WesternBlot的原理和所用試劑匯總
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 一、原理 與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。 二、分類 western顯影的方法主要有以下幾種: 1.放射自顯影 ......閱讀全文
Western Blot的原理和所用試劑匯總
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。原理與Southern或Northern雜交方法類似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物
Western Blot的原理和所用試劑匯總
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 原理 與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被
Western Blot的原理和所用試劑匯總
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 一、原理 與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blo
Western Blot的原理和所用試劑匯總
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 一、原理 與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blo
Western免疫印跡(Western Blot)實驗原理和主要試劑
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。實驗原理與Southern或 Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電
western blot原理
Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,經過聚丙烯酰胺凝膠電泳分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體上,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢
Western Blot--主要試劑
主要試劑 1、 丙烯酰胺和N,N’-亞甲雙丙烯酰胺,應以溫熱(以利于溶解雙丙稀酰胺)的去離子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N,N’-亞甲雙丙烯酰胺儲存液丙稀酰胺29g,N,N-亞甲叉雙丙稀酰胺1g,加H2O**100ml。)儲于棕色瓶,4℃避光保存。嚴格核實PH不得超過7.
Western Blot詳解-主要試劑
主要試劑1、?丙烯酰胺和N,N’-亞甲雙丙烯酰胺,應以溫熱(以利于溶解雙丙稀酰胺)的去離子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N,N’-亞甲雙丙烯酰胺儲存液丙稀酰胺29g,N,N-亞甲叉雙丙稀酰胺1g,加H2O至100ml。)儲于棕色瓶,4℃避光保存。嚴格核實PH不得超過7.0,因可以
western blot的實驗原理
蛋白免疫印跡(Western blotting 或 Immunoblotting)一般由凝膠電泳、樣品的印跡和免疫學檢測三個部分組成。第一步是做 SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳,使待測樣品中的蛋白質按分子量大小在凝膠中分成帶。第二步把凝膠中已分成條帶的蛋白質轉移到一種固相支持物上, 用得最多的材料是硝酸
western blot的實驗原理
Western Blot與Southern印跡雜交或Northern印跡雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品(跑PAGE 膠的原理你懂吧~~~),轉移到固相載體(硝酸纖維素膜NC膜)上