WIKI資訊
實驗流程：1. 收集胰蛋白酶消化的細胞并離心，用PBS清洗。2. 用100μl 裂解緩沖液冰浴溶解沉淀10min（每500000個細胞20μl裂解緩沖液）。3. 10000rpm，4°C離心10min，取上清轉移至新管。4. 用考馬斯亮藍法檢測蛋白質濃度。5. 用裂解緩沖液將溶液濃度調到5mg/ml，每小瓶中放100μl，-80°C儲存。6. 按照1：1體積比混合2×樣品緩沖液，煮沸5min后，室溫放置5min。7. 短時離心后點樣電泳檢測。溶液準備：裂解緩沖液：0.15M NaCl, 5mM EDTA(pH 8.0), 1% Triton×100, 10mM Tris-Cl(pH 7.4); 使用前加 5mM DTT, 0.1mM PMSF 異丙醇和5mM ε-氨基己酸2×樣品緩沖液：130mM Tris-HCl（pH8.0）, 20%（v/v）甘油, 4.6%（w/v）SDS, 0.02%溴酚藍, 2%DTTPBS（pH7.......閱讀全文
實驗步驟一、化學法和酶法細胞裂解微量的細胞裂解經常通過化學法或酶法或二者共同采用來完成。例如, 超聲和弗式細胞壓碎器 (Frenchpress 均質機) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培養液的情況，而且應用這些機械的方法經常會遇到過度的產熱和樣品被氧化等問題。微量細胞裂解的簡化方面的重大進
實驗步驟 一、化學法和酶法細胞裂解 微量的細胞裂解經常通過化學法或酶法或二者共同采用來完成。例如, 超聲和弗式細胞壓碎器 (Frenchpress 均質機) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培養液的情況，而且應用這些
RNA酶處理、基于DNA含量做標準曲線的CyQUANT實驗法細胞增殖同樣可以用DNA含量來評價并作出標準曲線。根據細胞曲線可計算出DNA含量，細胞裂解液經過RNA酶處理就排除了RNA對結果的干擾。在本應用說明中，列出了用DNA含量做標準曲線來定量細胞樣品的設置步驟。準備試劑步驟1：制備1X細胞裂解液
簡介用熒光方法定量細胞增殖可以簡單快速的檢測藥物或其他實驗處理方法對細胞生長的影響。Life Technologies公司的CyQUANT細胞增殖試劑盒是一個敏感性高、可重復并且簡便的做熒光微孔板檢測的方法。CyQUANT的GR染料可標記到細胞核上，通過熒光來計算細胞個數。DNA與RNA的比例會
實驗方法原理 本方法由 Bowtell 法（1987) 改進而成，可同時從許多不同細胞或者組織樣品中制備 DNA。本方案中的主要步驟包括將 DNA 沉淀在細胞裂解液和乙醇的交界面
實驗材料 細胞裂解液 其中蛋白質 35S 用標記 試劑、試劑盒
實驗方法原理 本方法由 Bowtell 法（1987) 改進而成，可同時從許多不同細胞或者組織樣品中制備 DNA。本方案中的主要步驟包括將 DNA 沉淀在細胞裂解液和乙醇的交界面上，接著將沉淀的 DNA 纏繞到一個 Shepherd 氏鉤上。纏在鉤上的 DNA 從乙醇溶液中轉出溶于所選擇
實驗材料 細胞裂解液其中蛋白質 35S 用標記試劑、試劑盒 裂解緩沖液SDS 聚丙烯酰胺凝膠探針GST 蛋白儀器、耗材 沸水浴翻轉祥品旋轉儀谷胱甘肽瓊脂糖球珠實驗步驟 材料緩沖液和溶液將緩沖液稀釋到適當濃度。裂解緩沖液20 mmol/LTris-Cl(pH8.0)200 mml/L NaCl1 mm
實驗方法原理本方法由 Bowtell 法（1987) 改進而成，可同時從許多不同細胞或者組織樣品中制備 DNA。本方案中的主要步驟包括將 DNA 沉淀在細胞裂解液和乙醇的交界面上，接著將沉淀的 DNA 纏繞到一個 Shepherd 氏鉤上。纏在鉤上的 DNA 從乙醇溶液中轉出溶于所選擇的液體緩沖液。
GST 沉降實驗與 far western(方案 2) 相比有—個優點：探針蛋白是在更自然的環境下與可能的搭檔蛋白孵育，因而增強了相互作用的有效性。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗材料細胞裂解液其中蛋白質 35S 用標記試劑、試劑盒裂解
一、細胞的準備 試驗一：組織培養細胞的細胞準備材料 完全培養基 流式細胞儀染色液 15或50ml尖底離心管實驗過程1． 對于懸浮培養的細胞，把細胞分裝到一個尖底離心管中，對細胞進行計數和活性分析，然后進入步驟3；2． 對于貼壁培養的細胞，用完全培養基從培養皿上吹起并吹散細胞凝聚物，
開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全。 細胞與試劑方面： 1、細胞(單層細胞，鏡檢適合) 2、培養液(MEM-0.2%LH 培養液或MEM 培養液或199 等適合細胞有要求的培養液) 3、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（1 萬單位） 4、7.5％NaHC03 溶液 5、0.25％胰
通用型植物線粒體DNA萃取試劑盒產品說明書（中文版） 主要用途 通用型植物線粒體DNA萃取試劑是一種旨在通過物理或化學破膜及離心處理方法，從植物細胞或組織中分離出完整而純化的線粒體細胞器，然后進一步生物酶處理以獲得高質量的線粒體DNA的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制
一、樣品制備試劑的準備二、細菌細胞樣品的裂解處理步驟三、人培養細胞樣品的裂解處理步驟四、膜蛋白裂解方法步驟一、樣品制備試劑的準備1、裂解緩沖液儲備液的準備下述本樣品制備方法已經過優化, 并被證明配合使用PF-2D 試劑盒可獲得最佳的結果。您若選擇其他的樣品處理和細胞裂解方法，請務必避免使用離子型的表
動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產品說明書（中文版） 主要用途 動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑是一種旨在通過低速差速離心和化學滲壓休克處理純化血小板、以及物理或化學破膜和高速差速離心的方法，直接從動物血細胞中分離出完整而純化的血小板線粒體細胞器，并在蛋白酶抑制混合劑的
二、機械法裂解細胞超聲和高壓裂解已經被高效地應用于微生物、植物和動物細胞的裂解。這些方法已經采用了幾十年，其設備和原理已經被詳細闡明（Harrison,1991;Hopkins，1991;Mid-delberg，1995)。超聲裂解是通過調諧的探頭或機臂的共鳴（15~25kHz) 所引發的髙
紅細胞裂解液（RBC Lysis Buffer,10×）簡介在生物科研領域，經常需要去除紅細胞。去除紅細胞的方法有多種，如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化銨紅細胞裂解液、Gey＇s Lysis Buffer。紅細胞裂解液（Red Blood Cell Lysis Buffer
動物細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產品說明書（中文版） 主要用途 動物細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑是一種旨在從動物細胞中分離出完整而純化的線粒體細胞器，并在蛋白酶抑制混合劑的幫助下，使已純化的線粒體膜結構破裂而獲得線粒體內活性蛋白酶系統的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、
真菌/酵母細胞活性內質網（ER）分離試劑盒產品說明書（中文版） 主要用途 真菌/酵母細胞活性內質網（ER）分離試劑是一種旨在通過機械或化學處理和差速離心方法，從真菌/酵母細胞中分離出完整的活性內質網細胞器組分的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。適合于各種新鮮培
第一章質粒DNA 的分離、純化和鑒定 第二章DNA 酶切及凝膠電泳 第三章大腸桿菌感受態細胞的制備和轉化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重組質粒的連接、轉化及篩選 第六章基因組DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技術 第八章聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆 第九章分
實驗方法原理試劑、試劑盒培養細胞懸液PBS暈圈溶液牛血清白蛋白乙醇醚10 X 切口緩沖液核苷酸混合物Bio-16-dUTP二硫蘇糖醇酵母 RNA鮭魚精 DNASSCTNT 溶液TNB 溶液儀器、耗材微型離心機Camag UV 盒 II熒光顯微鏡探針DNA實驗步驟一、制備含 DNA 纖維的載玻片標本大
實驗材料 載體和酵母菌 試劑、試劑盒 緩沖液和溶液 SD
主要用途動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑是一種旨在通過低速差速離心和化學滲壓休克處理純化血小板、以及物理或化學破膜和高速差速離心的方法，直接從動物血細胞中分離出完整而純化的血小板線粒體細胞器，并在蛋白酶抑制混合劑的幫助下，使已純化的線粒體膜結構破裂而獲得線粒體內活性蛋白酶系統的權威而經典的技術方
實驗概要本實驗詳細介紹了GST-pull down 技術的操作流程，主要包括：GST蛋白的大量制備，谷胱甘肽-瓊脂糖樹脂的處理，GST蛋白的結合，細胞裂解液的預清除及細胞裂解液的探測。實驗步驟1. 大量制備GST蛋白 1) 活化凍存菌種GST和GST-X：按1：50比例將表達
這種技術是把電泳分離的組分從凝膠轉移到一種固相支持體，并以針對特定氨基酸序列的特異性試劑作為探針檢測之。Western使用的探針是抗體，它與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現的抗原表位發生特異性反應。這種技術的作用是對非放射性標記蛋白組成的復雜混合物中的某些特異蛋白進行鑒別和鑒定。儀器：高壓鍋、玻璃勻漿
實驗方法原理 這一程序改自最先由 Daryl Stafford 及其同事描述的方法（Blin and Stanfford 1976)。 當需要大量哺乳動物 DNA，如用于 Somhe
這一程序改自最先由 Daryl Stafford 及其同事描述的方法（Blin and Stanfford 1976)。 當需要大量哺乳動物 DNA，如用于 Somhern 雜交或者用噬菌體 λ 載體構建基因組文庫時，應選用這一方法。從 5X107 培養的非整倍體細胞 ( 如 HeLa 細
實驗概要本實驗詳細介紹了GST-pull down 技術的操作流程，主要包括：GST蛋白的大量制備，谷胱甘肽-瓊脂糖樹脂的處理，GST蛋白的結合，細胞裂解液的預清除及細胞裂解液的探測。實驗步驟1. 大量制備GST蛋白 1) 活化凍存菌種GST和GST-X：按1：50比例將表達
1、流式細胞儀上的FL2-W FL2-A FL2-H 分別是做什么的？FL2-W是只檢測熒光的脈沖寬度， FL2-H是指脈沖高度。通常在做細胞周期分析時應用，用于去除粘連細胞。2、流式同型對照怎樣選擇？同型對照（Isotype Control）：使用與一抗相同種屬來源、相同亞型、相同劑量和相同的免
操作步驟： （一） 蛋白樣品制備 （1） 單層貼壁細胞總蛋白的提取： 1、倒掉培養液，并將瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養液（或將瓶直立放置一會兒使殘余培養液流到瓶底然后再用移液器將其吸走）。 2、每瓶細胞加3ml 4℃預冷的PBS（0.01M pH7.2～7.3）。平放輕輕搖動1m