隨著檢驗醫學的快速發展,全血細胞分析自動化已得到廣泛普及,全區各醫院檢驗科大多采用全自動血細胞分析儀進行全血細胞分析。自動血液分析儀是一種比較儀器,必須用定值非常準確的校準物、合乎規范的校準方法,才能使儀器測得的結果接近標本的實際結果。一臺好的儀器,若不注意質控和校準,往往會因誤差過大而降低使用價值,并給臨床診治帶來不良的影響。由于各醫院使用的儀器型號、人員配備、標本量、經濟水平等方面的情況有較大差異,如何選擇適合自己實驗室的室內質控方法對于保證檢驗結果的可靠性尤其重要。本文介紹幾種常用的質控方法,各實驗室可根據各自情況選用其中一種或多種聯合使用。
1 定值質控物法
使用定值質控物能同時監測精密度和準確度,及時指示誤差的大小和類型,操作簡便、應用及時、形象直觀,是目前各實驗室最常使用的質控方法。但必須強調,此定值質控物必須經國家血液學參考實驗室定值。具體做法如下:
1.1靶值線的確定
以測定結果為縱坐標,測定日期為橫坐標,首先在縱軸上居中位置定為靶值(T),從此點作出一條與橫軸平行的直線稱為靶值線,然后分別在縱軸上定出允許誤差的警告界限和最大允許界限的上下界限值四個點,作出四條平行于靶值線的直線,分別稱為警告線和最大允許線。
1.2 四個界限點的確定方法
不同的測定項目其警告界限和最大允許界限的確定是不同的。血紅蛋白、紅細胞、白細胞和血小板測定項目可按表1所列的數值范圍來確定界限點。
1.3 測定結果的判斷
因已有定值,故不需要實驗室連續測定進行定值,但首先要用定值質控物校準儀器,使儀器的測定值與靶值一致。如條件允許,每天應在病人標本檢測前和檢測中各測定一次定值質控物,以兩次測定的均值點在質控圖的相應位置上。也可只在病人標本檢測前檢測一次。定值質控物質控圖,全部測定值都應落在最大允許線內,如有任何測定值超出警告線而仍在最大允許線內,這些標本的測定結果仍然有效,但表明誤差較大,應仔細檢查定值質控物、試劑、儀器讀數及標本量。如測定均值超出最大允許線,則表示失控,該批測定結果無效,應查明產生誤差的原因,予以消除后重新測定。
2 浮動均值法
天然全血質控物的不足之處主要是成本較高,有效期較短;而人工顆粒應用范圍有一定限制。這些因素限制了血細胞計數儀室內質控在一些實驗室的開展。對于此類實驗室,用浮動均值法進行室內質控可以取得不錯的效果。
浮動均值法(XB法)又稱Bull法,1974年由Bull根據Dorsey的基本原理建立,其依據是即使是病人(不包括血液疾病患者),包含一定數量個體的樣本的均值其分布通常也符合正態分布,因此也適用于統計學質控規則。對這些均值變動加以監測,就可以在沒有特別質控物的情況下,對儀器工作狀態加以質控。用XB法可對白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、紅細胞平均體積(MCV)、紅細胞平均血紅蛋白量(MCH)、紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)、血小板(PLT)、血小板平均容積(MPV)等指標進行質控。目前常用的SYSMEX和Coulter系列血細胞分析帶有XB質控程序,也可自行手工制作質控圖。以MCV、MCH和MCHC為例,其具體做法是:
2.1 儀器的校正
以參考定值液對儀器進行校正,校正前后應檢測質控物,以確定校正有效。
2.2質控均值的確定
MCV、MCH和MCHC在人群中變動極小,國外推薦的是MCV 89.5 fl;MCH 30.5 pg;MCHC 34 g/dl。國內未進行相關的研究,但一般認為此均值也適用于中國人群。其他指標如PLT、WBC可自行測定均值:每天從標本測定結果數據庫中隨機抽取20例測定結果,計算平均值(X)和標準差(S),并按統計規律剔除超過±3S的離群值,共進行30 d。 將30個每天均值再計算總均值(X總)和總標準差(S總),并將此X總作為XB分析的“靶值”。
2.3質控界限的確定
根據國內外文獻報道,以(均值±3%)作為質控界限較適合于臨床應用。
2.4 輸入病人標本結果
以連續檢測的20份標本為一組,計算各指標的均值,填入相應的XB質控圖中。帶有XB質控程序的儀器隨著每20份一批標本測定完畢,即可自動提示其監測結果。
2.5 失控規則
Ⅰ類失控(須立即檢查原因和處理失控):①一次XB值超出3%或2S;②任一項指標一天內5次XB值超出2%。Ⅱ類失控(警戒性失控,可在當天內處理):①連續5次以上位于均值一側;②任一項指標一天內3次XB值超出2%。
浮動均值法不需購置質控物,其顯著優點是經濟、方便,如能與質控物檢測法結合使用,既可節省質控成本,又可達到很好的質控效果。
3 核對試驗法
每天隨機取任一患者抗凝靜脈血做標準物連續測定5次,求出均值及標準差,封閉保存于室內。根據當天標本量大小,定時或不定時核對一天中的結果,也可保存于冰箱,第2天再次測定核對結果。均值相差不得大于2S。此項試驗是選用隨機患者標本,只做當天記錄不需繪制質控圖。該方法簡單易行,如能肯定標本儲存過程中無變質,也可發現儀器、試劑方面出現的一些問題。
血細胞分析是臨床醫學檢驗中應用最為廣泛的檢測項目之一,對臨床診治有重要參考價值。做好每天的室內質控是保證檢驗質量的基礎。除了選擇適當的質控方法,加強人員培訓、建立嚴格的實驗室規范也是必不可少的。此外,室內質控只能保證實驗的精密度,即保證儀器的測定值保持穩定,不能解決由于校準不正確或有系統誤差引起的不準確性。因此,還應定期參加室間質量評價活動,以確保實驗的準確性。