安捷倫液相色譜儀的常見故障及解決方法

安捷倫液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比

的差異，對混合物進行先分離，而后分析鑒定的儀器。由于安捷倫液相色譜儀

HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用，流出組分易收集

等優點，因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機

分析等各種領域。但是由于人員素質 樣品的性質以及儀器本身等方面的原

因, 常常出現這樣那樣的分析故障嚴重影響了正常的生產分析。所以掌握一種

準確、快速的排除儀器故障的方法非常重要。

安捷倫液相色譜儀的常見故障及解決方法：

1.柱壓高

  可能原因：（1）.緩沖液鹽分如（乙酸銨等）沉積于柱內；

            （2）.樣品污染沉積；

    處理對于第一種情況先用40～50℃的純水，低速正向沖洗柱子，待柱壓

逐漸下降后，相應提高流速沖洗，柱壓大幅度下 降后，用常溫純水沖洗，之

后用純甲醇沖洗柱子30分鐘；對于第二種情況，由樣品的沉積引起污染的C18

柱，和純水反向沖洗柱子，換成甲醇沖洗，接著用甲 醇+異丙醇（4+6）沖洗

柱子，再用換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，最后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分

鐘以上。

2.指示

  可能原因：（1）.泵密封墊圈磨損；

            （2）.大量氣泡進入泵體。

    處理對于第一種情況，更換密封墊圈；對于第二種情況，在泵作用的同

時，用一個50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。

3.不穩定

  原因系統中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物，使得兩者不能密封。

  處理工作中注意觀察流動相的量，保證不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底，避免吸

入空氣，流動相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，

放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。

4.峰分叉

  可能原因：（1）、色譜柱被污染；

            （2）、柱頭填料塌陷；

    處理對于第一種情況，先用純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著

用甲醇+異丙醇（4+6）沖洗柱子（沖洗時間的 長短由樣品污染的情況而

定），再換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，最后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘

以上。如沖洗后依然出峰不佳，則考慮第二種情況。對于第 二種情況，擰開

柱頭，檢查柱填料是否硬結或塌陷。去除硬結部分（污染的填料），裝入新填

料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用與柱內徑相同的頂端平滑的不銹 鋼桿

壓緊，再填平，滴甲醇，再壓緊反復幾次，直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干

凈，擦凈柱外壁的填料，擰緊柱頭，用純甲醇沖洗30分鐘以上。

5.重復性差

  可能原因：（1）、進樣閥漏液；

            （2）、加樣針不到位；

            （3）、液量不足；

    處理對于第一種情況更換進樣閥墊圈；對于第二種情況保證加樣針插到

底，注射樣品溶液后須快速、平穩地從LOAD狀態 轉換到INJECT狀態，以保證

進樣量的準確。日常工作中，液相色譜儀的保養非常重要，注意不要讓空氣進

入輸液系統和高壓泵中，儲液器內的溶液如長時間未 用應清洗儲液器并更換

溶液，每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈，防止無機鹽析出或沉積；

樣品的前處理也很重要，任何樣品都要盡可能地去除雜質，完全溶解，盡量減

少對色譜柱的污染，以延長色譜柱的使用壽命，同時避免注射過濃的樣品溶

液，以免殘留液在進樣閥內析出固體引起堵塞；色譜柱作好標記，用于不同分

析目的的色譜柱不要混用等。