血液分析儀臨床應用的體會

　　1 血液分析儀的概述
　　1.1 一般定義：血液分析儀，臨床又稱血細胞分析儀、血球分析儀、血液細胞分析儀、血球計數儀。不僅在世界各地，而且在我國各級醫院都得到了普及應用。它不但提高了實驗結果的準確性，還提供了許多實驗指標，對疾病的診斷和鑒別診斷起了重要的作用。
　　1.2 功能范圍:血液分析儀是醫院臨床檢驗應用非常廣泛的儀器之一，血液檢驗是指血常規檢查，最早是手工操作、顯微鏡下計數的，它包括紅細胞、血紅蛋白、白細胞計數及其分類、血小板計數等，共有10來個項目。做一個病人的血常規檢驗最熟練、最快速也要10來分鐘。
　　2 血液分析儀的臨床檢查
　　2.1 檢查正常值:正常范圍如下表1：
　　2.2 臨床檢查:隨著醫學科學技術的不斷發展，自動血液分析儀出現，采用如鞘流技術、激光技術等先進的技術，使得數據和結果更加精確。使用自動血液分析儀能快速檢測多份標本，且一次能提供多項檢測指標。例如：①白細胞計數。紅細胞計數、血紅蛋白量、血小板計數及白細胞分類參見上述相應的血液檢查。②紅細胞比容：由紅細胞平均體積×紅細胞計數的結果得到。③紅細胞分布寬度：代表紅細胞大小的一致程度。當紅細胞大小不均時，紅細胞分布寬度值增大，如各類型營養缺乏性貧血。④紅細胞三個平均指數用于貧血類型的鑒別。紅細胞平均血紅蛋白量：升高見于巨幼紅細胞性貧血，降低見于缺鐵性貧血、慢性失血性貧血、尿毒癥、慢性炎癥。紅細胞平均體積：增大見于溶血性貧血、巨幼細胞性貧血；降低見于嚴重缺鐵性貧血、遺傳性球形紅細胞增多癥。紅細胞平均血紅蛋白濃度：降低見于慢性失血性貧血、缺鐵性貧血；多種疾病均可在正常范圍。，巨幼細胞貧血，紅細胞平均體積增大，紅細胞平均血紅蛋白量增大，紅細胞平均血紅蛋白濃度正常，紅細胞分布寬度增大。⑤血小板平均體積：平均每一個血小板的體積，血小板的大小與其功能有關。增高：見于原發性血小板減少性紫癜、妊娠后期伴浮腫和蛋白尿者。減低：見于非免疫性血小板破壞、再生障礙性貧血、血小板減少反復感染綜合征、慢性粒細胞白血病等。
　　3 標本采集
　　血液標本盡可能用靜脈血，少數不易取靜脈血者如嬰兒、大面積燒傷患者等可采用末梢血，末梢血以指尖血為宜，盡量不用耳垂血。采血前被檢查者應處于平靜狀態，劇烈運動后應靜息30分鐘后采血。①抗凝劑：使用K2-EDTA，含量為1.5～2.2mg/ml；②容器：采用密封式的塑料或經硅化的玻璃容器。采血過程壓脈帶不要太緊，束臂時間不超過2分鐘，采血過程順利，采血后先拔除針頭，然后將血液徐徐注入試管中，輕輕顛倒混勻，避免產生泡沫。采血后放置15分鐘測定，放置24小時內PLT、WBC、Hb、HCT、RBC保持穩定。
　　4 儀器校準
　　4.1 校準物
　　4.1.1 校準物的選擇:一是來自本儀器的配套校準物；二是來自新鮮人血，但定值要求直接或間接地溯源至國際標準。對于使用無配套校準物檢測系統的實驗室，必須使用新鮮血進行儀器校準。
　　4.1.2 新鮮血作為校準物的定值
　　（1）直接溯源至國際標準的定值方法：可使用血細胞分析的參考方法定，但要求建立參考方法的難度較大，在臨床實驗室難以實施。（2）間接溯源至國際標準的定值方法：取新鮮血用二級標準檢測系統或規范操縱的檢測系統對其進行定值，用定值的新鮮血作為常規校準物。要求在8小時內（溫度條件為18℃-25℃）完成定值及儀器的校準。二級標準檢測系統：直接溯源至參考方法；具備較完善的質量保證措施；與國外具有權威性的參考實驗室定期進行比對的檢測系統。規范操縱的檢測系統：使用配套試劑；用配套校準物定期進行儀器校準；規范地開展室內質量控制；參加室間質量評價成績優良；職員經過培訓。
　　4.2 校準方法
　　4.2.1 儀器的預備:先用清潔劑對儀器內部各通道及測試室處理30分鐘。確認儀器的背景計數、精密度及攜帶污染在說明書規定的范圍內時，才可進行校準，否則須查找原因，必要時請維修職員進行檢驗。
　　4.2.2 校準物的預備
　　（1）使用制造商提供的配套校準物:①將校準物從冰箱內（2-8℃）取出后，要求在室溫（18-25℃）條件下放置15分鐘，使其溫度恢復至室溫。②檢查校準物是否超出效期，是否有變質或污染。③輕輕地將校準物反復顛倒混勻，并置于兩手掌間慢慢搓動，使校準物充分混勻。④打開瓶塞時，應墊上紗布或軟紙，使濺出的血液被吸收。⑤將兩瓶校準物合在一起，混勻后再分裝于2個瓶內。（2）使用新鮮血作為校準物時：①用EDTA?K2為抗凝劑的真空采血管取健康人新鮮血10ml，每ml血需抗凝劑的濃度為1.5-2.2mg。要求新鮮血的Hb、WBC、RBC、Hct和Plt檢測結果在參考范圍內。將新鮮血混勻后分裝于3個管內，每管的血量為3ml。②取其中1管，用二級標準檢測系統或規范操縱的檢測系統連續檢測11次，計算第2-11次檢測結果的均值，以此均值為新鮮血的定值。③其他2管新鮮血作為定值的校準物，用于儀器的校準。
　　4.2.3 對校準物進行檢測:取1瓶校準物，連續檢測11次，第1次檢測結果不用，以防止攜帶污染。儀器若無自動校準的功能，則將第2-11次的各項檢測結果用手工記錄在工作表格中，計算出均值，均值的小數點后數字保存位數較日常報告結果多一位。有自動校準功能的儀器可直接得出均值。
　　4.2.4 用上述均值與校準物定值比較以判別是否需要調整儀器:計算各參數的均值與定值相差的百分數（不計正負號），計算公式：（均值-定值）/定值×100%，與標準進行比較。各參數均值與定值的差異全部即是或小于表中的第一列數值時，儀器不需進行高速記錄檢測數據即可；若各參數均值與定值的差異大于表中的第二列數值時，需請維修職員核查原因并進行處理；若各參數均值與定值的差異在表中第一列與第二列數值之間時，需對儀器進行調整，調整方法可按說明書的要求進行。若儀器無自動校準功能，則將定值除以所測均值，求出校準系數，將儀器原來的系數乘以校準系數即為校準后的系數，將校準后的系數辦事進儀器更換原來的系數。

　　4.2.5 校準結果的驗證:將第2管未用的校準物充分混勻，在儀器上重得檢測11次，往除第1次結果，計算第2-11次檢測結果的均值，再次與表中的數值對照。如各參數的差異全部即是或小于第一列數值，證實校準合格。如達不到要求，須請維修職員進行檢驗。

　　血液分析儀進行校準后，必須開展室內質量控制以監測儀器的檢測結果是否發生漂移。
　　5 應用體會
　　5.1 不能一味依賴儀器:經過本文幾年來的操作使用和實驗總結認為，儀器上一些固有的產生誤差的因素還沒有徹底解決，某些影響儀器、計數準確性的個別因素還存在，或某些儀器具有設計上的缺陷和應用上的局限性，所以，無論是細胞計數還是多種參數的分析結果都會有問題出現。不能一味依賴儀器，要認真對待每個實驗樣品和結果，分析判斷這個結果，檢驗工作者要對儀器的性能、質量控制、局限性、常出現的故障，特別對三分群的直方圖和五分類的散點圖有深刻的了解，善于發現問題和解決問題。
　　5.2 不斷提高形態學檢驗水平:筆者深刻體會到，手工細胞形態學檢驗的金標準是任何一臺先進的自動血液分析儀都不能完全取代的。檢驗人員應知道細胞形態學檢驗是最簡便實用的檢驗方法，也是每個檢驗人員所要掌握的最基本技能，是常規血液學檢驗的重要項目，是血液病的基礎診斷，充分認識外周血細胞形態檢驗的重要性，在一些疾病診斷中發揮著不可替代的作用。應建立嚴格的血涂片制作、細胞染色操作規程，通過常年的訓練和積累，熟練掌握，練下扎實的顯微鏡下細胞形態學基本功，細胞形態學質量的高低是許多疾病尤其是血液病的預防、診斷、鑒別診斷等的關鍵。每一位檢驗人員不僅要熟練掌握顯微鏡下外周血正常細胞形態，還要掌握紅細胞、白細胞、血小板系細胞的正常形態及其異常形態的基礎知識和臨床意義，在檢驗報告中不僅要給出準確地計數結果，還應有細胞形態學描述，掌握相關的臨床知識，為臨床提供有價值的檢驗結果。
　　總之，通過熟練掌握儀器的性能和不斷提高自己的知識水平，通過扎實的顯微鏡下對血細胞形態學認識和臨床檢驗學的基本功來解決問題，做到人機結合，科學使用、精準判斷，這樣才能得出最切近的結果。