推進LCMS／MS技術臨床應用提高臨床檢驗技能水平

發布時間：2017-04-19 23:00 原文鏈接：推進LCMS／MS技術臨床應用提高臨床檢驗技能水平

——復旦大學附屬中山醫院液相色譜-質譜技術臨床應用培訓班舉辦

　　分析測試百科網訊 2017年4月19日，由復旦大學附屬中山醫院檢驗科主辦、復旦大學生物科學研究院協辦的“液相色譜-質譜技術臨床應用培訓班”在復旦大學附屬中山醫院獨山廳成功舉辦。本次活動圍繞LC-MS/MS技術在我國臨床檢驗領域的應用，邀請了國內外著名專家教授，向學員們講授了液相色譜-質譜檢測技術的基本理論、平臺建設、開發驗證與質量管理、臨床應用和研究應用進展等方面的知識，共吸引約120名來自國內各大醫院的檢驗人員、相關單位的工作人員參加。

液相色譜-質譜技術臨床應用培訓班

　　上午，復旦大學附屬中山醫院檢驗科主任潘柏申教授出席并致歡迎辭，復旦大學附屬中山醫院檢驗科副主任郭瑋教授主持，來自復旦大學生物醫學研究院常務副院長楊芃原教授、復旦大學化學系丁傳凡教授、克利夫蘭醫療中心臨床生化主任及醫學總監王思合教授共同帶來以“液相色譜-質譜檢測技術的基本理論”為主題的培訓內容。

復旦大學附屬中山醫院檢驗科主任潘柏申

復旦大學附屬中山醫院檢驗科副主任郭瑋

　　復旦大學生物醫學研究院常務副院長楊芃原為學員們帶來了題為《臨床質譜時代的到來--精準蛋白質組和精準分子標志物》的精彩報告。

復旦大學生物醫學研究院常務副院長楊芃原

　　質譜技術是分析化學革命性發展的驅動力。在過去的一百年中，先后有六位質譜學家獲得了諾貝爾獎，他們的工作極大地推動了儀器制造學和分析化學的發展。其中ESI和 MALDI電離方式的發明奠定了今天蛋白質組分析的技術基礎。

　　報告指出過去常用的醫學檢測方法如凝膠電泳成像、ELISA等基于光學的檢測手段成本低廉，但變異系數大、靈敏度有待提高。而新型的基于質譜法的檢測技術具有更好的精確度和靈敏度，目前該技術已經在國內外推廣的項目包括產前篩查（唐氏）、新生兒篩查等小分子的檢測技術，蛋白、多肽和核苷酸的指紋圖譜檢測技術，以及基于抗體富集-信號基團放大的蛋白、抗原檢測技術。

　　復旦大學化學系教授丁傳凡為學員們帶來了題為《LC-MS/MS的基本原理與結構》的精彩報告。

復旦大學化學系教授丁傳凡

　　報告介紹了LC-MS/MS 的基本原理和質譜儀器的結構與原理。LC由流動相和固定相組成，是溶于流動相中的各組分經過固定相時，由于與固定相發生作用（吸附、分配、離子吸引、排阻、親和）的大小、強弱不同，在固定相中滯留時間不同，從而先后從固定相中流出。

　　報告指出，GC-MS是適宜分析小分子、熱穩定性好、能氣化的化合物。一般用電子轟擊方法（EI）電離產生樣品離子，可與標準譜庫對比。LC-MS主要用于難揮發性化合物，極性化合物，熱不穩定化合物的分析測定，特別是大分子量化合物（包括蛋白、多肽、多聚物等）的分析測定。

　　質譜儀器中有幾種用于串級質譜分析的質譜儀器，包括三重四級質譜，四極-飛行時間質譜，FT-ICR MS和Orbitrap MS。其中，FT-ICR MS是利用不同質荷比的離子在一穩定磁場中的回旋運動所產生的與質荷比對應的映像電流推斷其離子種類。

克利夫蘭醫療中心臨床生化主任及醫學總監王思合

　　克利夫蘭醫療中心臨床生化主任及醫學總監王思合為學員們帶來了題為《臨床質譜檢測的人員與設備要求》的精彩報告。

　　王思合介紹了美國臨床實驗室改進修正案（CLIA），該條例對以診斷、預防或疾病治療、健康評估為目的的人血、體液及組織樣品實驗室檢測確立相應質量標準。現行CLIA’88條例于1992年首次公布，1994年開始實行，并于1993年、1995年、2003年先后經修訂。美國醫療保險和醫療補助服務中心（CMS）簽發了“標準和認證：實驗室要求”以實施國會通過的CLIA法規。

　　報告介紹了條例中要求的臨床實驗室中實驗室主任、技術主管、臨床顧問、行政主管、檢測人員、技術人員的資格與職責以及對設備的要求。CLIA’88條例主要管轄對人員有特殊要求的臨床實驗室，臨床質譜實驗室中的工作人員需經過特殊教育及培訓，滿足質譜設備所需的特殊要求以確保檢測質量及員工安全。

　　下午以“液相色譜-質譜檢測技術的平臺建設”為主題的培訓內容中，中國科學院生物物理研究所研究員李巖、美國賓夕法尼亞州立大學Milton S. Hershey醫學中心病理核心參考實驗室副主任朱玉勝、復旦大學生物醫學研究院生物質譜分析高級工程師晏國全、克利夫蘭醫療中心臨床生化主任及醫學總監王思合分別帶來精彩報告。

中國科學院生物物理研究所研究員李巖

　　中國科學院生物物理研究所研究員李巖為學員們帶來了題為《如何選擇LC-MS/MS儀器》的精彩報告。

　　報告介紹了質譜的基本結構，包括進樣系統、生物檢測常用電離源模式、質量分析器（飛行時間分析器/四級桿質量分析器/Orbitrap分析器/離子阱分析器）、檢測器、計算機數據處理系統，其中質量分析器是質譜的核心元件之一，決定了儀器的性能。質譜儀的選擇要以實驗目的為原則，報告介紹了蛋白質定性檢測的儀器選擇，蛋白質定量檢測的儀器選擇，代謝產物定性檢測的儀器選擇，代謝產物定量檢測的儀器選擇。

美國賓夕法尼亞州立大學Milton S. Hershey醫學中心病理核心參考實驗室副主任朱玉勝

　　教授為學員們帶來了題為《液相色譜串聯質譜技術（LC-MS/MS）基本操作》的精彩報告。

　　報告介紹了標本制備，標本檢測（校準、內標、計算、質控）和結果報告。標本制備與萃取是盡可能多地消除干擾，同時最大化地回收分析物。常規的萃取技術包括稀釋進樣、蛋白沉淀、液液萃取（LLE）、固相萃取（SPE）。稀釋進樣常用于尿液、唾液與腦脊液；蛋白沉淀多用于相對高豐度蛋白樣品的萃取以進行LC-MS定量檢測；液液萃取是基于同一物質在兩種互不相容的溶劑中具有不同的溶解度；固相萃取采用固相吸附劑（常包含于萃取柱內）于檢測前純化或濃縮樣品成分。

復旦大學生物醫學研究院生物質譜分析高級工程師晏國全

　　復旦大學生物醫學研究院生物質譜分析高級工程師晏國全為學員們帶來了題為《LC-MS/MS常見故障的原因分析與處理》的精彩報告。晏國全在報告中通過實際案例分析更直觀地表述在實際操作中遇到的故障及原因分析。

　　LC-MS/MS的常見故障包括液相色譜中的硬件故障/色譜柱問題/連接管路等，離子源的噴霧穩定性/硬件故障，質譜系統中的硬件故障/譜圖污染峰/靈敏度等。例如，液相色譜的壓力太高可能是由于色譜柱入口塞子污染、排液閥塞子污染、色譜柱污染、毛細管堵塞特別是進樣針底座毛細管、進樣閥轉子堵塞、進樣針或針底座堵塞等。

　　克利夫蘭醫療中心臨床生化主任及醫學總監王思合在下午的培訓中帶來《LC-MS/MS在臨床小分子定量檢測中的應用》的精彩報告。報告解釋了LC-MS/MS用于患者標本小分子定量檢測的優勢與挑戰，介紹LC-MS/MS能為患者診療帶來的獨特貢獻，并闡述確立患者診療護理LC-MS/MS定量方法的原則。

　　LC-MS/MS具有高特異性、高靈敏度、適用范圍廣、方法靈活、具有信息豐富的檢測結果，可用于新生兒篩查、先天性代謝缺陷、毒理學與藥物濫用、疼痛管理藥物的檢測、治療藥物監測、內分泌激素和蛋白質鑒定及定量。LC-MS/MS也面臨著儀器復雜難以精通、自薦檢測方法的缺乏、通量受限等挑戰。

　　會議間隙，液相色譜-質譜技術臨床應用培訓班演講嘉賓與參會學員舉行了合影。