性 能 特 點
對于動物醫院和診所來說,能夠在自己的醫院或診所立刻進行動物專用血常規化驗有很大的好處。
益處包括:
□提高工作效率
在化驗血常規的過程中,正確處理樣本對測試結果有著重要的影響。如發現樣本有問題時,可馬上再次抽取樣本重新測試,避免送出血樣本到外面的化驗所時,才被發現樣本出現問題而耽誤時間。
□提升測試準確度
若要得出準確結果,新鮮取得的全血樣本應在4小時內進行血常規化驗檢查(越早越好)。這樣避免了樣本送往外面的化驗所時,因時間過長而引至血樣退化或變質,導致錯誤結果。
□提高經濟效益
為診斷和治療提供及時的信息,能立刻、全面地解答顧客的疑問,以專業的素質吸引高端顧客。
整體來說,血液化驗本身就存在很多挑戰。除了需要正確的樣本處理和維護儀器之外,如何證實各種儀器檢測的準確度亦是一個難題。
血常規化驗(CBC)公認的"黃金標準"技術包括繁重的手工操作,而且需要相當有經驗的技術人員才能獲得最精確的結果。白細胞(WBC)分類,恐怕是血細胞分析中最難的問題,在察看一張血片時,即使是一個經驗豐富的顯微鏡技術人員,通常的結果誤差也高達10%。
人工察看顯微鏡片時,在大量的細胞里進行手工分類也是受限制的。一般來講,手工僅會計算100個白細胞,而美國愛貝斯( Abaxis ) HMII全自動血細胞分析儀能計算成千上萬個白細胞,準確和代表性亦大大提高。
察看顯微鏡玻片時,經驗豐富的技術人員才有較高的準確性,且可辨認出很多有關臨床的"主觀性":細胞群的存在(未成熟中性粒細胞常被自動分析儀當作單核細胞),向左/向右移位(如中性粒細胞),有核紅細胞(在紅細胞溶解后出現,被當作白細胞),未成熟的和病理細胞(經常被錯誤歸類),準確的紅細胞形態,充足的血小板(特別是在貓的血樣里經常見到巨大和凝集的血小板),等等。
盡管專家和行業內都一致推薦在鑒定和確認時察看顯微鏡片,特別是對于病情嚴重的動物,但在今天繁忙的動物診所里的確很需要一臺又準確、又方便、又可靠的全自動動物專用血細胞分析儀。
以下內容介紹了現存的各種各樣的血常規化驗方法,以及動物血樣的獨特性為什么會使得人用或不符合動物規格的所謂全自動檢測儀的精確性受到挑戰。
簡單地說,定性白細胞方法(如美國IDEXX的QBC)使用專門的毛細管和染色,以細胞平均大小為基礎來估計血細胞數(因此,稱為"定性")。因為并沒有真正進行細胞計數,對于正常、健康的動物,獸醫師們還能期待有相對準確的結果,但對于生病的動物,檢測結果是完全不可靠的。
電阻法和激光流式細胞測量法是兩種比較成熟的自動檢測血細胞的方法。而一些制造商已成功地融合了這兩種技術于同一血細胞分析儀上,但到目前為止這種融合的技術(如Advia 60,Cell-Dyn 3500 )還沒有應用在一臺動物血細胞分析儀上。
電阻技術,或所謂的"犁刀法"的工作原理是:當不帶電的血細胞通過一個充了電的圓孔時,會產生一次"脈沖"。在某段時間內一定量的血液里所測到的脈沖數即是細胞計數。測試時細胞導電性(強弱及密集程度)下降與細胞量成正比。對細胞大小的識別能力,以及對各種溶細胞素溶液的敏感性,區分開了基本的細胞類型(紅細胞,白細胞,血小板)。
美國愛貝斯( Abaxis ) HMII分析儀擁有正確的校準并已取得各種不同種類的動物驗證,這二點為電阻法提供了非常可靠的細胞計數,血紅蛋白值和相關指標結果。白細胞分類的精確度取決于儀器的設計和專利的計數規則系統( proprietary algorithms )。因為電阻法通過兩種方法將細胞分類:
1) 對溶血素的敏感性
2)對細胞大小的敏感性
溶血這一步所用的時間和量(次數的調度),都對能否得到可靠的分類結果起到至關重要的作用。性能優越的美國愛貝斯( Abaxis ) HMII分析儀擁有一整套對應不同動物種類的復雜方程式,來準確地辨認和歸類不同種類的動物細胞,從而大大提升電阻法計數的精確度。
激光法應用的是流式細胞測量法來進行細胞計數,以及通過(鐳射)光散射來辨別和分類細胞。這種方法的好處是可以分析細胞內部,因而區分細胞的不同結構(如粒性白細胞等)。多種染色方法的使用進一步描繪出細胞的類型和鑒別細胞內容物(如網狀細胞)。采用這類技術的有拜耳(Bayer)Advia系列(Advia 60結合了電阻法和流式細胞測量法,Advia 120僅應用了流式細胞測量法,它可進行動物血細胞分析)。Advia 120在獸醫方面的應用表現出和手工方法的相關性,因而被動物教學醫院和標準參照實驗室采用。但是,這個儀器的價格在US$150-200,000(約合人民幣120-160萬),對大多數動物醫院和診所來說高不可攀。
美國愛貝斯( Abaxis ) HMII分析儀已通過美國FDA認證,并且2004年美國科羅拉多州立大學和加拿大安大略省獸醫學院將HMII和大型鐳射檢測儀( Bayer Advia 120 )作過對比研究,所得出的血像在精確度及測試的穩定性上二者不相伯仲,表現驚人。
然而,即使是最先進的血細胞分析儀也會受到動物血樣特異性的影響。最常見的問題如下:
·貓科動物的抗溶紅細胞(lyse-resistant RBCs)
·貓科動物的巨大和/或凝集的血小板
·犬科動物的白細胞大小均一性(約為20-25%)
·未成熟/病理細胞分類的混淆
理解上述問題是很重要的,可讓您理解血細胞分析儀的原理和限制,從而幫助您驗證和選購動物專用的血細胞分析儀。
如果你正在考慮買一臺血細胞分析儀,請堅持要求銷售商允許您和您的職員親自操作這臺儀器。從您的診所角度來評估它的:
·操作簡便性
·得出結果所需的時間
·所需要的樣本量
·可檢測的動物種類
·維修需求
·數據庫容量和功能
然后,您把儀器得出的測試結果和標準實驗室或手工看顯微鏡片所得出的結果對照,來證實準確和精確度。并且請您用同一個樣本做多次檢測,來確定結果的重復再現性(精確度)。