反應：
HATU 常見于胺酰化反應（即酰胺形成）。此類反應通常在兩個不同的反應步驟中進行：
1、 羧酸與 HATU 反應形成 OAt 活性酯；
2、將親核試劑（胺）加入到活性酯溶液中，得到酰化產物。
HATU活化羧酸和隨后的N-酰化的反應機理總結在下圖中。使用更常見和市售的亞胺異構體顯示了該機制；然而，類似的機制可能適用于脲形式。在第一步中，羧酸根陰離子（通過有機堿去質子化形成[未顯示]）攻擊 HATU 以形成不穩定的O-酰基（四甲基）異脲鹽。
OAt 陰離子迅速攻擊異脲鹽，提供 OAt 活性酯并釋放化學計量量的四甲基脲。向 OAt 活性酯中加入親核試劑，例如胺，導致酰化。
與 HATU 偶聯相關的高偶聯效率和快速反應速率被認為是由吡啶氮原子引起的相鄰基團效應引起的，吡啶氮原子通過氫鍵 7 元環狀過渡態穩定進入的胺。
常見用途
HATU是常用的縮合試劑，用于酰胺鍵的合成中。
HATU通過活化羧基，起到促進酰胺鍵生成的作用。在肽核酸(peptide nucleic acid, PNA)合成中的表現優于HBTU。
