如何選擇合適的多功能酶標儀產品

  這些年，跟著多功用酶標儀在國內各高校試驗室逐步推廣開來，多功用酶標儀品牌和類型也逐步多了起來，亂用漸欲迷人眼。除了三大傳統優勢品牌PE、MD和TECAN，還呈現了許多后來者插足此商場，如收買了芬蘭雷勃的Thermo、從發光發家的Berthold、對于藥篩范疇的BMG以及新式的BioTek等品牌。各品牌都有各自的一個乃至多個系列商品線，特性各不相同，選購時各種技能參數、技能目標令人目不暇接。

這篇文章測驗從用戶實踐運用的視點，討論大概怎么看待花樣繁多的參數特性，希望能協助我們找到真實適宜自個的多功用酶標儀。

一、濾片Vs光柵
多功用酶標儀的分類辦法許多，但zui簡略的莫過于用他們的濾光辦法來作分界線。一般來說，可以分為濾光片型和光柵型兩大類。當然也有一些類型，例如Synergy4和EnVision等，一臺機器里邊一同裝上了濾光片和光柵。可是濾片和光柵并不能一同完結同一個檢測，仍是想用光柵的時分用光柵，該用濾片的時分用濾片；還有一些試驗非用其間一個不行，另一模塊完結不了的。所以這類儀器實質上還僅僅把濾片和光柵放在了一同，并沒有使兩者糅合而發作新的技能打破。
整體來說，濾片技能因為開展已久，合作二向色鏡（其實也即是另一形式的濾光反光濾鏡）等光路體系，可以完結大多數試驗的需求。當前慣例多功用酶標儀中zui高的檢測靈敏度即是用濾光片型做出來的，例如TECAN Infinite F500的熒光檢測的靈敏度可以到達0.04 fmol/孔（熒光素，384孔/80ul）。
可是濾光片型儀器因為受限于濾片的波長和數量約束，不行能滿意日益添加的試驗類型的檢測需求，并且有時需求對物質的吸收、激起和發射光譜進行研討，所以后來就誕生了光柵型的儀器。
zui先推出光柵的是MD公司，其光柵習慣上稱為單光柵。因為光純度的缺乏，在光柵的后邊又參加了一組帶阻濾片，再把雜光過濾一遍，到達了5×10-4的雜光率，根本與樸實的濾光片體系共同。后來TECAN又開展出了雙光柵技能，經過兩次光柵濾光，雜光率降到了10-6。后來，Thermo、BioTek和PE的有些新款儀器等都運用了相似雙光柵技能。因為激起和發射各用了一組雙光柵，此類機器又被稱為四光柵型多功用酶標儀。
光柵型酶標儀的移風易俗，使得用戶在波長挑選上不再受限，并且在雜光率、帶寬操控等功用上還逾越了濾光片體系。例如，TECAN公司在2008年末推出運用了第三代四光柵體系的M1000酶標儀，雜光率降到了2×10-7的新低，還完結了帶寬2.5～20nm接連可調。這些都是當前濾光片型酶標儀所不能或許較難完結的。

二、雜光率&波長精確性
光柵型濾光體系儼然現已變成了當前通用性多功用酶標儀的干流，多家廠家共同努力，現已把光柵技能推到了前史新高。在光柵的許多技能參數之中，zui要害的無疑即是光柵的雜光率和波長挑選的精確性了。
雜光率指得即是光源經過光柵后，得到的光線中，“不需求”的波長的光占所標稱波長的光的份額，表征了濾光的純度。因為光線干與、衍射等的復雜性，無論運用濾光片仍是光柵，雜光都是不行避免的。各種濾光技能的實質即是要想辦法把雜光盡可能地去掉。一般來說，濾光片型的雜光率在10-4～10-5之間，光柵型的可以做到10-6～10-7。因為此類雜光是非特異的，并且會直接進入結尾的檢測器，所以有多少的雜光就會引進多少的隨機差錯。在熒光等檢測進程中，因為檢測器存在擴大效應，雜光率的攪擾也會被指數級擴大。因而，雜光率即是一個濾光體系的首要功用目標。
光柵的另一個重要目標即是波長挑選的精確性。因為許多檢測是依賴于物質在某個波長的特征圖譜。就像DNA/RNA的OD260濃度測定，實踐檢測波長違背260nm幾個nm以上的話，OD值與結尾濃度之間的數學就會發作改動。因而，一組功用優秀的光柵體系，他的波長挑選精確性大概是在±0.5～1nm之間。波長違背過大有時就會影響到結尾成果的精確性。
這兩個可謂是光柵乃至濾光片濾光體系zui要害的技能參數，直接影響到的是得到數據是不是是真實所要丈量的成果，是試驗成果牢靠性的zui根本需求。

三、認證>參數
在確保檢測牢靠的基礎上，不一樣儀器的下一個區別就體現在檢測的靈敏度上面，這時大家關懷的即是儀器可以檢測到多弱的信號。
靈敏度觸及了整個光路體系的描繪和選料，很難說某一個部件會起決定性作用。可是有一點，在各種單功用檢測項目中，光吸收檢測用非擴大型的光電二極管、熒光檢測用光電倍增管、發光檢測用專門描繪的單光子計數光電倍增管，這三種不一樣的檢測器是各自檢測范疇的優先挑選。
各單項檢測的zui優成果都是用相應檢測器完結的。當然也有的儀器出于本錢等思考，用一個檢測器兼容多種檢測形式，這在必定程度上也能完結試驗需求，可是在功用上也會有所獻身折中，無法完結各項檢測都到達zui優化。
關于靈敏度的界說和檢測規范，每個廠家都有各自的描繪，都會說自個是如何如何好，很難有一個直觀的客觀比擬。因而，某些試劑廠家就站了出來，對某些儀器的檢測功用供給一個第三方的認證。
比擬常見的是發光檢測范疇里邊的Promega公司DLReady認證，熒光檢測范疇的Invitrogen公司的LanthaScreen系列認證、Cisbio公司的HTRF認證、BellBrook試驗室的Transcreener認證等等。這些認證首要是對于公司供給的某一類型的需求較高的試劑盒，涵蓋了對檢測儀器的各種功用需求，包含：檢測辦法是不是能用，靈敏度、線性規模、孔間攪擾等是不是滿意需求等等。
若是需求做關聯的試驗，例如做Luciferase發光檢測的就看看儀器是不是有DLReady認證、做TR-FRET的就看看HTRF認證、做FP就看看Transcreener認證，若是機器具有關聯的認證，就可以闡明該機器在必定程度上可以較好地滿意相似檢測的各種需求，遠比單單比擬一個靈敏度參數更能闡明疑問。因為一個試驗能否做好并不是單單一個靈敏度就能表征的。
需求特別注意的是，LanthaScreen是一個系列的認證，涵蓋了FI、FRET、TRF、FP等多個子項目，不一樣儀器所經過的子項目是不一樣的，需求上Invitrogen細心查詢核對。
光柵型的儀器因為新技能近幾年才逐步鼓起，受限于技能研制和儀器本錢，同一個價錢規模內的靈敏度等目標會略差于開展老練的濾光片機器。所以，在中檔多功用酶標儀范疇，拿到了各種認證的光柵型儀器并不多見。而作為新一代光柵型酶標儀的代表作，TECAN M1000現已拿到了悉數上述四種認證，并且在靈敏度等單項功用上也現已逾越了不少的中高端濾片型酶標儀。
這闡明晰光柵型酶標儀的研制又進入了一個新的高度，除了在靈活性上取得了無可代替的作用外，還在檢測靈敏度等方面也逐步代替傳統的濾光片型酶標儀。光柵型是科研范疇多功用酶標儀的將來首要開展趨勢；而濾光片型儀器也正在往單項功用更優的方面改善。

四、比色杯+微量檢測
除了慣例的6～384/1536孔酶標板檢測之外，有些儀器還附帶了比色杯、微量檢測板等的兼容功用。無論是運用立式比色杯、臥式比色杯仍是各種微量檢測板，其意圖都是給光程不固定的酶標板檢測引進一個規范光程的概念。盡管酶標板檢測也能經過光程校對等辦法完結10mm光程OD值的換算，但這僅僅一個數學變換進程，檢測差錯累積較多，實踐運用作用欠安。引進比色杯和微量檢測板后，光吸收的檢測光程就被固定在10mm或許0.5mm等的規范長度，OD值換算愈加簡略和精確。附帶了此類檢測功用的酶標儀，相當于除了自身的多功用酶標檢測之外，還能代替有些分光光度計的功用，使其功用愈加全部，儀器的性價比更高。

五、品牌與售后
不一樣品牌的儀器往往功用側要點有所不必。例如，PE公司因為在試劑范疇有較深見識，他們的酶標儀在合作運用他們的TRF系列檢測試劑盒上作了多項優化，因而PE的酶標儀遍及來說在TRF范疇會有較多的特征功用和相對較高的功用目標。而像TECAN，就把研制的要點放在了四光柵的研討方面，這些年相繼推出了第二和第三代光柵型多功用酶標儀（M200、M1000），變成四光柵酶標儀范疇的領頭羊。而像多功用酶標儀上參加比色杯、微量檢測板等功用也是TECAN從用戶視點思考作出的技能創新，后來此類技能都變成了Thermo、BioTek等品牌紛繁效法的目標。
結尾，無論是一臺多好的酶標儀，脫離了杰出的售后服務體系也是難以正常運作的。本年，各家廠商都在中國國內設立了辦事處乃至亞太區總部，有些商品還專門研制了中文版的軟件和闡明書。這都闡明晰廠家對中國商場的注重。而正因為這種注重，無論是廠家直銷仍是挑選署理分銷，都會對國內的售后服務提出各自的需求和希望，zui根本的即是遍及儀器的使用工程師和維修工程師網絡體系。
可以說，國內的各大城市里邊，根本現已做到了有些品牌總有一個工程師在你身邊。選購之前多與工程師溝通，充沛知道各家的功用專長和售后狀況，重復比照，總能找到zui適合自個需求的一款多功用酶標儀。