第二屆生物制藥分離純化技術學術論壇召開

　　分析測試百科網訊 2015年9月17日，第二屆生物制藥分離純化技術學術論壇在美麗的蘇州獨墅湖畔召開。本屆會議由蘇州納微分離純化技術有限公司、中國生物工程雜志主辦，獲得北京大學蘇州國際技術轉移中心、蘇州千人計劃專家聯合會、蘇州工業園區中小企業服務中心、蘇州納米科技發展有限公司、蘇州工業園區生物產業發展有限公司等多方支持，邀請了30余位在國內外生物制藥分離純化領域具有深厚研究功底和豐富應用經驗的領軍人物，共有來自中國生物制藥領域的近400位一線技術來人員共同交流。

第二屆生物制藥分離純化技術學術論壇會議現場

　　第二屆生物制藥分離純化技術學術論壇開幕式上，蘇州工業園區科技局張東馳局長、蘇州納微科技有限公司董事長兼首席科學家江必旺博士、《生物工程雜志》張宏翔老師分別上臺致歡迎辭。

蘇州工業園區科技局 張東馳局長

《生物工程雜志》 張宏翔老師

中國科學院 張玉奎院士

　　中國科學院張玉奎院士作主旨演講報告——《新型功能材料制備及其在蛋白質組分析中的應用》。

　　人類蛋白組學發展越來越快，2014年，Pandey等分析了17個成人組織樣品、7個胎兒組織和6個原造血細胞，共鑒定到17294個蛋白質，即對應于約84%的編碼基因；2014年Kuster等分析了60個組織、13份體液樣品、147個細胞系和1300個親和純化蛋白，鑒定到18097種蛋白質；2015年，Uhlen等人結合基因組學、轉錄組學和蛋白質組學策略，實現了對人體44種組織和器官的16975種蛋白質編碼基因的分析，并對其中90%的編碼蛋白進行了確認和定位。

　　張玉奎院士在報告中向與會者介紹了硅基質材料、氧化石墨烯類材料、高分子材料、雜化材料在蛋白質組分析中的應用。

　　蛋白質組分析即Top-down和Bottom-up兩種策略，其預處理和色譜分離都離不開新型功能材料。張玉奎院士指出，硅膠顆粒性色譜填料種類很多，其中核殼硅膠具有柱效高、傳質快、柱外效應小的優點，但目前也存在合成步驟繁瑣不穩定、模板劑難以去除的缺點。張玉奎院士提出了“一步法”制備具有垂直孔道的亞二微米核殼硅膠微球，以鞣酸為模板劑制備亞二微米核殼微球。

　　“一步法”制備具有垂直孔道的亞二微米核殼硅膠微球：將無孔硅膠通過刻蝕再沉積法獲得核殼硅膠，通過酸擴孔得到孔徑優化后的核殼硅膠。與無孔硅膠相比，核殼微球單分散性和均一性好，CV值小于5%，殼層結構均勻，含有線性孔道；柱效高色譜峰形對稱；能在1分鐘內實現生物分子快速分離，對蛋白酶解產物分離的峰容量為120；具有垂直孔道的亞二微米核殼硅膠微球能夠快速分離5種標準蛋白，且對抗體分離優于商品化微球。

　　以鞣酸為模板劑制備亞二微米核殼微球：在鞣酸和銨陽離子混合物體系中進行硅層的層層生長，粒徑分布均勻，CV值小于5%；在蛋白質分離應用中，分離效果與商品化相當，重現性好，載樣量更高。

　　氧化石墨烯材料比表面積大，表面含有大量含氧基團：羧基、羥基和環氧等，是理想的基質載體。

　　蛋白質糖基化是生物體內最重要、最常見的翻譯后修飾之一，糖基化分析策略：糖蛋白質富集→酶解→糖肽富集→去糖基化→進樣分析。通過基于“巰基-雙鍵”的點擊聚合法制備的具有三維樹枝結構硼酸功能化聚合物微球，具有提高硼酸基團的鍵合量，提高富集選擇性。

　　雜化材料包含雜化整體分離柱和自組裝分子印跡磁球。無機有機雜化整體柱，基于重胺基橋聯硅氧烷的C8雜化柱，能調節材料的物化性能，如機械強度、化學穩定性和親/疏水性等；改善材料的孔結構從而提高分離效率；實現骨架主鏈即孔壁的功能化。自組裝分子印跡磁球，是以蛋白質抗原決定基為模板，通過聚合物自組裝技術制備印跡磁球。

蘇州納微科技有限公司董事長兼首席科學家 江必旺博士

　　隨后，蘇州納微科技有限公司董事長兼首席科學家江必旺博士上臺作《新型高效色譜填料的研究及其在生物醫藥分離純化的應用》精彩報告。報告介紹了各種基質填料，填料特性、如何選擇及其應用。

　　報告指出，下游分離純化占據整個生物制藥成本的50-80%，往往是生物制藥生產的瓶頸，而隨著生物制藥分離純化挑戰越來越大、HPLC應用越來越多，色譜填料或層析介質是層析和色譜系統的心臟。

　　而如何選擇填料呢？現實中沒有一款填料可以滿足所有要求，每種填料都有自己的特點，選擇合適的可滿足重要需求的才最重要，高載量與高分辨率往往相互矛盾，選擇填料要綜合考慮成本、分離效率、產品純度、穩定性等，根據純化目標分子特性及雜質選擇填料，選擇的填料要能從實驗室放大到規模生產。

　　填料粒徑均勻能帶來裝柱容易、反壓低、流速快、柱效高，洗脫集中、洗脫體極少、重復性好等優勢。江必旺博士指出，合成粒徑精確可控的單分散多孔硅膠色譜填料一直都是該領域的技術難題。用均粒多孔高分子微球做模板通過在孔道結構里組裝氧化硅納米粒子形成聚合物/氧化硅復合微球，再通過高溫處理制備孔徑和粒徑可精確調控單分散多孔氧化硅微球。

　　報告指出，幾乎所有分離模式都與填料孔道結構和比表面積有關，在相同孔容積條件下，孔徑越小，比表面積越大，介質孔道結構還與填料機械強度有關。選擇合適孔徑及孔容積可以提高填料載量和分離效率，有效孔徑越小，有效比表面積越大，上載量越大。微球分離介質的孔道結構可以影響分離效率、載量、分離度、對微球孔徑的控制是開發分離純化介質的關鍵技術之一。

　　會議間隙，張玉奎院士接受了分析測試百科網編輯的獨家采訪。據悉，張玉奎院士將出任分離純化產業聯盟名譽會長。

　　1、對于從事色譜應用研究的一線研究人員，有什么鼓勵的話？

　　 我非常高興地看到中國液相色譜填料蓬勃發展，一大批優秀人才歸國創業，就如江必旺博士，是入門最晚的一個，但是發展特別快，色譜填料做得非常漂亮。當然還不止他一個，還有迪馬的李博士，博納艾杰爾汪群杰博士等。

　　2、請談談色譜填料的未來發展方向。

　　 我認為色譜填料的發展方向，是和材料科學、色譜應用息息相關的，而色譜應用主要是目前最熱門的生化應用，這方面應用一直對色譜填料提出新的技術要求，色譜填料是根據需求而不斷發展的。其中，薄殼填料是很熱門的，既有足夠的負載量，又有非常快的傳質速度和高效率，很有前景。另一方面是整體柱，目前整體柱的產業化一直沒有發展好，并沒有達到批量生產供應。我認為國內企業可以集中力量做整體柱，用于生化分析、蛋白質科學等領域。

　　 另一方面，我認為將來色譜的發展是“一大一小”，大即無限大，用于制備色譜的大柱子大流量；而小就是越小越好，最后能發展到50μm左右與發絲差不多粗細的柱子，用于生物分離領域。

　　3、對于本屆生物制藥分離純化技術學術論壇有什么感受？

　　我非常高興，看到了中國填料的曙光。第二是覺得后繼有人，年輕人都起來了，還都是領軍人物，這是讓人非常高興的事情。生物制藥分離純化技術學術論壇的特點是與產業化、應用都密切結合，而不僅是在討論柱效有多么高，柱效高當然是很好的，但是如何制備呢。我對填料追求了幾十年，從去年開始看到了光明，中國真的有希望在國際上成為填料大國。

第二屆生物制藥分離純化技術學術論壇與會人員合影

　　第二屆生物制藥分離純化技術學術論壇也獲得了來自北京創新通恒科技有限公司、安拓思納米技術有限公司、江蘇漢邦科技有限公司、中科森輝微球技術（蘇州）有限公司、蘇州賽譜儀器有限公司、榮捷生物工程（蘇州）有限公司、上海宸橋生物科技有限公司、天津康科德科技有限公司、上海星可高純溶劑有限公司、利穗科技（蘇州）有限公司、東曹（上海）生物科技有限公司、海貍納米科技（蘇州）有限公司、instrAction、深圳華創精科生物技術有限公司等多家廠商的贊助支持。

蘇州納微科技有限公司

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