虎杖中游離羥基蒽醌成分的提取和分離——萃取法

虎杖粗粉

乙醇乙醚蒸餾水碳酸氫鈉鹽酸碳酸鈉醋酸鎂試劑氫氧化鈉KOH噴霧氨蒸氣

圓底燒瓶三角瓶分液漏斗pH計玻璃棒烘箱抽濾瓶電子天平硅膠-CMC

一、提取

乙醇總提取物的制備：取虎杖粗粉200g，于1000ml圓底燒瓶中回流，第一次加500ml乙醇回流一小時，第二次加300ml乙醇回流30分鐘，第三次加250ml乙醇回流30分鐘，合并三次乙醇提取液，放置，如有沉淀可過濾一次，濾液減壓回收乙醇至干，得膏狀物。

二、分離

1.親脂性成分與親水性成分的分離：

將上述膏狀物加水10ml，乙醚100ml充分振搖后放置，將乙醚液傾于500ml三角瓶中（水層不可倒出），再于燒瓶中加50ml乙醚振搖，放置，傾出乙醚液，同法操作六次，合并乙醚液即為親脂性成分--總游離蒽醌，乙醚提取過的剩余物中含水溶性成分。

2.游離蒽醌分離：

（1）強酸性成分的分高：將上述含總游離蒽醌的乙醚液置100ml分液漏斗中，加5%碳酸氫鈉水溶液40ml萃取（測5%碳酸氫鈉PH值），放置使充分分層，若提取過程中乙醚揮發可補充，分出堿水溶液同法提取二次，合并堿水提取液，在攪拌下緩緩滴加6N鹽酸調至pH2注意觀察顏色變化，稍放置即可析出沉淀，抽濾，用水洗滌沉淀中性，將沉淀置表面器上干燥，得強酸性成分。

（2）中等酸性成分--大黃素的分離：碳酸氫鈉萃取過的乙醚液用5%碳酸鈉溶液（測5%碳酸鈉水溶液的pH值）萃取5——9次，每次40ml，直至萃取液較淺為止。合并碳酸鈉提取液，小心加鹽酸調pH3，放置，抽濾，水洗沉淀至中性，抽干，干燥稱重。以甲醇一氯仿或苯一氯仿（1：1）重結晶，得大黃酚和大黃素6-甲醚混合物。

（3）中性成分--甾醇類化合物分離：氫氧化鈉萃取過的乙醚液，用水洗至中性，以無水硫酸鈉脫水，回收乙醚得殘留物，以甲醇熱溶二次（10ml,5ml）過濾合并甲醇液，濃縮，放置結晶，濾取沉淀并用少量石油醚洗滌，再用甲醇重結晶，得β-谷甾醇，mp136——137℃，取少許結晶，做醋酐--濃硫酸反應，觀察現象。

三、鑒定

1.化學檢識：分別取大黃素、大黃酚等少許，用乙醚溶解，做如下反應：

A：堿液試驗：取試液1ml，加20%NaOH數滴，觀察顏色。

B.醋酸鎂反應：取試樣1ml，加醋酸鎂試劑數滴，觀察現袋。

2.薄層鑒定：

吸附劑：硅膠-CMC

展開劑：C6H6-EtoAc（3:2或97：9）。

顯色劑：（1）氨蒸氣熏。（2）5%KOH噴霧。

大黃酚和大黃素6-甲醚二者相互分離比較困難，在本實驗薄層條件下為同一斑點，可用層析用磷酸氫鈣進行柱層析，以石油醚洗脫，下層黃色帶洗脫后，以甲醇重結晶可得大黃酚，上層黃色帶洗脫后以甲醇重結晶可得大黃素6-甲醚。

虎杖中主要成分的結構與性質：

1.大黃素（Emodin）：橙黃色長針晶（丙酮中結晶為橙色，甲醇中結晶為黃色），mp256-257℃。幾不溶于水，對于下列溶劑的溶介度分別為：四氯化碳0.01%，氯仿0.0718%，二硫化碳0.009%，乙醚0.14%，苯0.0415。易溶于乙醇，可溶于氨水，碳酸鈉和氫氧化鈉水溶液。

2.大黃酚（Chrysophanol）：金黃色六角型片狀結晶（丙酮中結晶）或針狀結晶（乙醇中結晶）。mp 196℃，能升華。易溶于乙醚、氯仿、苯、冰乙酸、乙醇， 稍溶于甲醇，難溶于石油醚，不溶于水、碳酸氫鈉和碳酸鈉水溶液。可溶氫氧化鈉水溶液及熱碳酸鈉水溶液。

3.大黃素6-甲醚，（Emodinmonomethl ether）：金黃色針晶，mp207℃，能升華。可溶于氫氧化鈉水溶液，溶解度與大黃酚相似。

4.大黃素6-甲醚6-D-葡萄糖苷（Anthraglycosibe A）：黃色針晶（稀甲醇中結晶）mp230-232℃。

5.大黃素3-D-葡萄糖苷（Anthraglycoside B）：淺黃色針晶（稀乙醇中結晶含1分子水mp190-191℃。

6.白藜蘆醇（Resveratrol）：無色針狀結晶，mp256-257℃，216℃升華，易溶于乙醚、氯仿、甲醇、乙醇、丙酮等。

7.白藜蘆醇葡萄糖苷（polydotinpeceid）：無色顆粒狀結晶，雙熔點分別為130-140℃,225-226℃，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、熱水，可溶于乙酸乙酯、可溶于碳酸鈉和氫氧化鈉水溶液中，稍溶于冷水，難溶于乙醚。

8.β-谷甾醇

9.鞣質：屬縮合鞣質，可溶于醇及水，不溶于苯、乙醚、氯仿等。

另外。虎杖葉、莖中含少量羥基蒽醌類化合物、有機酸、槲皮苷、異槲皮苷、虎杖黃酮苷、扁蓄苷、金絲桃苷及蕓苷、Vtio等。