慢病毒的包裝簡介及其應用范圍
慢病毒，（ Lentivirus ）載體是以 HIV-1 （人類免疫缺陷 I 型病毒）為基礎發展起來的基因治療載體。區別一般的逆轉錄病毒載體，它對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。慢病毒載體的研究發展得很快，研究的也非常深入。慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而達到持久性表達。慢病毒在感染能力方面可有效地感染神經元細胞、肝細胞、心肌細胞、腫瘤細胞、內皮細胞、干細胞等多種類型的細胞，從而達到良好的的基因治療效果，在美國已經開展了臨床研究，效果非常理想，因此具有廣闊的應用前景。 目前慢病毒也被廣泛地應用于表達 RNAi 的研究中。由于有些類型細胞脂質體轉染效果差，轉移到細胞內的 siRNA 半衰期短，體外合成慢病毒(RNAi)對基因表達的抑制作用通常是短暫的，因而使其應用受到較大的限制。采用事先在體外構建能夠表達 siRNA 的載體，然后轉移到細胞內轉錄慢病毒(RNAi) 的策略，不但使脂質體有效轉染的......閱讀全文
慢病毒的包裝簡介及其應用范圍
慢病毒，（?Lentivirus?）載體是以?HIV-1?（人類免疫缺陷?I?型病毒）為基礎發展起來的基因治療載體。區別一般的逆轉錄病毒載體，它對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。慢病毒載體的研究發展得很快，研究的也非常深入。慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而達到持久性表達。慢
慢病毒的包裝簡介及其應用范圍
慢病毒，（ Lentivirus ）載體是以 HIV-1 （人類免疫缺陷 I 型病毒）為基礎發展起來的基因治療載體。區別一般的逆轉錄病毒載體，它對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。慢病毒載體的研究發展得很快，研究的也非常深入。慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而達到持久性表達
慢病毒的包裝簡介及其應用范圍
慢病毒，（ Lentivirus ）載體是以 HIV-1 （人類免疫缺陷 I 型病毒）為基礎發展起來的基因治療載體。區別一般的逆轉錄病毒載體，它對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。慢病毒載體的研究發展得很快，研究的也非常深入。慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而達到持久性表達
慢病毒的包裝簡介及其應用范圍
慢病毒，（ Lentivirus ）載體是以 HIV-1 （人類免疫缺陷 I 型病毒）為基礎發展起來的基因治療載體。區別一般的逆轉錄病毒載體，它對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。慢病毒載體的研究發展得很快，研究的也非常深入。慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而達到持久性表達
慢病毒包裝實驗
實驗材料 病毒試劑、試劑盒 無血清培養基脂質體胰酶含血清的培養基DMEM儀器、耗材 EP管6孔板CO2培養箱高速離心機-80°C冰箱實驗步驟 以六孔板中的1孔為例，每個樣品需要1×106個293T細胞。?1. 取1.5ml滅菌EP管，加入1.5μg包裝混合質粒和0.5μg表達質粒以及250μl的無血
慢病毒包裝實驗
慢病毒載體包裝之后成為假病毒顆粒后，可用于：（1）感染原代培養細胞；（2）制備穩定表達/沉默特定基因的單克隆細胞株；（3）in vivo的基因操作、轉基因動物，特別是轉基因大鼠的制備。實驗方法原理慢病毒是反轉錄病毒的一種，具有反轉錄病毒的基本結構和特性：整合入宿主細胞基因組，長期表達，可用于轉基因動
慢病毒包裝實驗
慢病毒包裝實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 慢病毒是反轉錄病毒的一種，具有反轉錄病毒的基本結構和特性：整合入宿主細胞基因組，長期表達，可用于轉基因動物制備；但也有不同于反轉
慢病毒包裝的原理
病毒包裝的原理，就是有遺傳物質有外殼蛋白，在細胞內可以指導二者包成病毒。腺病毒擴增，也只能在293A里擴增，其他的細胞不行.慢病毒載體多是由HIV改造的，野生型的慢病毒載體是可以復制的，但是用于實驗室就只能通過改造使其變為復制缺陷型的。簡單來說，就是把相應的涉及相應功能的元件進行替換或者刪除。慢病毒
病毒包裝技術——慢病毒載體構建及包裝流程
一、實驗流程（1和2為并列步驟）慢病毒過表達質粒載體的構建設計上下游特異性擴增引物，同時引入酶切位點，PCR(采用高保真KOD酶，3K內突變率為0%)從模板中（CDNA質粒或者文庫）調取目的基因CDS區（coding sequence）連入T載體。將CDS區從T載體上切下，裝入慢病毒過表達質粒載體。
病毒包裝技術3——慢病毒載體構建及包裝流程介紹
1 菌液的準備 1.1. 取含目的質粒的甘油菌液（-80℃或-20℃冰箱中），待菌液融化后，在超凈臺用接種環劃線于氨芐抗性的平板上，37℃倒置培養12-16h。待平板長出菌落，挑選生長狀態良好的單克隆菌落。若無目的質粒的菌液，則需取庫存質粒進行轉化，然后挑單克隆搖菌。 1.2. 將單