分析化學提取凈化之（一）氮吹儀，固相萃取儀的使用

引言

分析化學是人們獲得物質化學組成和結構信息的科學，它是研究物質化學組成的表征和測量的科學，是化學學科的重要分支，它所解決的問題是物質是什么組分組成的，這些組分在物質中是如何存在的，以及各組分的含量有多少。

分析化學是研究物質及其變化規律的重要方法之一，它在人們的生活生產中發揮著重要的作用。

1分析化學與食品安全

2009年2月28日第十一屆全國人民代表大會常務委員會第七次會議通過了《中華人民共和國食品安全法》，以此保證食品安全，保障公眾身體健康和生命安全。食品安全是一個相對的概念，所謂不安全的食品就是指人們食用以后出現的各種不適感覺或者長期積累引起某些異常的代謝。

利用分析化學手段對食品的成分、性質等進行測定是分析化學的一大類應用，更是食品安全的有效保障。2008年的奶粉事件一方面充分暴露出我國在食品安全上的漏洞，另一方面也必將推動分析化學的繼續發展。

三聚氰胺（Melamine），是一種三嗪類含氮雜環有機化合物，重要的氮雜環有機化工原料。目前，三聚氰胺被認為毒性輕微。但動物長期攝人三聚氰胺會造成zhengzhi、泌尿系統的損害，膀胱、腎部結石，并可進一步誘發膀胱癌。對于原料乳與乳制品中三聚氰胺含量的測定，國際標準《原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法》（GB/T 22388-2008）中選用了液相色譜法、液相色譜-質譜/質譜法和氣相色譜-質譜聯用法。

方法：液相色譜法測定原料乳與乳制品中三聚氰胺含量

1.1原理

用三lu乙suan溶液-乙腈提取試樣，經陽離子交換固相萃取柱凈化后，用液相色譜測定，外標法定量。

1.2試劑與材料

甲醇、乙腈、25％～28％的氨水、三lu乙suan、檸檬suan、辛烷磺suan鈉、甲醇水溶液（含50mL甲醇和50mL水）、三lu乙suan溶液（1％）、氨化甲醇溶液（5％）、離子對試劑緩沖液（由檸檬suan和辛烷磺suan鈉配制）、三聚氰胺標準品（CAS108-78-01，純度＞99.0%）、三聚氰胺標準儲備液（1mg/mL）。所有試劑均為分析純，水為GB/T 6682規定的一級水。陽離子交換固相萃取柱、定性濾紙、海砂、微孔濾膜、氮氣（純度≥99.999％）

1.3儀器和設備

液相色譜（HPLC）儀、分析天平、離心機、超聲波水浴器、固相萃取裝置、氮氣吹干儀、渦旋混合器、50mL具塞塑料離心管、研缽

1.4樣品處理

1.4.1提取

①液態奶、奶粉、suan奶、冰淇淋和奶糖等。

稱取2g（至0.01g）試樣于50mL具塞塑料離心管中，加入15mL三lu乙suan溶液和5mL乙腈，超聲提取10min，再振蕩提取10min后，以不低于4000r/min離心10min。上清液經三lu乙suan溶液潤濕的濾紙過濾后，用三lu乙suan溶液定容至25mL，移取5mL濾液，加入5mL水混勻后做待凈化液。

②奶酪、奶油和巧克力等。

稱取2g（至0.01g）試樣于研缽中，加入適量海砂（試樣質量的4倍～6倍）研磨成干粉狀，轉移至50mL具塞塑料離心管中，用15mL三lu乙suan溶液分數次清洗研缽，清洗液轉入離心管中，再往離心管中加入5mL乙腈，超聲提取10min，再振蕩提取10min后，以不低于4000r/min離心10min。上清液經三lu乙suan溶液潤濕的濾紙過濾后，用三lu乙suan溶液定容至25mL，移取5mL濾液，加入5mL水混勻后做待凈化液。

若樣品中脂肪含量較高，可以用三lu乙suan溶液飽和的正己烷液-液分配除脂后再用SPE柱凈化。

1.4.2凈化

將待凈化液轉移至固相萃取柱中。依次用3mL水和3mL甲醇洗滌，抽至近干后，用6mL氨化甲醇溶液洗脫。整個固相萃取過程流速不超過1mL/min。洗脫液于50℃下用氮氣吹干，殘留物（相當于0.4g樣品）用1mL流動相定容，渦旋混合1min，過微孔濾膜后，供HPLC測定。

1.5液相色譜測定

1.5.1標準曲線的繪制

用流動相將三聚氰胺標準儲備液逐級稀釋得到的濃度為0.8、2、20、40、80μg/mL的標準工作液，濃度由低到高進樣檢測，以峰面積-濃度作圖，得到標準曲線回歸方程。

1.5.2定量測定

待測樣液中三聚氰胺的響應值應在標準曲線線性范圍內，超過線性范圍則應稀釋后再進樣分析。

1.6空白實驗

除不稱取樣品外，均按上述測定條件和步驟進行。

本方法的定量限為2mg/kg。在添加濃度2mg/kg～10mg/kg濃度范圍內，回收率在80%～110%之間，相對標準偏差小于10%。在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的差值不得超過算術平均值的10%。