血細胞分析儀因其操作簡便、快速、精密度高、結果計數準確，已逐漸成為臨床實驗室的主要檢測手段，其檢測結果的準確性直接影響患者的診斷和治療。在我國，同一實驗室同時使用不同廠家或同一廠家不同生產型號的血細胞分析儀的現象普遍存在，如果采用各儀器配套校準品進行儀器校準，可能會出現同一血樣標本在同一實驗室的不同儀器上檢測出的結果不一致，給臨川診斷帶來不確定，妨礙了疾病診斷。我科采用新鮮全血作為校準物，對本實驗室內的3臺血細胞儀進行校準和評價，效果滿意。現將相關情況報道如下。
1 材料和方法
1.1 標本來源
選取我院住正常體檢者的乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）抗凝全血，白細胞（WBC）、紅細胞（RBC）、血紅蛋白（Hb）及血小板（PLT）4個項目分為高、中、低值標本各10份。
1.2 儀器與試劑 2臺美國COULTER AC Tbiff2血液分析儀及配套試劑和質控物，1臺日本SYSMEX公司的KX-2l血液分析儀及進口配套試劑、校準品和質控物。EDTA-K2真空抗凝管（浙江生產，批號20090520，有效期201105）。
1.3 方法
1.3.1 校準前的準備 對儀器的操作步驟熟練，所校準的儀器內部通道及時清洗，背景計數和攜帶污染率符合質控要求。
1.3.2 標本的采集 隨機抽取成年健康體檢者新鮮全血標本10份，每份標本在每臺血細胞儀上檢測11次，取第2-11次的平均值作為測定結果。每份標本取總量30ml，分別保存于3個EDTA-K2真空抗凝管內，分別用于儀器的定值、校準和校準后驗證。保證標本采集后2小時內完成檢測。進入校準的標本應滿足WBC（4.0-10.0）×109／L，RBC（3.5-5.5）×1012／L ，Hb 100-170 g／L，PLT(100～300)×109／L。
1.3.3 參考比對儀器的確定與新鮮全血標本的定值 根據儀器精密度、參加衛生部室間質評成績確定KX-2l為參考比對儀器，其他為測試儀器。用配套校準品對參考儀器KX-2l進行嚴格校準。取第1支抗凝管內新鮮全血在KX-2lN上連續檢測11次，去除第1次的結果，計算第2-11次結果的均值作為參數的靶值。
1.3.4 比對儀器的校準
取第2支抗凝管內新鮮全血按高、中、低值對兩臺待測血細胞分析儀進行校準。以1988年美國臨床實驗室改進修正案為參照，按照允許誤差范圍的1/4來確認這3臺血細胞分析儀的相對偏差，即按以下標準判斷待測儀器是否需要校準：WBC≤3.75%，RBC≤1.50%，Hb≤1.75%，PLT≤6.25%。若待測儀器與參考儀器檢測結果偏差小于上述參數范圍，且相關系數γ＞0.95，說明這3臺儀器檢測結果一致性較好，不必更改校正系數；若偏差超出上述偏差范圍，則應以參考儀器對新鮮全血進行定值后校準待測儀器，將新的校準系數（新校準系數=原校準系數×靶值/儀器檢測值）輸入儀器替換原校準系數即可；若偏差大于上訴參數的10%（PLT偏差可＞15%）時，則需請廠商維修人員進行原因檢查和處理。
1.3.5 校準結果的驗證
取第3支抗凝管內的新鮮全血，在兩臺待測血細胞儀上嚴格按儀器操作規程連續檢測11此，分別計算第2～11次結果的均值及其與靶值的偏差，觀察是否在校準判斷標準以內，若不在此范圍內，應繼續調整。
1.3.6 校準后的處理
每月對3臺血細胞儀進行重新保養、維護、校準及比對試驗。注意儀器是否存在偶然誤差或系統誤差，偶然誤差應及時查明原因，系統誤差應重新進行上述比對校準試驗，調整校準系數。
1.3.7 統計學分析
用spssl3.0統計軟件對數據進行統計學處理和相關系數分析。檢驗水準為α=0.05。
2 結果
2.1 三臺血細胞分析儀校準前測定新鮮全血的變異系數，儀器重復性很好，符合校準條件。
2.2 通過對KX-2l血細胞分析儀定值，并把所定值作為靶值。將新鮮全血在其他兩臺待測血細胞儀上進行結果測定，其與靶值的偏差，計算新的替換校準系數。
2.3 待測血細胞儀更換為新的校準系數后，檢測其與靶值的偏差并確定各項參數的測定結果。
3討論
隨著醫療技術和水平的發展，各種醫療檢測儀器不斷進入臨床，為臨川診斷和治療提供了科學依據和指導思路。其中血細胞分析儀的出現給血液常規檢查帶來了革命性的變化，特別是近年來推出的各種新型全自動分析儀，無論是檢測結果的準確度還是精密度都有很大的提高。但是，血細胞分析儀是否能提供準確、可靠的檢測結果關鍵在于該儀器的校準。絕大多數的質控物和校準物為進口產品，價格昂貴，不便于普遍使用，導致在同一實驗室內同一標本若用不同儀器分析，出現測定值的差異。這些差異除了儀器本身的性能，更重要的在于校準方法正確與否。
根據國際血液學標準化委員會的文件要求，血細胞分析儀的檢測結果只有溯源國際標準參考方法，才能保證其準確性。但考慮到成效比及絕大多數實驗室不具備國家認可的參考實驗室條件，無法用參考方法直接給新鮮全血定值，從而轉向采用間接溯源至國際標準的方法定值，即可溯源的檢測系統定值。目前臨床對用新鮮全血作為校準物進行室內和室間質評進行了相關有益的嘗試，取得了良好效果。本實驗應用新鮮全血對我室3臺血細胞分析儀進行校準，結果表明，校準調整后各研究參數與參比儀器具有相當的可比性，之后通過對日常選取的高、中、低值標本進行比對試驗，能夠很好地監控儀器的穩定性及結果的準確度，且這種方式經濟實用，易于操作，值得在中、小型實驗室推廣。
總之，EDTA-K2抗凝的新鮮全血可代替標準方法測定全血細胞質控物來校準多通道血細胞分析儀，保證其測定結果準確性。而每天以新鮮全血對血細胞分析儀進行質控是了解各儀器測定結果間精密度的有效措施，及時避免系統誤差的發生，保證室內多臺血細胞分析儀測定結果的準確性，使科室內的不同儀器測定結果具有了可比性。