Jimmunol：為什么肝臟移植手術沒有嚴重的排異反應？

　　肝臟是一類“免疫豁免”器官，在嚙齒類動物中，幾乎所有的同種異體肝臟移植都不會出現排異反應。在人類患者中，肝臟異體移植手術在注射較低劑量的免疫抑制類藥物就能夠有效抑制排異反應，這在其它器官移植手術中是難以實現的。另外，肝臟無時無刻不在經受大量外源抗原物質的侵擾（比如食物與微生物抗原），這使得其維持整體的穩態十分不易。有意思的是，雖然整體肝臟移植手術排異反應極低，但單純的肝細胞移植卻往往受到自體的排斥。因此，肝臟非實質細胞對于維持整個器官的免疫豁免特性十分重要。

　　肝臟星狀細胞（HSC）占據整個肝臟非實質細胞的三分之一。受到刺激后，HSC會分泌一系列的局部生長因子以及基質金屬蛋白酶，幫助肝臟的修復與纖維化。雖然HSC對肝臟損傷修復以及纖維化的作用已經有充分的研究，這類細胞對肝臟的免疫調控機理仍不清楚。之前的研究表明HSC能夠直接通過programmed death-ligand 1(PD-L1)抑制T細胞的激活，同時HSC能夠通過誘導骨髓來源的抑制性細胞擴增從而間接抑制整個獲得性免疫系統。不過，HSC是否對B細胞有類似影響仍不清楚。

　　肝臟中的B細胞與T細胞在生理條件下存在相互作用。除了產生抗體，對抗病原體以及造成自身免疫疾病以外，激活的B細胞還能夠分泌一系列的炎性因子（包括IL-6），以及作為抗原呈遞細胞介導T細胞的激活。因此，來自美國克利夫蘭Lerner研究所的Feng Lin研究組對小鼠HSC細胞對B細胞的影響進行了研究。結果發表在最近一期的《Journal of immunology》雜志上。

　　首先，作者分離了小鼠的B細胞，并利用anti-CD40/IL-4進行誘導，使其激活。之后，作者將這部分激活的B細胞進行CFSE標記（一類核酸染料，染色強度隨分裂代數增加而成比例降低），并將其與HSC進行共同孵育。接下來，作者通過流式檢測CFSE的強度分布觀察B細胞的分裂情況。結果顯示，HSC能夠有效抑制激活B細胞的分裂，該抑制效應具有劑量依賴性。

　　為了進一步研究其抑制效應的機制。作者利用TRANSWELL實驗（即利用一個小型帶孔的培養皿培養B細胞，大培養皿培養HSC。之后將小皿倒扣并浸沒在大培養皿中。兩個皿之間可以進行液體交換，但細胞不能相互接觸）研究了HSC是否需要直接與B細胞相互作用。結果顯示：這種方式下HSC抑制B細胞的活性受到了極大的干擾。這一結果表明HSC表面的分子對于介導這一抑制反應具有重要的作用。

　　為了鑒定具體的細胞表面分子，作者希望了解之前發現的HSC表面的PD-L1是否參與了這一過程。作者將HSC細胞表面的PD-L1通過中和抗體的方式封閉，之后與活化后的B細胞進行共同孵育。結果顯示：這一處理同樣能夠降低HSC的抑制效應。

　　最后，作者比較了野生型小鼠與PD-L1缺陷型小鼠的HSC在抑制B細胞活性方面的差異。結果顯示：相比于野生型小鼠，突變體小鼠HSC抑制B細胞分裂的活性相對較低。