第25期質譜沙龍上關于雙梯度液相的報道

發布時間：2010-01-28 00:29 原文鏈接：第25期質譜沙龍上關于雙梯度液相的報道

　　戴安公司雙梯度液相色譜及其應用

　　戴安公司液相色譜應用工程師趙秀苔老師

　　戴安公司的液相色譜應用工程師趙秀苔老師向大家介紹了“戴安公司雙梯度液相色譜及其應用”。趙老師介紹，戴安公司擁有從納升級液相色譜、常規液相色譜到半制備級液相色譜全面的高效液相色譜級別。此外，戴安公司還生產常規、超高效、生化液相色譜柱。智能化的液相色譜有變色龍色譜網絡軟件支持，可控制大約30 個生產廠家的近300 種的色譜部件。

　　戴安公司的UltiMate3000系列液相色譜有緊湊系統、標準系統、鈦系統、超高速液相色譜(RSLC)、x2雙梯度液相色譜系統(DGLC)。其中，趙老師主要介紹了DGLC。DGLC的模塊及其功能如下圖所示。

　　DGLC模塊及功能

　　DGLC有不同的配置可供用戶選擇，如微流速系統DGP3600M和超高效(U-HPLC)雙梯度液相色譜系統DGP3600RS等。DGLC可以為用戶解決以下問題：

　　1) 快速分析：即在不改變已經經過認證的方法的前提下，提高分析速度。包括節省梯度平衡的沖洗時間、提高梯度方法的速度的串聯(Tandem)色譜以及對任何方法都能通過共享色譜泵、自動進樣器和柱溫箱來提高一倍分析速度的并聯(Parallel)色譜。

　　2) 不同應用之間的快速切換：一臺儀器同時為兩種應用做準備，連續不間斷運行兩個不同應用。

　　3) 多維分離：即通過2D 或3D 提高分離度，多用于生化及蛋白質組學領域，目前主要集中在微柱、毛細管柱及納升柱，也包括今年流行的“全自動離線”多維色譜。

　　4) 樣品的在線(On-Line)前處理：集成的SPE 小柱可提高自動化程度，還可以直接分析血樣、食品樣等較臟的樣品。

　　5) 提高質譜靈敏度：體現在在線快速脫鹽、使用左泵作為輔助泵以及通過柱后交換流動相增加揮發性有機溶劑比例、調節pH值、或添加輔助試劑以提高質譜的響應值。

　　6) 柱后衍生;將第二個泵作為柱后衍生泵。

　　7) 兼容性：可兼容任何現有的HPLC 系統。

　　接下來，趙老師戴安公司的幾種智能化質譜解決方案：

　　1. 串聯液相色譜

　　串聯液相有兩個流路，色譜柱在兩個流路間切換，即再平衡過程中直接用柱切換閥切換至圖中左面的泵進行再平衡和清洗，在運行周期中省去了沖洗及平衡色譜柱的時間。

　　2. 并聯液相色譜

　　并聯液相相當于兩套獨立的流路，共享一個自動進樣器和柱溫箱。并聯液相通過變色龍軟件將其配置為兩套系統，可運行不同應用程序下的兩套樣品。

　　為了進一步說明上述解決方案的特點，趙老師舉了環境中爆炸物殘留的分析的應用實例。

　　爆炸殘留物的分析在軍事演習現場及周圍環境評價、犯罪及恐怖襲擊案件的偵破中都有重要的意義。EPAMethod8330是檢測環境中爆炸殘留物最常用的方法，該方法中規定了14種需要監測的爆炸物，建議用一種色譜柱(如：C18柱)作為主要的分析柱分離這些化合物;并建議用另外一種選擇性有差異的反相柱作為補充確認(如：CN柱)。14種化合物都要被分離(而2006年新的8330B需要分析多達17種)，并在分析后盡可能快地確認。用普通C18及CN很難滿足上述要求。Dionex的專用色譜柱(Acclaim Explosive E1 及E2 色譜柱)可以一次分離全部14 個所要求的物質。E1 及E2 有不同的選擇性。如果用并聯液相色譜系統，可用E1 分析、E2 確認，大大提高了檢測通量。

　　3. 兩維色譜(2D色譜)

　　2D色譜結合使用兩種不同選擇性的色譜柱，極大程度地提高了峰容量和分離選擇性。2D色譜有在線(on-line)和離線(off-line)兩種。

　　off-line 2D色譜是一種可以極大提高復雜混合物分離度的簡單、快速的方式。此方法最具優勢的地方是一維和二維之有濃縮富集的應用。此方法不適合定量分析，但是，如果樣品的熱穩定性好，提高自動進樣器溫度使流動相揮干再定容就可以克服這一點。用變色龍軟件可編輯自動進樣器程序。

　　on-line 2D色譜適宜應用于簡單體系，它提供一個快速、方便的常規不純物的分析。密閉體系，避免樣品丟失以及降解，可用于定量分析。

　　4. 在線固相萃取/ 濃縮(On-Line SPE)技術

　　On-Line SPE技術具有以下特點：減低手工操作需求、節約時間;重現性高;方便于直接進樣;更快、更經濟;可以自動化;無人照管操作過夜或過周末;減少接觸對人體有害物質的機會。該技術廣泛應用于食品及飲料分析實驗室、環保實驗室和制藥及臨床實驗室。On-Line SPE檢測方法可借助變色龍軟件進行開發。