摘 要 應用高速逆流色譜分離制備白花敗醬草中的異葒草苷和異牡荊苷,以乙酸乙酯∶乙醇∶水(4∶1∶5)為兩相溶劑系統,上相為固定相,下相為流動相,流速2. 0 mL /min,主機800 r/min,檢測波長254 nm。以此分離條件經一步洗脫,從300 mg白花敗醬草粗提物中制備得到異葒草苷24. 1 mg和異牡荊苷49. 8 mg,產物純度經HPLC檢測高達98. 0%,結構經UV、IR、MS、1H NMR和13C NMR鑒定,二者均為首次從敗醬屬植物中分離得到。
白花敗醬草( Patrinia V illosa Juss)系敗醬科多年生草本植物,分布于我國華東、華中、華南及西南各地,始載于《神農本草經》,后又被《中國藥典》(1977版)收載,具有清熱利濕、解毒排膿、活血化瘀、清心安神、促進肝細胞再生、改善肝功能、增強抑菌和抗病毒等作用。
異葒草苷和異牡荊苷(結構式見圖1)廣泛分布于天然產物當中[ 1～3 ] 。現代藥理研究表明,異葒草苷具有明顯的保肝活性[ 4 ] ,異牡荊苷具有很強的抗氧化活性[ 5 ] 。因此,如何快速、簡便的從天然產物中分離純化高純度異葒草苷和異牡荊苷,對進一步研究藥效作用機制具有重要意義;同時有助于進行以異葒草苷和異牡荊苷為指標性成分的藥材及相關制劑的質量控制。
采用傳統的柱色譜法從天然產物中制備這兩種活性成分,不僅費時費力、污染環境, 而且所用固定相對樣品有不可逆性吸附作用。高速逆流色譜(high2speed counter2current chromatography, HSCCC)不用任何固體支撐體或載體,克服了傳統分離方法對樣品的不可逆性吸附作用,因而樣品回收率高[ 8 ] 。同時,還具有應用范圍廣、儀器操作簡單、分離量大等優點,因此被廣泛應用于天然產物的分離制備[ 7～9 ] 。
本實驗采用1300大孔吸附樹脂從白花敗醬草中制備得到粗提物,以此粗提物進行高速逆流色譜分
離純化,經一步洗脫分離得到純度高于98. 0%的異牡荊苷和異葒草苷;制備量大、操作簡單。目前,還
未見快速、大量地從白花敗醬草中分離一種或多種成分的報道,也未見HSCCC用于敗醬屬植物化學成
分分離的報道。