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  • 關于蛋白表達系統—昆蟲表達系統的介紹

    昆蟲表達系統是一類應用廣泛的真核表達系統,它具有同大多數高等真核生物相似的翻譯后修飾加工以及轉移外源蛋白的能力。昆蟲桿狀病毒表達系統是國內外十分推崇的真核表達系統。利用桿狀病毒結構基因中多角體蛋白的強啟動子構建的表達載體,可使很多真核目的基因得到有效甚至高水平的表達。它具有真核表達系統的翻譯后加工功能,如二硫鍵的形成、糖基化及磷酸化等,使重組蛋白在結構和功能上更接近天然蛋白;其最高表達量可達昆蟲細胞蛋白總量的50%;可表達非常大的外源性基因(一200kD);具有在同一個感染昆蟲細胞內同時表達多個外源基因的能力;對脊椎動物是安全的。由于病毒多角體蛋白在病毒總蛋白中的含量非常高,至今已有很多外源基因在此蛋白的強大啟動子作用下獲得高效表達。常用的桿狀病毒包括苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒(AcNPV)和家蠶型多角體病毒(BmNPV),常用的宿主細胞則來源于草地夜蛾Sf9細胞,用于表達外源基因的質粒來源于PUC系列,其含有一個多克隆位點......閱讀全文

    關于蛋白表達系統—昆蟲表達系統的介紹

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    桿狀病毒昆蟲細胞表達系統

    實驗步驟一、桿狀病毒表達載體最簡單的經典桿狀病毒表達載體是一個重組的桿狀病毒,其基因組含有一段外源核酸序列,通常為編碼目標蛋白質的dDNA,在多角體蛋白啟動子控制下進行轉錄。這個嵌合的基因由多角體蛋白啟動子和外源蛋白編碼序列組成,其位于病毒基因組多角體座位,替代了非必需的野生型多角體基因。在實驗室中

    桿狀病毒昆蟲細胞表達系統

    實驗步驟 一、桿狀病毒表達載體 最簡單的經典桿狀病毒表達載體是一個重組的桿狀病毒,其基因組含有一段外源核酸序列,通常為編碼目標蛋白質的dDNA,在多角體蛋白啟動子控制下進行轉錄。這個嵌合的基因由多角體蛋白啟動子和外源蛋白編碼序列組成

    桿狀病毒昆蟲細胞表達系統3

    七、桿狀病毒表達載體的新一代昆蟲細胞宿主最早的鱗翅類昆蟲細胞的遺傳轉化技術出現在1990年(Jarvisetal.,1990)。那時,研發該技術的初衷在于構建一個穩定轉化的昆蟲細胞系,它旨在能夠持續生產目標重組蛋白而無需使用桿狀病毒進行感染。然而, 構建這個生產用細胞系所用的載體及方法也為構建具有新

    桿狀病毒昆蟲細胞表達系統2

    五、親代桿狀病毒基因組的改進就像轉移質粒的改進,對親代桿狀病毒基因組的改進也是為了滿足各種不同的需要。起初,最主要的目的是找到克服重組桿狀病毒載體構建和分離低效率的方法,這也是最初的桿狀病毒-昆蟲細胞系統存在的主要問題。現在已經知道這個問題的根源在于, 在共轉染的昆蟲細胞系中,轉移質粒和親代桿狀病毒

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    昆蟲細胞的擴增

    實驗方法原理?用機械法從細胞單層分離細胞,在 27°C 條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。實驗材料?Sf9細胞二甲基亞砜Pluronic F68試劑、試劑盒?生長培養液儀器、耗材?培養瓶旋轉培養瓶和磁力攪拌器27°C培養箱實驗步驟 常規維持培養1. 通過刮取法或用培養液沖洗細胞(( ATCC # CR

    昆蟲細胞的擴增

    實驗方法原理用機械法從細胞單層分離細胞,在 27°C 條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。實驗材料Sf9細胞二甲基亞砜Pluronic F68試劑、試劑盒生長培養液儀器、耗材培養瓶旋轉培養瓶和磁力攪拌器27°C培養箱實驗步驟常規維持培養1. 通過刮取法或用培養液沖洗細胞(( ATCC # CRL-171

    昆蟲細胞轉染實驗

    實驗材料 昆蟲細胞試劑、試劑盒 胎牛血清脂質體轉染劑儀器、耗材 培養皿錐形瓶培養箱離心機轉子實驗步驟 1. ?接種2×106個Sf9細胞于60 mm 培養皿,在含10%胎牛血清的完全培養液或無血清培養液中培養,于27℃培養30~60 min,讓細胞貼壁。2. ?相應于毎一待轉染的培養皿,吸取40

    昆蟲細胞轉染實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 昆蟲細胞 試劑、試劑盒

    昆蟲細胞轉染實驗

    實驗材料昆蟲細胞試劑、試劑盒胎牛血清脂質體轉染劑儀器、耗材培養皿錐形瓶培養箱離心機轉子實驗步驟1. ?接種2x106個Sf9細胞于60 mm 培養皿,在含10%胎牛血清的完全培養液或無血清培養液中培養,于27℃培養30~60 min,讓細胞貼壁。2. ?相應于毎一待轉染的培養皿,吸取40 ul 無菌

    昆蟲細胞的擴增

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用機械法從細胞單層分離細胞,在 27°C 條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。 實驗材料 Sf9細胞 二甲基亞砜

    昆蟲細胞轉染實驗

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    中國昆蟲學會專家共商深圳昆蟲科技館建設

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    昆蟲病原線蟲與寄主昆蟲棲境植物根系互作關系

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    昆蟲信息素的分類

    信息素是生物體之間起化學通訊作用的化合物的統稱, 是昆蟲交流的化學分子語言。包括:利它素、利己素、協同素、集合信息素、追蹤信息素、告警信息素、疏散信息素、性信息素。在自然界中,害蟲雌成蟲在性成熟后,會釋放一種叫性信息素的化合物, 它釋放至空氣中后隨氣流擴散,刺激雄蟲觸角中的化學感覺器官,引起雄性個體

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    傳粉昆蟲:我的花呢?

      傳粉昆蟲:我的花呢?  然而,并不是所有的昆蟲都會受益于氣候變暖,有的昆蟲反而因此遇到了種種困難,傳粉昆蟲就是這樣的天選“倒霉蛋”。  與一般農業害蟲不同,傳粉昆蟲不會長期待在一棵植物上,以植物葉片或莖干為食。為了獲得足夠的食物,傳粉昆蟲需要大范圍地搜尋花朵,必要的時候還會跟著花期遷徙。  生活

    昆蟲產業悄然“蝶變”

      昆蟲資源產業化在推動農業發展方式轉變、農業供給側結構性改革和農業發展新舊動能轉換方面具有重要的作用,有利于實現生態效益、經濟效益和社會效益的有機統一。未來,昆蟲資源產業化發展空間無可限量。  油炸螞蚱、香煎竹筍蛹、醬拌蟋蟀、油炸蟬蛹、昆蟲叉燒包……昆蟲不知不覺間走上了人們的餐桌。而從餐桌回溯到田

    昆蟲病毒的培養實驗

    實驗方法原理 培養昆蟲病毒主要采取組織培養和感染宿主兩種方法,后者比較容易成功,使用更為廣泛。本實驗以斜紋夜蛾(Prodenialitura)核型多角體感染宿主來培養病毒。斜紋夜蛾能危害棉花、蔬菜等多種作物。核型多角體病毒是多角體病毒侵入宿主細胞后,在細胞核內形成多角體,多角體內包含著很多病毒粒子。

    方案27.7-昆蟲細胞的擴增

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用機械法從細胞單層分離細胞,在 27°C 條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。 實驗材料 Sf9細胞 二甲基亞砜

    什么是昆蟲信息素應用?

    中文名稱昆蟲信息素應用英文名稱application of insect pheromone定  義昆蟲信息素在害蟲防治或益蟲利用方面的應用。應用學科生態學(一級學科),化學生態學(二級學科)

    昆蟲聚集信息素的概念

    中文名稱昆蟲聚集信息素英文名稱insect aggregation pheromone定  義昆蟲釋放的,能引起同種其他個體聚集的信息化學物質。應用學科生態學(一級學科),化學生態學(二級學科)

    昆蟲細胞的保存培養實驗

    實驗材料草地夜蛾(Sf 9)細胞試劑、試劑盒70%乙醇0.4%(m V)臺盼藍儀器、耗材無血清昆蟲細胞培養基60 mm 培養皿或 25 cm2 培養瓶 27℃ 培養箱旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐實驗步驟1. 將 3 ml 含 10% 胎牛血清的昆蟲細胞培養基 TNM-FH

    昆蟲細胞共轉染實驗

    實驗材料草地夜蛾(Sf 9)細胞含目的基因的重組桿狀病毒轉移質粒陽性對照載體:pVL 1392 - XylE試劑、試劑盒ORF 1629 缺失的線性 AcMNPV DNA轉染緩沖液 B轉染緩沖液A500 mmol/L 兒茶酚/50 mmol/L 硫酸氫鈉儀器、耗材含 10% 胎牛血清(FBS)的 T

    昆蟲具有獨特的免疫記憶

      當使用同一抗原再次免疫時,可引起比初次更強的抗體產生,也就是可看到更強烈的反應,這被稱為免疫記憶,也是人類接種疫苗的原理和基礎。但對無脊椎動物來說,其不能產生抗體。   印度國家生物科學中心科學家伊莫羅澤·可汗在《英國皇家學會學報B》上發表論文稱,隨著分子生物學的進步,人們發現昆蟲在進化中發展出

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