兩臺生化分析儀多項目測定結果比對分析和偏倚評估

　　目前, 各類全自動生化分析儀廣泛應用于臨床,往往同一醫院會采用不同的儀器、方法檢測相同項目,以滿足不同功能分區的需求。由不同的儀器、試劑、校準品及質控品所構成的檢測系統其結果是不完全一致的,但這樣的結果勢必影響到臨床判斷及對患者病情變化的監測。因此,定期對不同檢測系統進行測定結果的比對,以確保結果的可比性是目前檢驗醫學界關注的熱點。本研究按照美國國家臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)的EP9-A2文件[1]的要求, 對本實驗室HITACHI7600-020和BS-380兩臺全自動生化分析儀測定血清中的鉀離子(K+)、鈉離子 (Na+)、氯離子(Cl-) 、葡萄糖(Glu)、肌酐(Crea)、尿素氮(Bun)等多個項目,并對各項目的檢測結果進行比對分析和偏倚評估,從而探討不同檢測系統間對同一檢測項目的測定結果是否具有可比性,為判斷臨床的可接受性提供依據。 
　　1材料和方法 
　　1.1材料 
　　1.1.1檢測系統的組成 本實驗根據不同的儀器、試劑、校準品、質控品分為2個檢測系統: 
　　檢測系統1(X):HITACHI7600-020全自動生化分析儀,K+、Na+、Cl-使用日立原裝試劑,Glu、Bun使用上海科華公司試劑,Crea使用北京中山生物公司試劑,K+、Na+、Cl-使用日立原裝校準品,Bun、Crea、Glu使用貝克曼的標準品,RANDOX質控品。 
　　檢測系統2(Y):BS-380全自動生化分析儀,邁瑞原裝試劑及配套校準品,RANDOX質控品。 
　　1.1.2標本 采集麻城市人民醫院門診及住院患者當日無溶血、無黃疸的新鮮血清,其濃度選擇符合EP9-A2文件數據分布建議表1a、1b的要求。 
　　1.2方法 
　　1.2.1參比方法(X)與實驗方法(Y)因HITACHI7600-020生化分析儀構成的檢測系統參加全省室間質評成績優秀,室內質控日間CV均小于1/3CLIA′88允許誤差,故以其作為參比方法。BS-380生化分析儀所構成的檢測系統作為實驗方法。 
　　1.2.2樣本測定。每天收集8份新鮮患者血清,每份樣本都用實驗方法和參比方法進行雙份測定。測定時先對實驗樣本排序,每組樣本按順序1至8測定第一次,再按順序8至1測定第二次。對于同一樣本,應在2小時內用實驗方法和參比方法完成測定。連續5天,共40份樣本。 
　　1.2.3方法內及方法間離群值檢查 按EP9-A2文件進行方法內及方法間離群值檢查。 
　　1.2.4作圖散點圖1: Y軸為實驗方法每樣本雙份測定的均值(Yi); X軸為參比方法每樣本雙份測定的均值(Xi)。散點圖2:Y軸為實驗方法每樣本雙份測定值(Yij);X軸為參比方法每樣本雙份測定的均值(Xi)。偏倚圖1: Y軸為(Yi-Xi);X軸為(Yi+Xi)/2, 以直線X = 0作為水平中線作圖。偏倚圖2:Y軸為Yij-(Yi+Xi)/2;X軸為(Yi+Xi)/2。 

　　1.2.5參比方法(X)測定范圍的檢驗參比方法的測定范圍是否合適,可用相關系數r做粗略估計,如r≥0.975 (或r2≥0. 95) , 則認為X的分析范圍合適。若r<0.975,則使用分部個別差異法計算平均偏倚。 
　　1.2.6計算線性回歸方程實驗方法 Y = bX + a 
　　1.2.7計算預期偏倚及其95%的置信區間 計算所測項目在給定醫學決定水平(Xc)處的預期偏倚()、預期偏倚95%的置信區間。然后以CLIA′88規定的室間質量評價允許誤差范圍[2]的1/4作為依據,判斷兩檢測系統結果偏倚是否可接受。 
　　1.2.8 實驗所得數據均使用Excel 2007進行分析處理。 
　　2結果 
　　2.1 方法內及方法間的離群值 K+、Na+均有1個離群值,未超過樣本總數的2.5%,刪除離群值,重新測定一組替代離群數據。其余項目無方法內的離群值。兩方法間測定結果無離群點。 
　　2.2作圖散點圖, 偏倚圖(以Glu為例)(見圖一) 
　　2.3參比方法測定范圍由表1可見,本實驗測定K+、Na+、Cl-、Bun、Crea、Glu的相關系數r均大于0.975, 說明兩檢測系統測定的物質濃度達到了足夠的寬度,分布范圍合適。 
　　2.4直線回歸分析 各項目的斜率a,截距b 及線性回歸方程(見表1)。 
　　2.5在給定醫學決定水平上的預期偏差及置信區間 由表2可見,K+、Na+、Bun、Crea、Glu的預期偏倚符合1/4CLIA′88規定的允許誤差范圍的標準,Cl-在其醫學決定水平上的偏差未達到了1/4 CLIA′88的標準。(見表2) 
　　2.6系數調整Cl-在醫學決定水平上的偏差未不可接受,但其相關良好(r=0.9843),故可通過系數調整使兩檢測系統的結果一致。在CX9上加上系數:斜率=0.9807,截距=-0.731。系數調整后,按照原先方法重新測定40份標本,得到的結果(見表3)。 
　　3討論 
　　3.1檢測系統是指完成一個檢驗項目所涉及的儀器、試劑、校準品、質控品、檢驗程序、保養計劃等的組合。目前國內儀器、試劑產品眾多,不同醫院或同一個醫院不同的功能分區往往會有不同的檢測系統。比如我們醫院常規生化室所用的是HITACHI7600-020生化分析儀,而急診生化室用的是BS-380生化分析儀,這就需要對儀器進行結果比對,以保證患者在不同儀器測定的結果具有可比性和連續性。 
　　3.2EP9-A2(2002)與EP9-A(1995)[4]不同之處在于EP9-A2文件通過計算預期偏倚95%的置信區間,并判斷95%的置信區間與可接受誤差的關系,替代了EP9-A文件中的相對偏倚(在Xc濃度上偏倚的百分比)來判斷偏倚是否可接受。從95%的置信區間的計算公式: 
　　可以看出,置信區間范圍分布的寬度跟標準誤(Sy.x)的計算密切相關,標準誤是殘差的標準差,表示測定數據點與回歸方程的離散程度,一定程度上與兩系統測定該項目的標準差有關。由此可見新版文件95%的置信區間的計算方法不僅涉及兩系統間的準確度,同時兩系統各自的精密度最后也影響到該區間的分布,這樣比EP9-A文件僅以相對偏倚來判斷偏倚是否可以接受顯得更為科學及合理。 
　　3.3預期偏倚()的計算:= a +(b-l)Xc,95%的置信區間(在Xc的真正偏倚)的計算: 
　　將預期偏倚的置信區間與給定水平濃度處的允許誤差相比較,允許誤差>預期偏倚的置信區間上限,實驗方法可接受; 預期偏倚的置信區間上限>允許誤差>預期偏差的置信區間下限,實驗方法與參比方法相當; 允許誤差<預期偏倚的置信區間下限,實驗方法不可接受。 
　　3.4本實驗中HITACHI7600-020全自動生化分析儀K+、Na+、Cl-測定使用的是日立原裝試劑、配套的標準品,其檢測結果具有可溯源性依據。其工作狀態良好,儀器較新,日常工作精密度好,而且參加全省室間質評成績優異,故選擇這臺儀器作為參比儀器。由表1可以見,K+、Na+、Cl-、Bun、Crea、Glu等項目的相關系數均大于0.975,說明兩檢測系統測定的數據分布范圍合適,用作回歸統計的斜率、截距可靠,可以用醫學決定水平處的預期偏倚來評估方法間是否具有可比性。本實驗用檢測項目各自醫學決定水平處的值計算預期偏倚及其95%的置信區間,然后與CLIA′88規定的室間質量評價允許誤差范圍的1/4作比較來判斷臨床可接受性能。由表2可見,除了Cl- 外,各項目的預期偏倚均符合1/4CLIA′88規定的室間質量評價允許誤差范圍的標準,表明各檢測項目(Cl-除外)在兩系統間的測定結果可比性良好。Cl-在90mmol/L 、110mmol/L的醫學決定水平上的偏差未達到了1/4 CLIA′88的標準;說明該項目的實驗方法不被接受,需要做出調整。Cl-經系數調整后,按照原先方法重新測定40份標本,得到相關系數r=0.9803,在90mmol/L 、110mmol/L的醫學決定水平上的預期偏差分別為1.162、0.764,其95%的置信區間分別為0.672-1.651、0.617-1.123,符合1/4 CLIA′88的標準,結果可接受,可以將系數保留在儀器上。