僅采用NgAgo蛋白質，研究人員稱跟韓春雨實驗沒有關聯

　　這是自韓春雨之后，中國研究人員發表的有關NgAgo基因技術的第二篇學術論文。劉東在接受科技日報記者獨家專訪時表示，從學術角度確實無法評價，“我們用不同的系統，也沒有重復他（韓春雨）的實驗，僅僅是都用了NgAgo這樣一個蛋白質而已，無法做任何關聯和討論。”

　　▲劉東，2011年獲德國馬克斯-德爾布呂克分子醫學中心/柏林自由大學自然科學博士學位。2012年8月起任南通大學神經再生重點實驗室副教授，2013年起擔任碩士研究生導師。中國解剖學會再生醫學專業委員會委員，江蘇省發育與細胞學會理事。

　　“我們采用NgAgo技術，并不是要進行重復或驗證，僅僅是把它當作一種工具，建立基因敲除斑馬魚模型。”11月13日，記者聯系到南通大學神經再生重點實驗室副教授劉東，他電話另一端強調著這句話。

　　在11日出版的新一期《自然》雜志子刊《細胞研究》上，劉東以通訊作者身份發表論文，報告了將NgAgo基因技術用于斑馬魚的研究結果。當天晚上，消息就傳遍國內各大學術圈，“第二天早上起來一看，我的手機都快被各種消息擠爆了。”

　　一篇論文為何引起這么大的反響？圈內人士告訴記者，雖然是發表在《自然》雜志子刊上，但這樣的轟動效應還是從來沒有過的，原因只有一個，劉東采用了廣受學術界質疑的NgAgo基因技術。這是自韓春雨之后，中國研究人員發表的有關NgAgo基因技術的第二篇學術論文。

　　▲今年5月，河北科技大學韓春雨團隊在《自然》雜志子刊《自然?生物技術》上首次發表關于NgAgo基因技術的論文，全球為之轟動。但隨后，多名國內外學者公開表示無法重復論文中描述的實驗，從而引發爭議。

　　“各路媒體，甚至還有許多國外雜志找到我，讓我發表對韓春雨和NgAgo技術的評價，這真是讓我們很苦惱的問題。”劉東說，客觀地來看，從學術角度確實無法評價，“我們用不同的系統，也沒有重復他的實驗，僅僅是都用了NgAgo這樣一個蛋白質而已，無法做任何關聯和討論。”

　　劉東告訴科技日報記者，他主要從事的是血管新生方面的研究，“利用多種遺傳操作技術建立轉基因和基因敲除斑馬魚模型”在實驗室主頁關于他本人的研究領域介紹中排第三，也就是說，這只是他的一項“副業”——利用這些模型來研究血管新生。

　　在此次發表的論文中，劉東敲低的基因是fabp11a，并因此導致斑馬魚眼部發育缺陷，“這與血管新生沒有直接的聯系”，他直截了當地告訴記者。

　　但是在實驗之初，劉東確實是想利用NgAgo技術進行基因敲除，而不是敲低。敲除和敲低盡管只有一字之差，但卻是完全不同的兩個學術概念。

　　基因敲除是去除不想要的基因，使目標基因永久性的表達沉默。而基因敲低則保留目標基因，只是阻斷目標基因的表達，但在下一代生物體內依然能夠進行基因表達。敲除是基因編輯的功能之一，而敲低不是。

　　在5月份開始的實驗中，劉東想要完成的基因敲除沒有實現，但是卻意外收獲基因敲低這一結果。為了確保實驗結果的準確性，整個實驗持續了5個多月，直到投稿時實驗仍然在持續。

　　他們發現，NgAgo 的存在，使 30% 的斑馬魚胚胎在發育后出現了眼部畸形，但這不是基因編輯的結果。測序發現，fabp11a的基因沒有發生任何變化，反倒是 fabp11a mRNA 的相對表達量下降了約50%。fabp11a 沒有被編輯，但被敲低了。

　　NgAgo 對 fabp11amRNA 表達的下調只是一個意外嗎？為了驗證這一點，研究人員又對斑馬魚中的其它四個基因進行的測試。結果發現，NgAgo都能實現敲低作用。因此，他們得出結論：NgAgo 的敲低作用是具有普遍性的。

　　“從實驗中看，NgAgo的基因敲低效率（比傳統方法）更高。”劉東說，不過他也補充說，這一觀點并不是很嚴謹，畢竟測試的基因數量很少，方法也不是很系統。

　　盡管如此，劉東還是很肯定地表示，沒有在NgAgo中重復出基因編輯功能。“我們認為 gDNA/NgAgo 為斑馬魚中的基因敲低提供了一種替代方案。”在論文中，劉東和他的伙伴們這樣寫到。

　　對于未來會不會繼續在實驗中研究觀察NgAgo技術，劉東說：“這不是我的主要研究方向和興趣，是否進一步研究還不確定。”

　　科普小貼士

　　為科研獻身的斑馬魚是什么？

　　斑馬魚原產于南亞，是一種常見的熱帶觀賞魚，因其體側具有斑馬一樣暗藍與銀色相間的紋條而得名。斑馬魚個體小，易于飼養，成年體長 4-5cm。可在有限空間里大量養殖，滿足樣本需求量大的研究。

　　之所以選擇斑馬魚作為人類疾病動物模型，是因為斑馬魚在基因水平上 87％與人類同源，早期發育與人類極為相似，已成為研究相關疾病基因的最佳模式生物。目前，斑馬魚模式生物的使用正逐漸拓展和深入生命體的多種系統的發育、功能和疾病的研究中，例如神經退行性疾病、心血管疾病、免疫系統疾病等，并已用于小分子化合物的規模新藥篩選。因此，斑馬魚作為最有前途且最廉價的模式生物而被廣泛的應用。