外周血單個核細胞的分離實驗
實驗方法原理 體外測定免疫細胞的數量和功能常需將某種免疫細胞首先分離出來。本實驗是采用密度梯度離心法分離單個核細胞(mononuclear cell)。單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞(monocyte)。 血液中各種細胞的大小和比重不同,因此,可用不同比重(密度)的分離液使不同比重的細胞在離心沉降過程中按相應密度梯度分布,從而達到分離各種細胞的目的,入單個核細胞的比重為 1.075~1.090,而紅細胞、粒細胞等的比重在 1.092 左右,因此,將血液輕輕加在比重為 1.076~1.078 的分離液上,使成一界面,再經離心,即出現分層,最上面為血漿層,界面處有一白色云霧狀細胞層即為淋巴細胞和單核細胞,而紅細胞和粒細胞則沉于管底。分離液的比重受溫度變化的影響,實驗應在室溫(20 ℃)下進行,若實驗時,室內溫度低于 20 ℃ 則先將分離液在 37 ℃ 水浴中高于 20 ℃ 的夏季,得率可能偏低。實驗材料 人靜脈......閱讀全文
外周血單個核細胞的分離實驗
實驗方法原理體外測定免疫細胞的數量和功能常需將某種免疫細胞首先分離出來。本實驗是采用密度梯度離心法分離單個核細胞(mononuclear cell)。單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞(monocyte)。 血液中各種細胞的大小和比重不同,因此,可用不同比重(密度)的分離液使不同比重的細胞在離心沉降過
外周血單個核細胞的分離實驗
實驗方法原理 體外測定免疫細胞的數量和功能常需將某種免疫細胞首先分離出來。本實驗是采用密度梯度離心法分離單個核細胞(mononuclear cell)。單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞(monocyte)。 血液中各種細胞的大小和比重不同,因此,可用不同比重(密度)的分離液使不同比重的細胞在
如何分離外周血單個核細胞
外周血單個核細胞即外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。體外檢測淋巴細胞首先要分離外周血單個核細胞,目前主要的分離方法是Ficoll-hypaque(葡聚糖-泛影葡胺)密度梯度離心法,因為血液中各有形成分的比重存在差異最多12天,但需要刺激。 PBMC(外周血單個核細胞)是原代細胞,單純
外周血單個核細胞分離實驗的操作步驟
1、取外周靜脈血,用肝素抗凝,加等量的Hank’s液并混勻。 2、將分層液加入試管中,用量約為血量的1/2。用吸管沿管壁緩緩將血加入分層液面上。 3、置于水平離心機離心,1500r/min,10min。可見絕大多數單個核細胞懸浮于血漿和分層液的界面,呈白膜狀。 4、用尖吸管吸取界面的細胞層
外周血單個核細胞分離的原理
外周血單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞,其比重為1.070左右,而紅細胞和多核白細胞的比重超過1.080。這樣利用介于兩者比重之間的溶液(稱為分層液)做密度梯度離心,就可得到單個核細胞。最常用的分層液為聚蔗糖和泛影酸鈉混合比重為1.070±0.001的溶液,國內常用泛影葡胺代替泛影酸鈉。
外周血單個核細胞怎么進行分離?
外周血中單個核細胞(淋巴細胞和單核細胞)的比重介于1.075~1.090 之間,紅細胞及粒細胞在1.092左右,血小板在1.030~1.035之間,因而可利用一種比重介于1.075~1.092之間而近于等滲的溶液作密度梯度離心,使一定比重的細胞按相應密度梯度分布而加以分離。對分離介質的基本要
外周血單個核細胞分離的操作步驟
1、取外周靜脈血,用肝素抗凝,加等量的Hank’s液并混勻。2、將分層液加入試管中,用量約為血量的1/2。用吸管沿管壁緩緩將血加入分層液面上。3、置于水平離心機離心,1500r/min,10min。可見絕大多數單個核細胞懸浮于血漿和分層液的界面,呈白膜狀。4、用尖吸管吸取界面的細胞層,置于另一試管中
外周血單個核細胞分離實驗的器材和注意事項
一、試劑與器材 1、聚蔗糖—泛影葡胺分層液,Hank’s液,RPMI-1640培養液,肝素。 2、水平離心機。 二、注意事項 1、在分離外周血單個核細胞過程中,將稀釋血液加于分層液上時,要避免沖散分層液面,而要使之形成良好的界面,否則影響分離結果。 2、此法操作得當,單個核細胞得率可達
外周血單個核細胞簡介
外周血單個核細胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。注意這里是 mononuclear cell 單個核細胞,而不是 Monocyte 單核細胞。外周血單個核細胞主要的分離方法是Ficoll-hypa
外周血單個核細胞淋巴細胞和單個核細胞
1、淋巴細胞 淋巴細胞來源于造血干細胞(hemopoietic stem cell,HSC)。造血干細胞可分化成多能前體細胞( multipotent progenitor cell,MPC),繼而分化為淋巴樣干細胞和髓樣干細胞。淋巴樣干細胞可繼續發育為成熟的T淋巴細胞、B淋巴細胞和NK細胞等
外周血單個核細胞的分離如何進行呢
外周血中單個核細胞(淋巴細胞和單核細胞)的比重介于1.075~1.090之間,紅細胞及粒細胞在1.092左右,血小板在1.030~1.035之間,因而可利用一種比重介于1.075~1.092之間而近于等滲的溶液作密度梯度離心,使一定比重的細胞按相應密度梯度分布而加以分離。 對分離介質的基本要求
外周血單個核細胞的簡介
周血單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞。單個核細胞的體積、形態和比重與外周血其他細胞不同,紅細胞和多核白細胞的比重在1.092左右,單個核細胞的比重為1.075-1.090,血小板為1.030-1.035。因此利用一種介于1.075-1.092之間而近于等滲的溶液作密度梯度離心,使一定密度的細胞按
外周血單個核細胞的分類
一、基本原理 外周血單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞,其比重為1.070左右,而紅細胞和多核白細胞的比重超過1.080。這樣利用介于兩者比重之間的溶液(稱為分層液)做密度梯度離心,就可得到單個核細胞。最常用的分層液為聚蔗糖和泛影酸鈉混合比重為1.070±0.001的溶液,國內常用泛影葡胺代替泛
外周血和臍帶血中分離單個核細胞
基 本 方 案 FicoH-Hypaque梯度離心法分離單個核細胞材 料肝 素 抗 凝 血(附 錄 3 G ) 或 者 肝 素 化 的 臍 帶 血(I Oml臍 帶 血 加 入 I m l 含 250U 的P B S 為宜)P B S聚蔗糖-泛影葡胺(Ficoll-Hypaque) 溶液H B S
外周血單個核細胞分離的基本原理介紹
外周血單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞,其比重為1.070左右,而紅細胞和多核白細胞的比重超過1.080。這樣利用介于兩者比重之間的溶液(稱為分層液)做密度梯度離心,就可得到單個核細胞。最常用的分層液為聚蔗糖和泛影酸鈉混合比重為1.070±0.001的溶液,國內常用泛影葡胺代替泛影酸鈉。
小鼠單個核細胞的分離實驗
基 本 方 案 從 脾 臟 、胸腺和淋巴結制備細胞懸液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培養基新鮮分離的小鼠器官: < 6 周齡的小鼠胸腺; 6 周 至 6 個月齡的小鼠脾臟和淋巴結60 mmX 15 mm 培養皿剪 刀 和 鑷 子(保 存 在 7 0 % 乙醇的燒杯中)裝 有 19 G 針
小鼠單個核細胞的分離實驗
實驗步驟基 本 方 案 從 脾 臟 、胸腺和淋巴結制備細胞懸液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培養基新鮮分離的小鼠器官: < 6 周齡的小鼠胸腺; 6 周 至 6 個月齡的小鼠脾臟和淋巴結60 mmX 15 mm 培養皿剪 刀 和 鑷 子(保 存 在 7 0 % 乙醇的燒杯中)裝 有 19
單個核細胞的分離
實驗概要外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)主要指淋巴細胞和單核細胞,是免疫學實驗最常用的細胞,也是進行T細胞和B細胞分離純化的重要環節。本實驗介紹了兩種單個核細胞的分離方法。實驗原理PBMC的密度與血液中的其他成分不同。紅細胞和粒細胞的密
外周血單個核細胞可以用來做哪些實驗
外周血單個核細胞即外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。體外檢測淋巴細胞首先要分離外周血單個核細胞,目前主要的分離方法是Ficoll-hypaque(葡聚糖-泛影葡胺)密度梯度離心法,因為血液中各有形成分的比重存在差異最多12天,但需要刺激。 PBMC(外周血單個核細胞)是原代細胞,單純
外周血單個核細胞的基本信息
外周血單個核細胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。注意這里是 mononuclear cell 單個核細胞,而不是 Monocyte 單核細胞。外周血單個核細胞主要的分離方法是Ficoll-hypaqu
外周血單個核細胞樣本的制備
實驗方法原理 血液是天然的單個細胞分散的細胞懸液,血細胞在生理狀態下呈分散的游離狀態。它是流式細胞分析的理想樣品。血液中的主要細胞成分為白細胞、紅細胞和血小板;而其中白細胞主要成分又分為淋巴細胞、單核細胞和粒細胞。但在血細胞中一般檢測單個核細胞較為多見。實驗材料 外周血試劑、試劑盒 肝素生理鹽水實驗
外周血單個核細胞的基本內容
周血單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞。單個核細胞的體積、形態和比重與外周血其他細胞不同,紅細胞和多核白細胞的比重在1.092左右,單個核細胞的比重為1.075-1.090,血小板為1.030-1.035。因此利用一種介于1.075-1.092之間而近于等滲的溶液作密度梯度離心,使一定密度的細胞按
外周血單個核細胞樣本的制備
實驗方法原理血液是天然的單個細胞分散的細胞懸液,血細胞在生理狀態下呈分散的游離狀態。它是流式細胞分析的理想樣品。血液中的主要細胞成分為白細胞、紅細胞和血小板;而其中白細胞主要成分又分為淋巴細胞、單核細胞和粒細胞。但在血細胞中一般檢測單個核細胞較為多見。實驗材料外周血試劑、試劑盒肝素生理鹽水實驗步驟一
Ficoll密度梯度離心法分離外周血單個核細胞
測定細胞免疫功能首先要從人或動物外周血或組織中獲取有活性的細胞,如淋巴細胞、巨噬細胞、粒細胞等。取得有活性的細胞應根據不同目的,采用不同方法,考慮(1)細胞純度;(2)細胞獲得量;(3)細胞活力;(4)使用方法的簡易程度和本室條件等。目前常用Ficoll密度梯度離心法直接分離和純化外周血單個核細胞。
Ficoll密度梯度離心法分離外周血單個核細胞
測定細胞免疫功能首先要從人或動物外周血或組織中獲取有活性的細胞,如淋巴細胞、巨噬細胞、粒細胞等.取得有活性的細胞應根據不同目的,采用不同方法,考慮 (1) 細胞純度; (2) 細胞獲得量; (3) 細胞活力; (4) 使用方法的簡易程度和本室條件等.測定細胞免疫功能首先要從人或動物外周血或組織中獲取
利用Ficoll密度梯度離心法分離外周血單個核細胞
實驗概要本實驗用Ficoll密度梯度離心法直接分離和純化了外周血單個核細胞。實驗原理常用來分離人外周血單個核細胞(PBMC)的分層液比重是 ?1.077±0.001 ?的聚蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F/H)分層液。Ficoll是蔗糖的多聚體,呈中性,犌W水性高,平均分子量
人單個核細胞的分離
實驗概要人單個核細胞的分離主要試劑DPBS、0.5%甲基纖維素、人淋巴細胞分離液、人HSCs培養液主要設備離心機,超凈臺,體視鏡,倒置顯微鏡,96孔培養板,T75培養瓶,25mL/10mL/5mL移液管實驗材料臍帶血100 mL,取自醫院,并和產婦簽知情同意書實驗步驟(1)用血袋從醫院取臍帶血100
單個核細胞的分離純化
外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)主要指淋巴細胞和單核細胞,是免疫學實驗最常用的細胞,也是進行T細胞和B細胞分離純化的重要環節。1.原理PBMC的密度與血液中的其他成分不同。紅細胞和粒細胞的密度較大,為1.092左右;淋巴細胞和單核細胞的
外周血單個核細胞(PBMC)中,是否包含有B細胞
PBMC中主要包含單核細胞和淋巴細胞,淋巴細胞中包含T和B細胞。
從單個核細胞中分離T細胞
從單個核細胞中分離T細胞1)用玫瑰花結形成試驗分離E+細胞1.制備AET-綿羊紅細胞1)在刻度離心管中,用無菌的含5%小牛血清的Hanks液洗滌綿羊紅細胞3次,每次離心500×g 10分鐘。2)吸凈上清液,測量紅細胞比容。輕擊試管分散紅細胞,加入4倍紅細胞比容量、新鮮制備的AET溶液,混勻。室溫中反