摘 要:目的:建立一種高效、快速的分離制備茶皂素單體的高速逆流色譜方法。方法:微波輔助提取茶皂素后,用D-101 大孔樹脂初步純化,所得粗品經高速逆流色譜分離純化,乙酸乙酯- 正丁醇- 水(1:4:4,V/V,含體積分數3% 的乙酸)為兩相溶劑系統,轉速800r/min、流速1.5mL/min、檢測波長267nm、進樣量100mg,所得分離收集液經高效液相色譜法檢測。結果:從茶皂素粗提物中分離得到純度分別為99.1% 和94.5% 的兩種茶皂素單體,經干燥稱得其質量分別為11mg 和15mg。結論:該方法制備茶皂素單體簡便、快速,所得產物的純度高,為茶皂素的分離純化提供了一種新途徑。
關鍵詞:高速逆流色譜(HSCCC);茶皂素單體;制備;純化
茶粕,又稱茶籽餅,呈紫褐色顆粒,是野山茶油果實榨油后所剩的渣。茶粕中含有11%~13% 的茶皂素。茶皂素又名茶皂苷,是一種純天然非離子型表面活性劑。目前,茶皂素已廣泛用于各行業中。在農藥上,茶皂素可以作為農藥濕潤劑、增效劑或直接用于殺蟲劑、殺菌劑、殺螨劑;在紡織業上,茶皂素對蛋白質纖維無損傷,其優良的去污、起泡、穩泡等多種功能,使其在對絲織物等的洗滌方面具有優越性;在醫藥上,茶皂素具有其他表面活性劑所沒有的抗滲、消炎、鎮痛、抗癌等藥理功能;在養殖業上,利用茶皂素的溶血和魚毒作用,可殺死有害魚類,但對蝦無影響,用于蝦養殖的清池劑;在建筑上,茶皂素可以作為加氣混凝土的氣泡穩定劑;在日用化工上,利用茶皂素的表面活性作用,可用于洗發劑和洗面劑等;在食品行業上,作為發泡劑、穩泡劑應用于啤酒生產[ 1 ]。
目前,對茶皂素的提取大多采用水提法[2]、有機溶劑法[3 ]、超濾膜法[4 ]等,這些方法不同程度地存在得率低、提取時間長、能耗大、純度低等不足,本研究采用微波輔助提取、高速逆流色譜(high-speed countercurrentchromatography,HSCCC)純化茶皂素單體。高速逆流色譜是一種新型的液- 液分配色譜技術,在短時間內實現樣品在互不相溶的兩相溶劑系統中的高效分配,從而實現樣品分離。HSCCC 最大的優點在于每次的進樣量比較大,可以達到毫克量級,甚至克量級;同時,由于不需要固體支撐物,因而避免了固體固定相不可逆吸附而引起的樣品損失、失活、變性等問題,樣品回收率高[5]。目前,國內外還未見HSCCC 分離制備茶皂素的文獻報道。本實驗采用高速逆流色譜對茶粕
中的茶皂素單體進行純化,優化最佳的分離純化條件,為茶皂素單體的理化性質和生物學作用研究提供純品。