摘要:目的 從千層塔植物提取物中分離制備石杉堿甲單體。方法 利用高速逆流色譜技術,通過尋找合適的兩相溶劑體系及工藝參數,研究及討論石杉堿甲分離制備的新方法。結果 以n2Hexane /n2BuOH /H2O (4∶1∶5,V /V /V)為兩相溶劑體系,在優化的工藝參數條件下,利用高速逆流色譜技術,獲得了單體純度為98. 6% (HPLC)的石杉堿甲單體。結論 利用高速逆流色譜技術成功地從千層塔植物提取物中分離制備了純度高于98%的石杉堿甲單體。
高速逆流色譜(High2speed Countercurrent Chromatography,簡稱HSCCC)技術是一種較為新型的無固體支撐的液-液分配色譜技術,由美國國立健康研究院(National Instituteof Health,U. S. A) Ito博士最先研制開發。它利用螺旋管分離柱在做行星式運動時形成的單向性流體動力平衡體系,使得互不混溶的兩相溶劑不斷混合,同時保留其中的一相作為色譜分離的固定相,而另一相在恒流泵的作用下連續輸入作為色譜分離的流動相,從而在螺旋管柱內形成固定相與流動相連續的兩相分割與對流趨勢,實現連續、高效的液2液分配過程[ 1 ]。目前此項技術已被應用于生化、生物工程、醫藥、天然產物化學、有機合成、環境分析、食品、地質、材料等領域[ 2 ]。20世紀90年代以來,高速逆流色譜技術被廣泛地應用于天然藥物成分的分離制備與分析鑒定中[ 3 ]。
石杉堿甲是從中國特有植物千層塔(蛇足石杉)中提取的一種生物堿,是中國獨創的一種世界級新藥,屬于可逆性膽堿酯酶抑制劑,是目前治療良性記憶障礙和早老性癡呆癥最為安全有效的藥物之一[ 425 ]。石杉堿甲單體在千層塔植物干燥全草中的含量約為0. 02% ,且常伴有成分復雜、結構相似的共生生物堿,應用常規的分離方法難以大量獲得[ 6 ]。目前采用的生產方法為溶劑法,產品得率低,生產周期長[ 7-11 ]。有機合成石杉堿甲由于技術問題,目前尚未獲得突破[ 12-13 ]。
利用現代高新分離技術———高速逆流色譜,以千層塔植物提取物為原料,對石杉堿甲單體的制備進行研究,獲得重大突破,取得一種分離周期短、產品純度高、分離量大且穩定的工藝路線。本論文將對這一研究成果作一簡要的介紹,而與本課題相關的分項研究,如高速逆流色譜溶劑體系的選擇、分離樣品的預處理、高速逆流色譜主要工藝參數(溫度、轉速及流速)的優化及工藝的產業化拓展研究(上樣量及兩相溶劑體系的單獨配制)等將在其他論文中陸續發表。