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3.抗體T.做細胞信號傳導，要做磷酸化某因子Western Blot，其二抗有何要求？解答：對二抗無要求，要看你實驗條件來選擇，一般推薦用HRP標記的二抗。U.同一公司的另外抗體用這個稀釋度做出來效果很好，所以沒做預試，怕費時間，用什么樣的稀釋度比較好呢？我用的ELL+plus試劑盒顯色。轉膜過夜，一抗孵育也是過夜的，若封閉也過夜的話就要四天才看的到結果了。解答：不同抗體，即使是同一公司的抗體，其最佳的抗體稀釋度也是不一樣的，需要你實驗摸索。我覺得轉膜過夜好像沒有必要吧，轉膜的目的也就是將蛋白轉到膜上就行啦，何必浪費時間呢。至于具體的轉膜時間，還要看你的目的蛋白分子量的大小；轉膜的設備，是半干式，還是濕式。一抗當然可以過夜，如果你想所短Western Blot時間的話，可以增高一抗的孵育溫度，我們實驗室一般37度，兩小時就足夠了；你可以參照抗體說明書。至于一抗和二抗得稀釋度，你可以一抗1：1500；二抗1：20000試試......閱讀全文
Western blot成像方法取決于二抗的標記物，常用的方法有基于酶促反應的化學發光法，基于熒光染料的可見熒光方法和紅外熒光方法，那么我們應該如何選擇呢？最合適的Western blot實驗方法取決于您期望獲得哪些信息，也就是取決于您的實驗目的，小編比較了現有方法的優缺點，并分享了自己的心得，希望
實驗概要Non-specific binding of an antibody to proteins other than the antigen can sometimes occur. This is usually more common with polyclona
Western blot成像方法取決于二抗的標記物，常用的方法有基于酶促反應的化學發光法，基于熒光染料的可見熒光方法和紅外熒光方法，那么我們應該如何選擇呢？*合適的Western blot實驗方法取決于您期望獲得哪些信息，也就是取決于您的實驗目的，小編比較了現有方法的優缺點，并分享了自己的心得，希望
Western blot，無疑是個老話題。然而，正是由于新產品的陸續問世，這顆老樹才不斷開出新花。兩年前曾經介紹了全自動的Western blot分析系統 – Simple Western。這臺名叫Simon的神奇儀器將WB的所有實驗步驟自動化，包括蛋白上樣和分離、免疫印跡、洗滌、檢測以及數據的
ECL 化學發光法是目前最常用、最靈敏的 Western Blot 檢測方法。由于這些底物不會在膜表面沉淀、牢牢結合在膜上，因此可以通過一抗二抗去除液(Stripping buffer)將親和結合的一抗和二抗去除。一抗二抗去除液既要足夠強烈而有效解離結合的抗體，也要足夠溫和使轉移的目標蛋白仍
相關專題 蛋白Marker可分為：一、未預染的Marker即寬分子 量蛋白標準、高分子量蛋白標準以及低分子量蛋白標準;二、預染的Marker即單色預染和多色預染。在western blot 過程中，分子量Marker就像個螺絲釘一樣沒雖然是個小細節，然而就是這樣一個小細節對實驗結果有著
驗證抗體對于結果的一致性和重復性是至關重要的，即確認抗體能特異性識別感興趣的蛋白，抗體與其他蛋白的交叉反應性情況。在您的論文提交給期刊發表之前，經常需要驗證抗體的特異性，但并非所有人都花時間進行驗證。或者很多人都認為他們使用抗體進行了免疫共沉淀驗證，因而不需要再通過蛋白質印跡進行驗證。然而，抗體與抗
驗證抗體對于WB結果的一致性和重復性是至關重要的，即確認抗體能特異性識別感興趣的蛋白，抗體與其他蛋白的交叉反應性情況。在您的論文提交給期刊發表之前，經常需要驗證抗體的特異性，但并非所有人都花時間進行驗證。或者很多人都認為他們使用抗體進行了免疫共沉淀驗證，因而不需要再通過蛋白質印跡進行驗證
驗證抗體對于結果的一致性和重復性是至關重要的，即確認抗體能特異性識別感興趣的蛋白，抗體與其他蛋白的交叉反應性情況。在您的論文提交給期刊發表之前，經常需要驗證抗體的特異性，但并非所有人都花時間進行驗證。或者很多人都認為他們使用抗體進行了免疫共沉淀驗證，因而不需要再通過蛋白質印跡進行驗證。然而，抗體與抗
驗證抗體對于WB結果的一致性和重復性是至關重要的，即確認抗體能特異性識別感興趣的蛋白，抗體與其他蛋白的交叉反應性情況。在您的論文提交給期刊發表之前，經常需要驗證抗體的特異性，但并非所有人都花時間進行驗證。或者很多人都認為他們使用抗體進行了免疫共沉淀驗證，因而不需要再通過蛋白質印跡進行驗證。然而，抗體
4. 濾紙、膠和膜的問題X. NC膜\ PVDF膜\ 尼龍膜怎樣鑒別？解答：尼龍膜是較理想的核酸固相支持物，有多種類型；硝酸纖維素膜是目前應用最廣的一種固相支持物，價格最便宜；PVDF膜介于二者之間。就結合能力而言：尼龍膜結合DNA和RNA能力可達480－600μg/cm2，可結合短至10bp的核酸
2014年9月24日，2014慕尼黑上海分析生化展在上海新國際博覽中心隆重拉開帷幕。GE醫療生命科學亮相2014慕尼黑上海分析生化展，舉辦新品發布會全球同步發布Western
如何選擇合適的western Blot成像方法最合適的Western blot實驗方法取決于您期望獲得哪些信息，以下內容將幫助您選擇最佳實驗方法。化學發光方法化學發光western blot是相對容易且靈敏度極高的檢測方法，靈敏度可以達到fg級。分子量差異顯著的蛋白，通過電泳可輕松分離，使用“化學發
四、轉膜以下以使用半干轉膜為例。對于轉印90kd以下的蛋白，轉膜液都不用加SDS，如果是蛋白分子量大的話可以加入0.037%的SDS。在電泳結束前20min開始準備轉膜所需的東西。轉一張膜需準備6張的濾紙（長一般為8.1~8.3cm，寬度根據裁的膠大小實際測量，但膠一般會縮水，所以裁8cm就行）和1
6. 染色的選擇OO. Western Blot哪種染色好？解答：（1）陰離子染料是最常用的，特別是氨基黑，脫色快，背景低檢測極限可達到1.5μg，考馬雖然與氨基黑有相同的靈敏度，但脫色慢，背景高。麗春紅S和快綠在檢測后容易從蛋白質中除去 ，以便進行隨后的氨基酸分析。缺點是：溶劑系統的甲醇會引起硝化
"良好的開始是成功的一半"，尤其對于生物學實驗，如果沒有高質量的實驗樣本，等待我們的很可能是失敗的實驗結果。優質特異的蛋白樣品對Western Blot實驗至關重要。下面將從蛋白樣品制備的方法和試劑選擇上給大家一些建議，同時也和大家分享一些因蛋白樣品制備不當而導致Western
要檢測一個基因的表達產物是否正確，或者比較表達產物量的相對變化，首選方法是Western Blot。雖然，順利的時候Western Blot做起來很簡單，可不順的時候也很令人心煩――做不出結果啦、假陽性啦、結果出現多條帶啦、到底是一抗有問題還是二抗有問題啦……畢竟，作為一種有活性的生物大分子，抗
GGG.我想盡量提高轉膜的效率（我的實驗要求轉到膜上的蛋白越多越好，不管是什么大小蛋白）不知道有那些辦法？解答：不管怎么轉都會存在蛋白轉移不完全（電壓過小時間過短）或過度轉移（電壓過大時間過長）的問題，魚（小分子量蛋白）和熊掌（大分子量蛋白）不可得兼呵呵。建議把膠切成兩半，比如以35KD為界，分別進
要檢測一個基因的表達產物是否正確，或者比較表達產物量的相對變化，首選方法是Western Blot。雖然，順利的時候Western Blot做起來很簡單，可不順的時候也很令人心煩――做不出結果啦、假陽性啦、結果出現多條帶啦、到底是一抗有問題還是二抗有問題啦……畢竟，作為一種有活性的生物大分子
要檢測一個基因的表達產物是否正確，或者比較表達產物量的相對變化，首選方法是Western Blot。雖然，順利的時候Western Blot做起來很簡單，可不順的時候也很令人心煩――做不出結果啦、假陽性啦、結果出現多條帶啦、到底是一抗有問題還是二抗有問題啦……畢竟，作為一種有活性的生物大分子
在WB實驗中為什么需要使用內參抗體？進口內參抗體——在WB實驗中為什么需要使用內參抗體？ 要檢測一個基因的表達產物是否正確，或者比較表達產物量的相對變化，首選方法是Western Blot。雖然，順利的時候Western Blot做起來很簡單，可不順的
聽說隔壁實驗室買了一臺新成像，可以做Western Blot熒光掃描式Azure Sapphire成像，效果很好，操作也簡單，小師妹一臉羨慕，問了句，我從來沒做過熒光實驗，現在期刊雜志要求也在升級，也建議使用熒光的方法，之前因為沒有合適的儀器，所以不能嘗試，現在可以準備我的實驗了，那從化學到熒光
ABGENT抗體是通過什么動物來制備的？我們的單克隆抗體大多是通過BALB/c小鼠制備的，多克隆抗體大多是通過新西蘭兔制備的。客戶抗體定制服務也主要是使用這兩種動物Western Blot檢測中你們是如何區分特異性目標條帶的？多克隆抗體的Western Blot檢測結果通常會出現多條帶，我們通過對免
免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。Western Blot是檢測單一細胞蛋白表達量最好的方法；若要對表達蛋白進行細胞定位，confocal應是首選的方
1. 什么是western blot?答：WB又稱免疫印記法.是將生物大分子物質通過不同途徑轉移到固相載體的過程。 2. western blot 有什么優點？答：靈敏，可達ng級，用Ecl顯色法理論上可達pg 級。方便，特異性高。 3. western blot 的具體步驟是什么？答：一. 制樣（
Western Blot 屬于經驗依賴性的多步驟實驗，結果的優劣受到多個因素的影響，傳統的手工操作容易引入誤差，難以保證重復性。美國Precision Biosystems公司攜手環亞生物科技有限公司（APG BIO）推出的BlotCycler全自動化的蛋白質印跡雜交系統可以很好的解決了
2020 年 1 月 28 日，英國劍橋和美國林肯：Abcam 和 LI-COR 欣喜地宣布，雙方在同行評審期刊《生物化學雜志》(JBC)[1] 上發表了共同撰寫的手稿，旨在提高整個生命科學行業的試劑可重復性標準。Pillai Kastoori 等人的新論文Antibody Validation
這種技術是把電泳分離的組分從凝膠轉移到一種固相支持體，并以針對特定氨基酸序列的特異性試劑作為探針檢測之。Western使用的探針是抗體，它與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現的抗原表位發生特異性反應。這種技術的作用是對非放射性標記蛋白組成的復雜混合物中的某些特異蛋白進行鑒別和鑒定。儀器：高壓鍋、玻璃勻漿
Q：如何進行組織液氮研磨？A：將組織塊在液氮里凍實，敲成大小合適的小塊后放在研缽里，倒液氮，邊研邊加，保持研缽里有液氮，或是保持組織塊不融。研碎了就行了。注意做前研缽等器具要預冷，用液氮或是先放負二十冰箱一段時間。注意事項：1.液氮研磨的研缽，藥勺必須預冷。2.開始研磨前，將研缽置于冰袋上，并加入少
主要用途YIJI GST融合蛋白同位素（[γ32P]ATP）激酶標記試劑是一種旨在使用同位素（[γ32P]ATP）和cAMP依賴性蛋白激酶A（protein kinase K），標記純化的目標融合蛋白，成為敏感探針的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。適合于各