苯甲酸及其鹽類防腐劑的測定

　　一、苯甲酸及其鹽類的測定

　　測定方法： （1） 中和法（堿滴定法）--應用廣泛

　　（2） 紫外分光光度法

　　（3） 薄層層析法

　　（4） 氣象色譜法

　　（5） 高壓液相色譜法

　　（一）中和法

　　1、原理

　　在弱酸條件中，用乙醚將樣品中的苯甲酸提取出來，將乙醚揮發后，用中性酒精或醇醚混合物溶解內容物，用酚酞做指示劑，采用0.1N標準NaOH滴定至終點，然后根據氫氧化鈉消耗的體積計算苯甲酸或苯甲酸鈉的含量。

　　2、試劑

　　3、樣品的處理

　　⑴ 固體或半固體樣品（各種果醬）

　　稱100g樣→與500ml容量瓶中→加200ml水→加AR NaCl直到不溶解為止（降低苯甲酸在水中溶解度）→用10%NaOH調為堿性（這時苯甲酸生成苯甲酸鈉，并以苯甲酸鈉狀態存在）→用飽和NaCl定容500ml→靜置2小時→過濾→棄去初液→收集濾液

　　⑵ 含酒精樣品（各種汽飲料等）

　　取250ml樣→于燒杯中→加10%NaOH呈堿性→置水浴蒸發至100ml（除去C2H5OH）→移入250ml容量瓶→加30gNaCl溶解后→用飽和NaCl定容→放置2小時→過濾→收集濾液

　　⑶ 含多量脂肪樣品

　　于上述制備好的濾液中→加NaOH使之成為堿性→加50ml乙醚提取→靜置分層后→棄去醚層→溶液供測定用

　　4、操作方法

　　吸濾液100ml→于500ml分液漏斗→加1︰1 HCl 5ml酸化→用150ml乙醚分三次提取→每次振蕩不能太激烈以防乳化→合并醚層→連接蒸餾裝置→回收乙醚（50℃水浴）→用10ml中性乙醇+10ml水溶解殘渣→加2滴酚酞→用0.1N NaOH滴出微紅色（同時要求做空白實驗

　　）

　　5、計算

　　苯甲酸含量%=(N·V×0.122/W)×100

　　 = (N·V×0.1441/W)

　　N : 標準氫氧化鈉的濃度

　　V: 標準氫氧化鈉消耗的體積

　　W : 樣品重量

　　0.122 : 1ml0.1N 氫氧化鈉約等于苯甲酸的克數

　　0.1441 : 1ml0.1N 氫氧化鈉約等于苯甲酸鈉的克數

　　采用此方法測苯甲酸及其鹽類最大缺點是：樣品中有其它有機酸時，乙醚萃取時易帶過來，所以此法測定誤差較大。

　　（二）紫外分光光度法

　　1、原理

　　樣品中苯甲酸在酸性溶液中可以用水蒸汽蒸餾的方法蒸餾出來，與樣品中不揮發性成分分離，然后用強酸氧化，使苯甲酸以外的其它有機物氧化分解，氧化后的溶液再次蒸餾，蒸餾液中除苯甲酸外的其它雜質基本都被分解了，根據苯甲酸的吸收波長225nm下測定消光值。

　　樣品中加1ml磷酸經水蒸汽蒸餾，得到的餾液主要是苯甲酸，還有其它酸物，再加入0.2N的K2Cr2O7和4N的H2SO4，將其它酸性物質氧化，再經過蒸餾，得到無雜物的苯甲酸，在225nm下測定。

　　苯甲酸用紫外的原因是甲酸同苯形成p-π共軛體系，適合紫外分光光度儀測定。

　　此實驗要求做空白，空白中不加磷酸，因苯甲酸在堿性溶液中不能被蒸餾出來的特點（樣品+1N NaOH5ml）→蒸餾苯甲酸（g/㎏）= C / W * 1000

　　（三）薄層層析法

　　原理：樣品經過酸化后，用乙醚提取苯甲酸，然后將樣品濃縮，濃縮后點樣于聚酰胺薄層板上，經展開，顯色后，根據比移值與標準比較定性，并進行定量。

　　（四）氣相色譜法

　　原理：用乙醚提取后，采用氫火焰離子檢測器進行分離測定，然后與標準系列比較定量。

　　（五）高壓液相色譜法

　　原理：樣品處理后，注入高效液相色譜儀中，利用被測組分在固定相和移動相中分配系數的不同，使被測組分分離，用紫外檢測器在特定波長下測定被測組分的吸光度，與標準比較定性和定量。