NanoPro納米級超靈敏蛋白質檢測帕金森病生物標志物DJ1

　　帕金森病（Parkinson’s disease，PD）是一種常見的神經系統變性疾病，為老年人所多見。

　　DJ-1是帕金森病的典型生物標志物，該標志物及各種修飾異構體的檢測定量對于臨床診斷及治療評估十分重要。但該蛋白及異構體的檢測非常困難，傳統方法基于雙向電泳及液質聯用，重復性差，定量困難，動態范圍低等。因此限制了該疾病的深入研究。本文介紹一種全新的檢測平臺如何輕松通過毛細管等點聚集技術，成功定量檢測到腦樣品中各種復雜DJ-1異構體。

　　技術上，采用革新的毛細管等點聚焦技術，DJ-1在兩性電解質中進行自動化電泳，不同的修飾異構體根據各自等電點得以分開，然后利用通用抗體進行雜交識別，進而實現不同異構體的檢測及定量。整個平臺自動化程度高，放置樣品及抗體后整個系統自動運行，直至產生最終結果，克服了眾多人工步驟所導致的重復性及重現性差等缺點；檢測通量高，最高可達96個樣品/次，因此適合檢測大量不同處理設計后的樣品，如對照組與處理組，處理組的不同劑量等；另外，系統的S/N值及動態范圍都比較寬，能以較強的穩健性進行差異懸殊的樣品間定量比較。

　　實驗設計上，文章比較了高脂飲食下，帕金森病DJ-1在小鼠腦組織及人腦脊液中的各修飾異構體的表達量變化。揭示出DJ-1的某些異構體峰在高脂飲食下與對照組存在顯著的差別。因此，這些異構體峰可作為潛在的早期臨床診斷、疾病分型或治療評估指標。

　　典型結果：

　　上圖中，綠色顯示了小鼠DJ-1缺失組，藍色顯示DJ-1正常組。DJ-1缺失組未檢測到信號，顯示了基線水平，而DJ-1正常組檢測到各種異構體峰，說明了該檢測的有效性及靶標特異性。即：檢測到的各個峰就是我們的靶標DJ-1。

　　上圖中，顯示了獨立的20次實驗峰型疊加圖，所有峰型輪廓幾乎完全重疊。顯示了該系統強大的實驗重復性及重現性。利用該系統進行檢測，數據十分穩健，實驗結果高度可信。

　　上圖中，將DJ-1在對照組與高脂飲食組進行了表達比較。發現第3、4、6號峰對應的異構體在兩組之間存在顯著性差異。