蛋白酶
【測定原理】中性蛋白酶在一定的溫度和pH條件下,水解酪素底物產生含有酚基的氨基酸,在堿性條件下,將福林試劑還原,生成鉬藍與鎢藍,其顏色深淺與酚基氨基酸含量成正比。通過在660 nm測定其吸光度,可得到酶解產生的酚基氨基酸的量,計算出蛋白酶活力,以此代表蛋白酶的總酶活力。
【酶活測定】取3支試管（一支空白管,兩支樣品管）,分別向3支試管中準確加入稀釋好的待測酶液1.0 mL,將3支試管放入40℃水浴中預熱5 min,同時將測定底物（1%酪素）置同一溫度水浴中預熱5 min。分別向兩只樣品管中加入1%酪素溶液1.0 mL,準確計時,反應10 min取出。迅速準確向兩只樣品管加入0.4 mol/L三乙酸2mL,于空白管中加入0.4 mol/L三乙酸2 mL和1.0 mL 1%酪素溶液,搖勻。3支試管中反應液用濾紙過濾。另取3支試管,分別吸取上述相應濾出液1.0 mL,0.4 mol/L碳酸鈉溶液5.0 mL和稀福林試劑1.0 mL,搖勻,置40℃水浴中放置20 min（顯色）,取出,迅速冷卻置室溫。以空白管調儀器零點,在分光光度計波長660 nm處分別測兩支樣品管吸光度,取平均值。通過查標準曲線求出生成酪氨酸的含量。