日前,國際學術刊物Journal of Virological Methods在線發表了中國科學院上海巴斯德研究所黃忠課題組關于成功制備針對腸道病毒EV71的中和性單克隆抗體的最新研究成果。
腸道病毒EV71是引起手足口病的主要病原體。手足口病是常發于5歲以下兒童的傳染性疾病,部分患者會出現腦炎、肺水腫以及癱瘓等嚴重神經癥狀,甚至導致死亡。近幾年,手足口病在亞太地區廣泛流行,對兒童的健康成長造成嚴重威脅。在中國,僅2010年和2011年衛生部統計,就共有 3,394,375例感染,其中死亡1414例。但是,目前缺乏簡便快速地檢測EV71病毒的方法,更沒有預防性疫苗和治療性藥物。因此,開發相應的診斷試劑和抗病毒藥物對于預防和治療手足口病意義重大。
上海巴斯德所博士研究生庫志強、石金平和劉慶偉在黃忠研究員的指導下,利用基因工程手段制備了不具感染性的EV71病毒樣顆粒作為免疫原,通過免疫小鼠使其產生具有抗病毒能力的中和抗體。然后,利用傳統的雜交瘤技術制備了三株能夠分泌中和抗體的雜交瘤細胞D5、C4和H7。
各項生化分析表明,這些單克隆抗體能夠特異地識別EV71病毒表面的衣殼蛋白。免疫熒光實驗顯示,這些抗體還能夠檢測到感染細胞中的EV71病毒。因此,這些單克隆抗體可以用于進一步開發針對EV71的診斷試劑盒。更重要的是,在體外實驗中,這些單克隆抗體在非常低的濃度下還能夠有效地阻止病毒侵入細胞,提示它們具有開發成用于治療的人源化單克隆抗體藥物的潛力。
該研究為EV71感染的早期診斷和單克隆抗體藥物研發奠定了良好基礎。研究工作得到了中科院“百人計劃”的資助。
圖 單抗保護效果。(A) 未受感染的RD細胞;(B) 培養基孵育;(C) 1.25ug/ml的抗HBsAg對照單抗;(D) 0.3125ug/ml的D5單抗;(E) 0.3125ug/ml的H7單抗;(F) 1.25ug/ml的C4單抗。
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