)融合而來。 使用
南京大學黃行許：連發CRISPR/Cas9重要研究成果
南京大學模式動物研究所的黃行許（Xingxu Huang）教授，是近年來基因組編輯領域的風云人物之一。其實驗室不僅首次在世界上利用CRISPR/Cas9進行了大鼠的條件性基因敲除，還通過原核注射實現了世界上首次猴基因敲除。這些成果在國際上受到廣泛的矚目。 近期黃行許教授課題組接連在CRISPR
研究發現發展CRISPR/Cas9遞送及活體基因編輯新策略
CRISPR/Cas9是一種源自細菌獲得性免疫系統的基因編輯技術，在化學生物學基礎研究及發展新型基因治療技術中具有廣泛的應用前景。然而，其生物醫學應用面臨的關鍵問題之一在于遞送具有基因編輯功能的Cas9核酸酶進入細胞中，并實現活體基因編輯。 最近，在國家自然科學基金委、科技部和中國科學院
上海生科院完整染色體敲除研究獲進展
11月25日，中國科學院上海生命科學研究院神經科學研究所、腦科學與智能技術卓越創新中心楊輝研究組與北京大學胡家志實驗室合作完成的研究論文，以《CRISPR/Cas9介導的基因編輯技術敲除目標染色體》為題，發表在《基因組生物學》上。該研究介紹了CRISPR/Cas9技術的新型應用，即在細胞、胚胎或
CRISPRCas9基因編輯的兩種不同編輯實驗流程的應用（二）
【方法二】1、（用IDT工具）設計sgRNA，使其Spacer與DNA靶序列互補，提交給IDT定制合成sgRNA；2、將sgRNA與Cas9蛋白混勻，形成RNP；3、將RNP通過電轉染等導入細胞或細胞核；4、通過sgRNA的Spacer識別DNA靶序列，通過Cas9蛋白識別PAM序列，對DNA進行剪
基因編輯到底是什么
嗨~來看點更專業的回答吧 ?(?ω?)?CRISPR/Cas基因編輯系統? ? ???CRISPR/Cas（Clustered?Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/Cas）系統是目前被廣泛運用的基因編輯系統，其原理是由CRISPR轉錄產生的
Nature：用新型高效Cas9實現基因組編輯
來自哈佛-麻省理工Broad研究所、麻省理工學院和國立衛生研究院國家生物技術信息中心的研究人員，在一項合作研究中發現了一種高效的Cas9核酸酶，攻克了體內基因組編輯面臨的一個主要挑戰。發表在《自然》（Nature）雜志上的研究結果，預計將有助于CRISPR工具箱更容易地應用于體內實驗和治療用途。
基因編輯crispr原理
ZFNZFN，即鋅指核糖核酸酶，由一個 DNA 識別域和一個非特異性核酸內切酶構成。DNA 識別域是由一系列 Cys2-His2鋅指蛋白（zinc-fingers）串聯組成（一般 3~4 個），每個鋅指蛋白識別并結合一個特異的三聯體堿基。鋅指蛋白源自轉錄調控因子家族（transcription fa
基因編輯crispr原理
ZFNZFN，即鋅指核糖核酸酶，由一個 DNA 識別域和一個非特異性核酸內切酶構成。DNA 識別域是由一系列 Cys2-His2鋅指蛋白（zinc-fingers）串聯組成（一般 3~4 個），每個鋅指蛋白識別并結合一個特異的三聯體堿基。鋅指蛋白源自轉錄調控因子家族（transcription fa
基因編輯crispr原理
ZFNZFN，即鋅指核糖核酸酶，由一個 DNA 識別域和一個非特異性核酸內切酶構成。DNA 識別域是由一系列 Cys2-His2鋅指蛋白（zinc-fingers）串聯組成（一般 3~4 個），每個鋅指蛋白識別并結合一個特異的三聯體堿基。鋅指蛋白源自轉錄調控因子家族（transcription fa
我科學家用CRISPR獲得轉基因山羊
CRISPR/Cas9系統的最新研究進展，提供了一種精確而靈活的方法，可在不同物種中進行基因組編輯。然而，這種方法在大型動物模型（如山羊）中的適用性和效率，還沒有得以廣泛的研究。最近，來自西北農林科技大學、榆林學院、南京大學和上海科技大學等處的研究人員，在Nature子刊《ScientificR
CRISPR/Cas9驅動的瞬時表達系統
維克森林再生醫學研究所的科學家改進了DNA編輯工具，縮短了編輯蛋白停留在細胞內的時間，他們稱這種新方法為“打了就跑”。 CRISPR技術用于改變DNA序列和改變基因功能，CRISPR/Cas9是一種酶，它像剪刀一樣，在特定位置切割兩條DNA鏈，添加、移除或修復DNA片段，但CRISPR/Cas
CRISPR大范圍“脫靶”？可能還需要進一步驗證
來源：Pixbay編者按：CRISPR基因編輯會導致數以百計意想不到的突變？5月30日，《自然-方法》刊登的一篇通信文章顯示，來自美國哥倫比亞大學等研究機構的科學家確認通過CRISPR基因編輯技術成功修復了導致兩只小鼠失明的基因后，經全基因組測序發現小鼠體內有超過1500個單核苷酸發生突變，并有百個
CRISPR導致突變－從而大范圍“脫靶”？
CRISPR基因編輯會導致數以百計意想不到的突變？5月30日，《自然-方法》刊登的一篇通信文章顯示，來自美國哥倫比亞大學等研究機構的科學家確認通過CRISPR基因編輯技術成功修復了導致兩只小鼠失明的基因后，經全基因組測序發現小鼠體內有超過1500個單核苷酸發生突變，并有百個以上的位點發生發生了大片段
甘薯中利用CRISPR/Cas9基因編輯技術改良淀粉的品質
9月23日，中國科學院分子植物科學卓越創新中心張鵬研究組在International Journal of Molecular Sciences 雜志上在線發表了題為CRISPR/Cas9-Based Mutagenesis of Starch Biosynthetic Genes in Swe
27篇SNC論文！他憑這些學術成就獲億元融資
基因修飾動物是研究在發育和疾病中基因功能的重要工具。CRISPR/Cas9系統有效的應用于構建基因敲除和敲入小鼠。而楊輝團隊正好專注于該領域。 楊輝，30歲時，就成為中科院上海生科院神經所研究員；2015年，入選國家“青年千人計劃”；2019年，楊輝博士獲得國家杰出青年基金資助。 由楊輝創辦
戴一凡教授：利用CRISPR/Cas9基因編輯技術建立基因改造豬
6月17日，由生物谷主辦的“2016（第三屆）基因編輯研討會”在滬隆重召開。南京醫科大學特聘教授戴一凡為我們帶來了關于“利用CRISPR/Cas9基因編輯技術建立基因改造豬”的精彩報告。 戴一凡博士現為南京醫科大學特聘教授，江蘇省異種移植重點實驗室主任。戴一凡教授主要從事轉基因大動物和異種移植
CRISPRCas9基因編輯的兩種不同編輯實驗流程的應用（三）
Alt-R? CRISPR-Cas9實例分析1、特別優化的crRNA/tracrRNA/sgRNA長度，提高編輯性能以HPRT基因中的12個位點為靶點，分別使用Alt-R? crRNA:tracrRNA、Alt-R? crRNA XT:tracrRNA、Alt-R? sgRNA，與Alt-R?
5月三大頂級雜志多篇文章解析CRISPR技術
CRISPR已經成為了炙手可熱的基因組編輯工具，幫助世界各地的研究者們解決實際問題，而且在研究人員完成了人類細胞高效、高特異性的全基因組篩選之后，2014年在增強靶標特異性方面又取得了巨大的進步，這為尋找人類健康和疾病相關的基因功能，開辟了無限的可能性。 本月，Nature，Science，C
CRISPR/Cas9條件性基因敲入鼠的鑒定方法
基因工程小鼠基因型PCR鑒定的基本原則是利用基因工程小鼠基因組與野生型小鼠基因組的序列差異，以小鼠基因組DNA為模板進行PCR，并以凝膠電泳比對比不同基因型特異產物的大小，根據條帶大小來區分小鼠的不同基因型。上期我們講述了CRISPR/Cas9條件性基因敲除鼠的鑒定，今天我們就開始學習CRISPR/
CRISPR/Cas9基因敲入鼠鑒定方法之Southern－Blot與PCR
基因工程小鼠基因型PCR鑒定的基本原則是利用基因工程小鼠基因組與野生型小鼠基因組的序列差異，以小鼠基因組DNA為模板進行PCR，并以凝膠電泳對比不同基因型特異產物的大小，根據條帶大小來區分小鼠的不同基因型。上期我們講述了CRISPR/Cas9條件性基因敲入鼠的鑒定，今天我們就開始學習CRISPR/C
李曉江博士：探討用CRISPR/Cas9實現大型動物基因組編輯
6月2日，來自中國科學院遺傳與發育生物學研究所的李曉江（Xiao-Jiang Li）研究員在《細胞研究》（Cell Research）雜志上發表了題為“Targeted genome editing in primate embryos”的文章。 在這篇文章中他概述了近期在靈長類動物胚胎中應用